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晚期糖基化终产物诱导人近端肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1表达上调并活化NADPH氧化酶
被引量：
3
1
作者
傅碧玲
郭志坚
+2 位作者
田建伟
刘志强
曹维
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期674-677,共4页
目的:研究晚期糖基化终产物(AGES)修饰蛋白诱导人近端肾小管上皮HK-2细胞分泌纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响及其相关的氧化应激传导途径。方法:采用不同浓度AGES修饰的人血清白蛋白(AGES-HSA)与肾小管上皮HK-2细胞共培养。用光...
目的:研究晚期糖基化终产物(AGES)修饰蛋白诱导人近端肾小管上皮HK-2细胞分泌纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响及其相关的氧化应激传导途径。方法:采用不同浓度AGES修饰的人血清白蛋白(AGES-HSA)与肾小管上皮HK-2细胞共培养。用光泽精化学发光法检测细胞匀浆中NADPH氧化酶活性,ELISA检测细胞上清液中PAI-1蛋白分泌,RT-PCR法检测PAI-1mRNA表达。结果:AGES-HSA诱导HK-2细胞NADPH氧化酶活化,并以时间、剂量依赖方式上调PAI-1蛋白和mRNA的表达。运用NADPH氧化酶抑制剂DPI、apocynin、氧自由基清除剂SOD可以明显阻断AG-ES-HSA诱导的PAI-1表达。结论:AGES-HSA可通过NADPH氧化酶依赖的氧化应激途径上调肾小管上皮细胞PAI-1表达。
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关键词
晚期糖基化终产物
肾小管上皮细胞
纤溶酶原激活物抑制剂-1
活性氧
NADPH氧化酶
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职称材料
人可溶性晚期糖基化终产物受体的原核表达及活性鉴定
被引量：
3
2
作者
赵善超
姜勇
+7 位作者
刘靖华
李志杰
邓鹏
张桂林
刘志强
张训
侯凡凡
郑少斌
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第7期769-773,共5页
目的构建人可溶性晚期糖基化终产物受体(hsRAGE)His融合蛋白表达载体并在原核细胞表达与纯化。方法PCR扩增hRAGE基因编码区的胞质外段,利用分子克隆技术将其重组于pET-14b载体中。利用酶切、序列分析鉴定克隆正确性。转化大肠杆菌BL21(D...
目的构建人可溶性晚期糖基化终产物受体(hsRAGE)His融合蛋白表达载体并在原核细胞表达与纯化。方法PCR扩增hRAGE基因编码区的胞质外段,利用分子克隆技术将其重组于pET-14b载体中。利用酶切、序列分析鉴定克隆正确性。转化大肠杆菌BL21(DE)3,用异丙基b-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达。以尿素对获得的包涵体进行处理,用金属螯合亲和层析的方法纯化融合蛋白并进行复性。以Western印迹和ELISA法对融合蛋白的免疫原性及与AGE的结合活性进行鉴定。结果克隆的hsRAGE完全正确,经过表达与纯化,获得了相对分子质量约45000的融合蛋白。纯化得到的变性蛋白经复性后可被相应抗体识别。所得到的hsRAGE具有与AGE相互结合的活性,并能够抑制AGE诱导的内皮细胞NF-kB的表达。结论成功地构建了hsRAGE融合蛋白原核表达载体且获得高效表达,得到大量的复性蛋白;该蛋白具有特异的免疫原性,保持与AGE的结合活性,并能够有效阻断AGE-RAGE相互作用。
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关键词
晚期糖基化终产物
原核表达
受体
受体
可溶性
融合蛋白/生物活性
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职称材料
磷脂酰丝氨酸在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用
被引量：
7
3
作者
王燕群
刘尚喜
《实用医学杂志》
CAS
2006年第13期1485-1487,共3页
目的:探讨磷脂酰丝氨酸(PS)在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用。方法:用脂质体整合的方法或用N-乙酢马来酰胺(NEM)预处理红细胞然后整合磷脂,制备含不同凋亡信号的红细胞模型,测定巨噬细胞对整合不同磷脂信号红细胞的结合率与吞噬率。结...
目的:探讨磷脂酰丝氨酸(PS)在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用。方法:用脂质体整合的方法或用N-乙酢马来酰胺(NEM)预处理红细胞然后整合磷脂,制备含不同凋亡信号的红细胞模型,测定巨噬细胞对整合不同磷脂信号红细胞的结合率与吞噬率。结果:单独整合PS或用NEM处理造成PS外翻,可显著提高巨噬细胞对红细胞的结合率,但对吞噬率没有影响。同时整合PS和氧化PS或用NEM处理造成PS外翻后再整合氧化PS,不仅可以显著性提高巨噬细胞对红细胞的结合率,而且可显著性提高吞噬率。结论:PS外翻参与了巨噬细胞对凋亡细胞的结合,而氧化PS促进了巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬,二者的协同作用参与巨噬细胞对凋亡细胞的清除。
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关键词
磷脂酰丝氨酸类
凋亡细胞
吞噬
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职称材料
题名
晚期糖基化终产物诱导人近端肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1表达上调并活化NADPH氧化酶
被引量：
3
1
作者
傅碧玲
郭志坚
田建伟
刘志强
曹维
机构
南方医科大学南方医院肾脏病研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期674-677,共4页
文摘
目的:研究晚期糖基化终产物(AGES)修饰蛋白诱导人近端肾小管上皮HK-2细胞分泌纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响及其相关的氧化应激传导途径。方法:采用不同浓度AGES修饰的人血清白蛋白(AGES-HSA)与肾小管上皮HK-2细胞共培养。用光泽精化学发光法检测细胞匀浆中NADPH氧化酶活性,ELISA检测细胞上清液中PAI-1蛋白分泌,RT-PCR法检测PAI-1mRNA表达。结果:AGES-HSA诱导HK-2细胞NADPH氧化酶活化,并以时间、剂量依赖方式上调PAI-1蛋白和mRNA的表达。运用NADPH氧化酶抑制剂DPI、apocynin、氧自由基清除剂SOD可以明显阻断AG-ES-HSA诱导的PAI-1表达。结论:AGES-HSA可通过NADPH氧化酶依赖的氧化应激途径上调肾小管上皮细胞PAI-1表达。
关键词
晚期糖基化终产物
肾小管上皮细胞
纤溶酶原激活物抑制剂-1
活性氧
NADPH氧化酶
Keywords
glycosylation end products
tubular epithelial cells
PAI-1
reactive oxygen species
NAD- PH oxidase
分类号
R692 [医药卫生—泌尿科学]
R541.4 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
人可溶性晚期糖基化终产物受体的原核表达及活性鉴定
被引量：
3
2
作者
赵善超
姜勇
刘靖华
李志杰
邓鹏
张桂林
刘志强
张训
侯凡凡
郑少斌
机构
南方医科大学南方医院肾脏病研究所
南方医科大学
病
理生理教研室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第7期769-773,共5页
基金
国家自然科学基金(30270622)
国家自然科学基金重点项目(30330300)
+1 种基金
广东省自然科学基金研究团队项目(10717)
国家杰出青年科学基金(39925014)~~
文摘
目的构建人可溶性晚期糖基化终产物受体(hsRAGE)His融合蛋白表达载体并在原核细胞表达与纯化。方法PCR扩增hRAGE基因编码区的胞质外段,利用分子克隆技术将其重组于pET-14b载体中。利用酶切、序列分析鉴定克隆正确性。转化大肠杆菌BL21(DE)3,用异丙基b-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达。以尿素对获得的包涵体进行处理,用金属螯合亲和层析的方法纯化融合蛋白并进行复性。以Western印迹和ELISA法对融合蛋白的免疫原性及与AGE的结合活性进行鉴定。结果克隆的hsRAGE完全正确,经过表达与纯化,获得了相对分子质量约45000的融合蛋白。纯化得到的变性蛋白经复性后可被相应抗体识别。所得到的hsRAGE具有与AGE相互结合的活性,并能够抑制AGE诱导的内皮细胞NF-kB的表达。结论成功地构建了hsRAGE融合蛋白原核表达载体且获得高效表达,得到大量的复性蛋白;该蛋白具有特异的免疫原性,保持与AGE的结合活性,并能够有效阻断AGE-RAGE相互作用。
关键词
晚期糖基化终产物
原核表达
受体
受体
可溶性
融合蛋白/生物活性
Keywords
advanced glycation end products
receptor,prokaryotic expression
receptor,soluble
fusion protein/biological activity
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
磷脂酰丝氨酸在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用
被引量：
7
3
作者
王燕群
刘尚喜
机构
南方医科大学南方医院肾脏病研究所
出处
《实用医学杂志》
CAS
2006年第13期1485-1487,共3页
基金
国家自然科学基金项目(编号:30370370)
文摘
目的:探讨磷脂酰丝氨酸(PS)在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用。方法:用脂质体整合的方法或用N-乙酢马来酰胺(NEM)预处理红细胞然后整合磷脂,制备含不同凋亡信号的红细胞模型,测定巨噬细胞对整合不同磷脂信号红细胞的结合率与吞噬率。结果:单独整合PS或用NEM处理造成PS外翻,可显著提高巨噬细胞对红细胞的结合率,但对吞噬率没有影响。同时整合PS和氧化PS或用NEM处理造成PS外翻后再整合氧化PS,不仅可以显著性提高巨噬细胞对红细胞的结合率,而且可显著性提高吞噬率。结论:PS外翻参与了巨噬细胞对凋亡细胞的结合,而氧化PS促进了巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬,二者的协同作用参与巨噬细胞对凋亡细胞的清除。
关键词
磷脂酰丝氨酸类
凋亡细胞
吞噬
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
晚期糖基化终产物诱导人近端肾小管上皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1表达上调并活化NADPH氧化酶
傅碧玲
郭志坚
田建伟
刘志强
曹维
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人可溶性晚期糖基化终产物受体的原核表达及活性鉴定
赵善超
姜勇
刘靖华
李志杰
邓鹏
张桂林
刘志强
张训
侯凡凡
郑少斌
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
磷脂酰丝氨酸在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用
王燕群
刘尚喜
《实用医学杂志》
CAS
2006
7
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