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LPS影响p38蛋白在单核细胞内定位
被引量：
1
1
作者
张琳
刘怒云
+2 位作者
姜勇
李庆林
张璐
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期1212-1215,共4页
目的:探讨LPS作用下p38蛋白激酶激活的动力学特点及其在细胞内超微结构中的定位。方法:应用激酶活性测定、胶体金标记的免疫电镜技术观察LPS刺激前后p38蛋白激酶的动力学特点及在单核细胞株Raw264.7中的分布特征。结果:动力学检测结果显...
目的:探讨LPS作用下p38蛋白激酶激活的动力学特点及其在细胞内超微结构中的定位。方法:应用激酶活性测定、胶体金标记的免疫电镜技术观察LPS刺激前后p38蛋白激酶的动力学特点及在单核细胞株Raw264.7中的分布特征。结果:动力学检测结果显示,LPS作用后15min,p38磷酸化活性明显升高,30min达到高峰,2h达基线水平;p38在LPS浓度为100μg/L时达最大激活效应。超微定位结果显示,未受刺激的及EGF刺激的细胞,p38在胞浆和胞核中金颗粒呈弥散性分布,金颗粒弥散在细胞的各个部分,如细胞质中线粒体、内质网、溶酶体;单核细胞株受到LPS刺激后,细胞核区的金颗粒明显增多,而胞浆区域的金颗粒显著减少。结论:单核细胞株Raw264.7受LPS刺激后,其p38蛋白激酶由胞浆移位到胞核。
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关键词
脂多糖类
P38激酶
RAW264.7细胞
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职称材料
应用改良的免疫胶体金包埋方法检测p38蛋白激酶在Raw细胞中的定位
2
作者
张琳
张璐
朴英杰
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2007年第5期560-563,共4页
目的:采用两种包埋方法Lowicryl K4M低温包埋和改良Spurr包埋,观察p38在Raw264.7细胞中的免疫电镜定位,摸索出一种操作简单、适用于南方潮湿多雨天气的免疫电镜包埋方法。方法:分别采用低温包埋剂Lowicryl K4M和改良Spurr树脂包埋两种方...
目的:采用两种包埋方法Lowicryl K4M低温包埋和改良Spurr包埋,观察p38在Raw264.7细胞中的免疫电镜定位,摸索出一种操作简单、适用于南方潮湿多雨天气的免疫电镜包埋方法。方法:分别采用低温包埋剂Lowicryl K4M和改良Spurr树脂包埋两种方法,经包埋后染色,观察p38蛋白激酶在Raw264.7中的超微结构分布。结果:改良Spurr树脂包埋后结果显示,未受刺激的及EGF刺激的Raw264.7中,p38在胞浆和胞核中金颗粒弥散在细胞的各个部分,受到LPS刺激后,细胞核区的金颗粒明显增多,而胞浆区域的金颗粒显著减少,观察到的Raw细胞超微结构清晰、免疫胶体金定位准确,与低温包埋剂Lowicryl K4M包埋结果完全一致。结论:相对于Lowicryl K4M,Spurr树脂价格低廉,粘度低、抗湿性能好、切割性能佳、操作简单,是一种适用于南方潮湿多雨天气的免疫电镜包埋剂,可以替代低温包埋剂Lowicryl K4M。
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关键词
树脂
免疫胶体金电镜
P38蛋白激酶
转位
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职称材料
多巴胺受体在可卡因诱导的转录因子CREB活化中的作用(英文)
被引量：
2
3
作者
刘怒云
张琳
+1 位作者
王小宁
张璐
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期715-718,共4页
目的研究多巴胺受体在可卡因诱导的转录因子CREB磷酸化活化中的调控作用。方法采用D1和D3多巴胺受体抑制剂,应用Westernblotting检测D1与D3多巴胺受体在可卡因诱导的cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化活化中的作用及D1和D3多巴胺受体抑...
目的研究多巴胺受体在可卡因诱导的转录因子CREB磷酸化活化中的调控作用。方法采用D1和D3多巴胺受体抑制剂,应用Westernblotting检测D1与D3多巴胺受体在可卡因诱导的cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化活化中的作用及D1和D3多巴胺受体抑制剂本身对CREB磷酸化活化的影响,进一步应用Westernblotting检测细胞外信号调节激酶(ERK)在CREB磷酸化活化中的作用。结果D1多巴胺受体抑制剂阻止可卡因诱导的CREB磷酸化活化,而D3多巴胺受体抑制剂促进可卡因诱导的CREB磷酸化活化,D1和D3多巴胺受体抑制剂本身不能诱导CREB磷酸化活化。MEK的特异性抑制剂SL327可以抑制可卡因诱导的CREB磷酸化活化。结论D1和D3多巴胺受体对CREB的磷酸化活化起反式调控作用,并且这种反式调控作用依赖于ERK信号通路。
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关键词
可卡因
多巴胺受体
CAMP反应元件结合蛋白
细胞外信号调节激酶
基因表达
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职称材料
题名
LPS影响p38蛋白在单核细胞内定位
被引量：
1
1
作者
张琳
刘怒云
姜勇
李庆林
张璐
机构
南方医科大学
组
织
学
与胚胎
学
教研室
南方医科大学
中医药
学
院
南方医科大学
广东省
功能
蛋白质
组
学
重点
实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期1212-1215,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30672565
No.30100031)
+1 种基金
广东省自然科学基金资助项目(No.40204411
No.06024380)
文摘
目的:探讨LPS作用下p38蛋白激酶激活的动力学特点及其在细胞内超微结构中的定位。方法:应用激酶活性测定、胶体金标记的免疫电镜技术观察LPS刺激前后p38蛋白激酶的动力学特点及在单核细胞株Raw264.7中的分布特征。结果:动力学检测结果显示,LPS作用后15min,p38磷酸化活性明显升高,30min达到高峰,2h达基线水平;p38在LPS浓度为100μg/L时达最大激活效应。超微定位结果显示,未受刺激的及EGF刺激的细胞,p38在胞浆和胞核中金颗粒呈弥散性分布,金颗粒弥散在细胞的各个部分,如细胞质中线粒体、内质网、溶酶体;单核细胞株受到LPS刺激后,细胞核区的金颗粒明显增多,而胞浆区域的金颗粒显著减少。结论:单核细胞株Raw264.7受LPS刺激后,其p38蛋白激酶由胞浆移位到胞核。
关键词
脂多糖类
P38激酶
RAW264.7细胞
Keywords
Lipopolysaccharides
p38 MAP kinase
Raw264. 7 cells
分类号
Q2 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
应用改良的免疫胶体金包埋方法检测p38蛋白激酶在Raw细胞中的定位
2
作者
张琳
张璐
朴英杰
机构
南方医科大学
组
织
学
与胚胎
学
教研室
南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室重大疾病的转录组与蛋白质组学教育部重点实验室
出处
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2007年第5期560-563,共4页
基金
国家自然科学基金(30672565
30100031)
+1 种基金
广东省自然科学基金(40204411
06024380)
文摘
目的:采用两种包埋方法Lowicryl K4M低温包埋和改良Spurr包埋,观察p38在Raw264.7细胞中的免疫电镜定位,摸索出一种操作简单、适用于南方潮湿多雨天气的免疫电镜包埋方法。方法:分别采用低温包埋剂Lowicryl K4M和改良Spurr树脂包埋两种方法,经包埋后染色,观察p38蛋白激酶在Raw264.7中的超微结构分布。结果:改良Spurr树脂包埋后结果显示,未受刺激的及EGF刺激的Raw264.7中,p38在胞浆和胞核中金颗粒弥散在细胞的各个部分,受到LPS刺激后,细胞核区的金颗粒明显增多,而胞浆区域的金颗粒显著减少,观察到的Raw细胞超微结构清晰、免疫胶体金定位准确,与低温包埋剂Lowicryl K4M包埋结果完全一致。结论:相对于Lowicryl K4M,Spurr树脂价格低廉,粘度低、抗湿性能好、切割性能佳、操作简单,是一种适用于南方潮湿多雨天气的免疫电镜包埋剂,可以替代低温包埋剂Lowicryl K4M。
关键词
树脂
免疫胶体金电镜
P38蛋白激酶
转位
Keywords
resin
immunogold electron microscopy
p38 mitogen-activated protein kinase
translocation
分类号
Q2 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
多巴胺受体在可卡因诱导的转录因子CREB活化中的作用(英文)
被引量：
2
3
作者
刘怒云
张琳
王小宁
张璐
机构
南方医科大学
生物技术
学
院分子免疫研究所
南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室重大疾病的转录组与蛋白质组学教育部重点实验室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期715-718,共4页
基金
SupportedbyScienceTechnologyResearchProjectofGuangdong(2005B50301010)andNaturalScienceFoundationofGuangdong(40204411)
文摘
目的研究多巴胺受体在可卡因诱导的转录因子CREB磷酸化活化中的调控作用。方法采用D1和D3多巴胺受体抑制剂,应用Westernblotting检测D1与D3多巴胺受体在可卡因诱导的cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化活化中的作用及D1和D3多巴胺受体抑制剂本身对CREB磷酸化活化的影响,进一步应用Westernblotting检测细胞外信号调节激酶(ERK)在CREB磷酸化活化中的作用。结果D1多巴胺受体抑制剂阻止可卡因诱导的CREB磷酸化活化,而D3多巴胺受体抑制剂促进可卡因诱导的CREB磷酸化活化,D1和D3多巴胺受体抑制剂本身不能诱导CREB磷酸化活化。MEK的特异性抑制剂SL327可以抑制可卡因诱导的CREB磷酸化活化。结论D1和D3多巴胺受体对CREB的磷酸化活化起反式调控作用,并且这种反式调控作用依赖于ERK信号通路。
关键词
可卡因
多巴胺受体
CAMP反应元件结合蛋白
细胞外信号调节激酶
基因表达
Keywords
cocaine
dopamine receptor, cAMP response element-binding protein
extracellular signal-regulated kinase
gene expression
分类号
Q42 [生物学—神经生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
LPS影响p38蛋白在单核细胞内定位
张琳
刘怒云
姜勇
李庆林
张璐
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
应用改良的免疫胶体金包埋方法检测p38蛋白激酶在Raw细胞中的定位
张琳
张璐
朴英杰
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2007
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
多巴胺受体在可卡因诱导的转录因子CREB活化中的作用(英文)
刘怒云
张琳
王小宁
张璐
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
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