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应用抗SjP38的单克隆抗体建立血吸虫感染的胶体金免疫层析检测体系被引量：7: 1; 作者吴锦雅杨培良 +2 位作者周晓红李华陈晓光《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期538-541,共4页; 目的建立一种检测日本血吸虫感染的胶体金免疫层析方法。方法将已获得的单抗用protein-G亲和层析纯化,通过间接ELISA测定每株单抗的亲和常数。按改良过碘酸钠标记法,8株单抗标记辣根过氧化物酶(HRP)后进行不同株单抗配对,选出亲和力高... 展开更多; 关键词血吸虫日本 P38 单克隆抗体胶体金免疫层析方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

广州管圆线虫M_r32000抗原的免疫诊断效果评价被引量：15: 2; 作者李华陈晓光 +3 位作者沈浩贤陈代雄裘玉蓉胡小佳《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期380-383,共4页; 目的评价广州管圆线虫Mr32000抗原(AC32)的诊断价值。方法利用切胶纯化法从广州管圆线虫成虫抗原中获取AC32,用Westernblotting和ELISA方法检测61例广州管圆线虫感染大鼠血清、5例正常鼠血清、1例广州管圆线虫病人血清、50例其他寄生虫... 展开更多; 关键词广州管圆线虫抗原/纯化免疫诊断; 在线阅读下载PDF 职称材料

具有免疫反应性的弓形虫多表位抗原在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定被引量：4: 3; 作者杨培梁陈晓光 +4 位作者王元占李华周晓红吴焜言慧《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期528-530,544,共4页; 目的获得弓形虫多表位基因在原核系统中可溶性表达产物,为弓形虫病重组抗原试剂盒的制备及疫苗的研究奠定基础。方法以PCR法扩增弓形虫多表位基因,使其两端带有与载体pET32a相匹配的酶切位点,插入载体pET32a,酶切并测序鉴定后,转入大肠... 展开更多; 关键词弓形虫多表位大肠杆菌蛋白表达免疫反应性; 在线阅读下载PDF 职称材料

中华按蚊防御素基因的克隆、原核表达及其重组产物生物活性的初步评价被引量：4: 4; 作者阎晓宇陈晓光 +1 位作者彭鸿娟郑学礼《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期371-376,共6页; 目的克隆、原核表达中华按蚊的防御素基因,并对其表达产物的生物学活性进行评价。方法根据已发表的埃及伊蚊和冈比亚按蚊防御素基因序列设计合成两对引物,以中华按蚊成蚊cDNA为模板进行PCR扩增,将预期片段克隆测序并进行分析;根据表达质... 展开更多; 关键词中华按蚊防御素基因克隆蛋白表达抑菌活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用抗SjP38的单克隆抗体建立血吸虫感染的胶体金免疫层析检测体系被引量：7: 1; 作者吴锦雅杨培良周晓红李华陈晓光; 机构南方医科大学寄生虫学教研室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期538-541,共4页; 基金 WHO/TDR研究基金资助(A990310 A00191) +1 种基金广州市科技项目(200223-T24011)~~; 文摘目的建立一种检测日本血吸虫感染的胶体金免疫层析方法。方法将已获得的单抗用protein-G亲和层析纯化,通过间接ELISA测定每株单抗的亲和常数。按改良过碘酸钠标记法,8株单抗标记辣根过氧化物酶(HRP)后进行不同株单抗配对,选出亲和力高、稳定性强的单抗配对组合。胶体金标记4株抗体,选择最佳反应模式,建立胶体金免疫层析方法,并对弓形虫感染鼠血样、血吸虫感染前和感染后2、3、4、5、6周的鼠血样进行检测。结果8株抗SjP38单克隆抗体经纯化后纯度达95%以上,其亲和常数介于1×10-8mol/L^2.82×10-10mol/L。根据配对实验,1A6与9H6、1A6与9G7、6G12与9H6、6G12与9G7以及9H6与9G7为最佳配对组合。标记1A6、6G12、9H6与9G7这4株单抗后筛选出最佳反应模式,即以9G7为包被抗体,包被浓度为2.5μg/μl;当1A6为金标抗体,抗体稀释浓度为1:4时,检测效果最佳。对rSjP38的最低检测量为12.5ng/ml。抗检测感染3、4、5、6周小鼠血清,阳性率分别为40%、50%、60%、80%,而弓形虫感染鼠和血吸虫感染前小鼠血样的检测结果为100%阴性。结论通过抗体配对、最佳包被量和金标抗体稀释倍数条件的优化,建立了快速、简便、特异的胶体金免疫层析方法,自制的rSjP38试纸条能检测血吸虫早期感染鼠血清中的循环抗原SjP38。; 关键词血吸虫日本 P38 单克隆抗体胶体金免疫层析方法; Keywords Schistosome japonicum p38 monoclonal antibody colloid gold immunochromatographic assay; 分类号 R446.6 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名广州管圆线虫M_r32000抗原的免疫诊断效果评价被引量：15: 2; 作者李华陈晓光沈浩贤陈代雄裘玉蓉胡小佳; 机构南方医科大学寄生虫学教研室广州医学院病原生物学教研室南方医科大学南方医院检验科; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期380-383,共4页; 基金国家科技部十五重大科技攻关项目(2003BA712A03-07)~~; 文摘目的评价广州管圆线虫Mr32000抗原(AC32)的诊断价值。方法利用切胶纯化法从广州管圆线虫成虫抗原中获取AC32,用Westernblotting和ELISA方法检测61例广州管圆线虫感染大鼠血清、5例正常鼠血清、1例广州管圆线虫病人血清、50例其他寄生虫体阳性患者血清和50例献血员血清。结果AC32和成虫粗抗原包被的ELISA检测61份感染大鼠血清和1例临床诊断为广州管圆线虫病人血清均为阳性;AC32-ELISA检测的50例献血员、20例急性血吸虫病人、11例弓形虫病人和所检测的其他寄生虫抗体阳性患者血清均为阴性。结论AC32在广州管圆线虫病的血清学诊断中具有较高的敏感性和特异性。; 关键词广州管圆线虫抗原/纯化免疫诊断; Keywords Angiostrongylus cantonensis antigen/purification immunodiagnosis; 分类号 R446.6 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名具有免疫反应性的弓形虫多表位抗原在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定被引量：4: 3; 作者杨培梁陈晓光王元占李华周晓红吴焜言慧; 机构南方医科大学南方医院实验动物研究中心南方医科大学寄生虫学教研室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期528-530,544,共4页; 基金广东省自然科学基金(20020041) 广州市科技计划项目基金(2002Z-T24011)~~; 文摘目的获得弓形虫多表位基因在原核系统中可溶性表达产物,为弓形虫病重组抗原试剂盒的制备及疫苗的研究奠定基础。方法以PCR法扩增弓形虫多表位基因,使其两端带有与载体pET32a相匹配的酶切位点,插入载体pET32a,酶切并测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行诱导,SDS-PAGE分析和鉴定该基因的表达水平、表达产物的可溶性及其相对分子质量,Western-blot分析表达产物的免疫反应性。结果该基因在原核表达系统中经诱导,得到了Mr31000的可溶性融合表达产物。经Ni-NTA纯化,纯度可达90%以上。免疫印迹实验表明该产物能够被弓形虫B36感染的小鼠血清和弓形虫RH感染的兔血清特异识别。结论弓形虫多表位基因在原核中的可溶性表达产物在弓形虫病诊断及疫苗研究中有潜在的应用价值。; 关键词弓形虫多表位大肠杆菌蛋白表达免疫反应性; Keywords expression, multiepitope, antigen, Toxoplasma gondii, immunoreactivity; 分类号 S852.7 [农业科学—基础兽医学] R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中华按蚊防御素基因的克隆、原核表达及其重组产物生物活性的初步评价被引量：4: 4; 作者阎晓宇陈晓光彭鸿娟郑学礼; 机构南方医科大学寄生虫学教研室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期371-376,共6页; 基金国家自然科学基金(30271162) 广州市科技开发项目(2001-001J-01)~~; 文摘目的克隆、原核表达中华按蚊的防御素基因,并对其表达产物的生物学活性进行评价。方法根据已发表的埃及伊蚊和冈比亚按蚊防御素基因序列设计合成两对引物,以中华按蚊成蚊cDNA为模板进行PCR扩增,将预期片段克隆测序并进行分析;根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及测序结果设计PCR引物,将截短的基因片段重组入质粒pET32a(+)中进行表达,纯化表达产物并进行体外抑菌试验。结果PCR扩增产物大小约270bp,目的基因的序列与冈比亚按蚊防御素基因同源性为85%;截取其保守功能区域序列(162bp),构建成功重组表达质粒pET32a(+)-tDEF,含重组质粒的转化菌用IPTG诱导表达后,于Mr26000处可见一预期的特异表达带,该蛋白与抗6-His抗体有特异性的反应;琼脂扩散法显示,纯化的重组防御素融合蛋白未出现抑菌环。结论首次克隆了中华按蚊防御素基因,其截短片段在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,但重组融合蛋白不具备抑菌活性。; 关键词中华按蚊防御素基因克隆蛋白表达抑菌活性; Keywords Anopheles sinensis defensin gene clone protein expression bacteriostasis; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	应用抗SjP38的单克隆抗体建立血吸虫感染的胶体金免疫层析检测体系	吴锦雅杨培良周晓红李华陈晓光	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2005	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	广州管圆线虫M_r32000抗原的免疫诊断效果评价	李华陈晓光沈浩贤陈代雄裘玉蓉胡小佳	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2005	15	在线阅读下载PDF 职称材料
3	具有免疫反应性的弓形虫多表位抗原在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定	杨培梁陈晓光王元占李华周晓红吴焜言慧	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	中华按蚊防御素基因的克隆、原核表达及其重组产物生物活性的初步评价	阎晓宇陈晓光彭鸿娟郑学礼	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料