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结肠癌细胞体外模拟缺氧的相关研究 被引量：5
1
作者 青青 王媛媛 +4 位作者 张绍衡 青海涛 王亚东 陈楚弟 肖冰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期133-137,共5页
目的研究结肠癌细胞SW480与CD133+SW480肿瘤干细胞亚群对CoCl2模拟缺氧的反应性,及缺氧后抗凋亡、血管生成等相关基因mRNA水平表达的变化。方法 Western blotting比较SW480经不同浓度、不同时间CoCl2模拟缺氧后缺氧诱导因子1α(HIF-1α... 目的研究结肠癌细胞SW480与CD133+SW480肿瘤干细胞亚群对CoCl2模拟缺氧的反应性,及缺氧后抗凋亡、血管生成等相关基因mRNA水平表达的变化。方法 Western blotting比较SW480经不同浓度、不同时间CoCl2模拟缺氧后缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的差异;免疫磁珠分选(MACS)CD133+SW480肿瘤干细胞亚群,流式细胞术检测其中CD133+细胞比例,选取稳定SW480细胞HIF-1α表达的最佳CoCl2浓度和时间作用后,Western blotting比较SW480细胞与CD133+SW480肿瘤干细胞亚群HIF-1α的表达差异;观察缺氧对肿瘤干细胞球形成和增殖能力的影响;实时定量PCR比较SW480经CoCl2模拟缺氧后结肠癌干细胞表面标志CD133(PROM1)、抗凋亡基因survivin、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平表达的差异。结果 SW480细胞经200μmol/L CoCl2模拟缺氧8 h,HIF-1α表达量最高;经MACS分选所得CD133+SW480细胞中,CD133+细胞比例为85.56±0.89%;CD133+SW480亚群200μmol/L CoCl2模拟缺氧8 h未见HIF-1α表达;CoCl2模拟缺氧培养后CD133+SW480肿瘤干细胞亚群无血清培养肿瘤干细胞球形成率较常规培养明显增强;SW480经CoCl2模拟缺氧其CD133、survivin、VEGF等mRNA表达分别升高1.607±0.103倍(P<0.05)、2.745±0.370倍(P<0.05)、3.798±0.091倍(P<0.05)。结论 (1)CoCl2能够在体外模拟结肠癌细胞缺氧,稳定HIF-1α的表达;(2)结肠癌细胞模拟缺氧后HIF-1α的表达与CoCl2呈浓度和时间依赖性;(3)CD133抗体标记免疫磁珠分选SW480细胞后,CD133+SW480细胞有较高得率和细胞活性;(4)缺氧可使肿瘤干细胞球形成能力增强,CD133+SW480肿瘤干细胞亚群较普通SW480更能够耐受缺氧,肿瘤干细胞具有不同于普通肿瘤细胞的特殊生物学特性;(5)缺氧可改变肿瘤细胞表型,促进其向肿瘤干细胞转化,并能够增强肿瘤抗凋亡能力和血管形成能力。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 肿瘤干细胞 氯化钴 缺氧 抗凋亡 血管形成
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虎杖苷抑制ox-LDL诱导的脂质过氧化并下调巨噬细胞清道夫受体CD36表达 被引量：9
2
作者 肖铭甲 陈卫红 +3 位作者 吴炜 郭文 赵克森 赵明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1280-1284,共5页
目的:研究虎杖苷抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞氧化反应和调节巨噬细胞清道夫受体CD36表达的功效。方法:将C57/BL6小鼠随机分为生理盐水组、虎杖苷组,分别经腹腔给予1.5%生理盐水、1.5%虎杖苷溶液,连续3d,第4d停止注射,第5d处死老鼠,取腹腔... 目的:研究虎杖苷抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞氧化反应和调节巨噬细胞清道夫受体CD36表达的功效。方法:将C57/BL6小鼠随机分为生理盐水组、虎杖苷组,分别经腹腔给予1.5%生理盐水、1.5%虎杖苷溶液,连续3d,第4d停止注射,第5d处死老鼠,取腹腔巨噬细胞培养。将培养的巨噬细胞给予氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激,观察腹腔巨噬细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性,ox-LDL诱导的巨噬细胞呼吸爆发及脂质过氧化物(LPO)含量,以及清道夫受体CD36的表达调控。结果:与生理盐水组相比,虎杖苷组巨噬细胞的SOD活性明显提高,巨噬细胞的LPO蓄积也明显降低;并且虎杖苷组ox-LDL诱导的巨噬细胞呼吸爆发水平也显著低于生理盐水对照组;虎杖苷组巨噬细胞CD36的表达同样明显低于生理盐水组。结论:虎杖苷可有效抑制巨噬细胞脂质过氧化应激情况下的呼吸爆发,下调其清道夫受体CD36的表达,提示虎杖苷可能具有预防动脉粥样硬化早期病变的功能。 展开更多
关键词 虎杖苷 动脉粥样硬化 CD36 巨噬细胞 呼吸爆发
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锯齿状息肉与传统腺瘤风险因素对比及结直肠癌适宜筛查年龄 被引量：4
3
作者 代倩 刘江 +2 位作者 钟慕晓 朱薇 张亚历 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期673-677,共5页
目的对锯齿状息肉(SPs)及传统腺瘤(CA)相关风险因素进行分析、对比,探讨两类息肉风险因素间异同。方法收集南方医院消化内镜中心2012~2015行全结肠镜及息肉病理检查的病例。随机选取健康对照103例,SPs 100例,CA 115例,采集各病例性别、... 目的对锯齿状息肉(SPs)及传统腺瘤(CA)相关风险因素进行分析、对比,探讨两类息肉风险因素间异同。方法收集南方医院消化内镜中心2012~2015行全结肠镜及息肉病理检查的病例。随机选取健康对照103例,SPs 100例,CA 115例,采集各病例性别、年龄、身高、体质量等临床数据。运用SPSS软件,先对各因素进行组间多重比较,对具有显著性的因素再纳入多因素logistic回归分析,得到风险因素及其OR值。结果 SPs平均发病年龄48.87岁(95%CI 47.22-50.52),较CA更早(P=0.038)。以青年组为参照,中年组发生SPs风险增加2.31倍(95%CI 1.46-3.65)、CA风险增加4.10倍(95%CI 2.50-6.72);老年组发生SPs风险增加2.77倍(95%CI 1.52-5.04)、CA风险增加6.00倍(95%CI 3.26-11.05)。其中,年龄与CA的发生较SPs关系更为密切(老年组:OR=2.14,95%CI 1.21-3.78,P=0.009)。男性较女性SPs发病风险增加2.75倍(95%CI 1.50-5.07)、CA增加2.19倍(95%CI1.22-3.95)。BMI每增加1个单位,SPs发病风险增加1.18倍(95%CI 1.06-1.30)、CA增加1.20倍(95%CI 1.09-1.32)。结论两类息肉风险因素类别相同,可使用同一方案进行高危人群筛查。SPs平均发病年龄早于50岁且有可能快速进展为癌,提早CRC筛查年龄值得考虑。 展开更多
关键词 锯齿状息肉 传统腺瘤 风险因素 筛查
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基因芯片技术筛选和鉴定CD133^+CD200^+大肠癌干细胞相关基因 被引量：4
4
作者 张珊珊 黎丽旋 +2 位作者 黄载伟 辛小敏 肖冰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1787-1791,共5页
目的筛选CD133+CD200+大肠癌细胞并鉴定其相关基因的表达。方法流式细胞术分选CD133+CD200+和CD133-CD200-大肠癌细胞,应用Affymetrix人类全基因组表达谱芯片检测这两群细胞的基因表达谱,初步筛选CD133+CD200+与CD133-CD200-大肠癌细胞... 目的筛选CD133+CD200+大肠癌细胞并鉴定其相关基因的表达。方法流式细胞术分选CD133+CD200+和CD133-CD200-大肠癌细胞,应用Affymetrix人类全基因组表达谱芯片检测这两群细胞的基因表达谱,初步筛选CD133+CD200+与CD133-CD200-大肠癌细胞之间的差异表达基因,进而寻找与大肠癌干细胞特异性相关的主效基因,最后利用qRT-PCR实验对部分差异表达基因进行验证,以确定芯片检测结果的可靠性。结果芯片结果显示差异在3倍以上的基因共655个,CD200+细胞表达上调的基因290个,表达下调的基因共365个,通过生物信息学分析和GENEMANIA共表达构建,筛选出3条(MDM2;PRKACG;CACNA1G)有特异相关的差异基因进行qRT-PCR验证,结果与芯片结果完全相符。结论基因芯片技术通过筛选和鉴定CD133+CD200+大肠癌干细胞相关基因,建立了特异性大肠癌干细胞基因表达谱,为大肠癌基因靶向治疗及进一步研究提供依据。 展开更多
关键词 CD133 CD200 大肠癌干细胞 基因芯片 MAPK信号通路
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RNA干扰靶向抑制PI3K p85α表达对5-FU诱导大肠癌细胞凋亡的影响 被引量：2
5
作者 杨慧 倪丽 +1 位作者 马豫茜 宋于刚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1085-1088,共4页
目的探讨应用RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α表达对5-FU诱导大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法培养已成功沉默PI3Kp85α表达的大肠癌LoVo细胞(PI3Kp85α/RNAi-LoVo)及LoVo对照组细胞,MTT法计算两组细胞5-FU的半数抑制率(IC50),JC-1染色检测线... 目的探讨应用RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α表达对5-FU诱导大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法培养已成功沉默PI3Kp85α表达的大肠癌LoVo细胞(PI3Kp85α/RNAi-LoVo)及LoVo对照组细胞,MTT法计算两组细胞5-FU的半数抑制率(IC50),JC-1染色检测线粒体膜电位(Δψm)的变化,Western blotting检测凋亡蛋白Bcl-6和Bim的表达。结果 PI3Kp85α/RNAi-LoVo细胞组5-FU的IC50值(1.056±0.03562μmol/L)显著低于LoVo对照组(2.796±0.10947μmol/L)(P=0.000),JC-1染色显示5-FU刺激48h后,PI3Kp85α/RNAi-LoVo细胞线粒体膜电位较LoVo对照组细胞显著降低,表明PI3Kp85α/RNAi-LoVo细胞对5-FU更敏感。5-FU刺激48h后,PI3Kp85α/RNAi-LoVo细胞组凋亡蛋白Bcl-6和Bim的表达较LoVo对照组细胞显著增加(P=0.000)。结论应用RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α表达可促进5-FU诱导大肠癌细胞LoVo的凋亡。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 磷脂酰3-激酶p85α亚基 RNA干扰 细胞凋亡 线粒体膜电位 5-氟脲嘧啶
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无血清培养CD133^+Colo205大肠癌细胞可高表达ALDH1 被引量：1
6
作者 黎丽旋 张珊珊 +4 位作者 梁芬芬 林英豪 李润华 陈楚弟 肖冰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期889-893,共5页
目的通过观察含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)培养的Colo205细胞,研究其对CD133与ALDH1表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对Colo205细胞进行培养,以含血清培养基(serum-supplimented medium,SSM)组作为对照... 目的通过观察含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)培养的Colo205细胞,研究其对CD133与ALDH1表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对Colo205细胞进行培养,以含血清培养基(serum-supplimented medium,SSM)组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物CD133表达的阳性率;流式分选SFM组CD133+细胞和CD133-细胞,倒置显微镜观察CD133+细胞和CD133-细胞在无血清培养基中的生长特性;利用细胞免疫荧光检测CD133+细胞和CD133-细胞CD133和ALDH1的表达;分别将CD133+细胞和CD133-细胞在NOD/SCID小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对肿瘤组织检测ALDH1表达。结果 SFM组CD133+细胞比例明显高于SSM组(P<0.05);CD133+细胞在SFM中可以形成肿瘤干细胞球,而CD133-则不能形成;CD133+细胞高表达CD133和ALDH1,且两者共表达,而CD133-细胞则是阴性表达;CD133+细胞和CD133-细胞成瘤后,CD133+细胞组肿瘤组织ALDH1阳性表达,而CD133-细胞组阴性表达。结论含生长因子的无血清培养基培养CD133+Colo205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1,ALDH1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一。 展开更多
关键词 大肠癌 大肠癌干细胞 CD133 ALDH1
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芥菜籽对化学诱导小鼠大肠肿瘤形成过程中体内抗氧化状态的影响 被引量：1
7
作者 袁海锋 郭文 +1 位作者 李新艳 朱明古 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期380-383,共4页
目的:通过观察小鼠体内自由基水平和抗氧化酶活性的影响,探讨芥菜籽对氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)诱导的小鼠大肠肿瘤的预防作用机制。方法:60只昆明品系小鼠随机分为AOM模型组、AOM+5%MS、AOM+10%MS干预组和正常对照组。观察记录... 目的:通过观察小鼠体内自由基水平和抗氧化酶活性的影响,探讨芥菜籽对氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)诱导的小鼠大肠肿瘤的预防作用机制。方法:60只昆明品系小鼠随机分为AOM模型组、AOM+5%MS、AOM+10%MS干预组和正常对照组。观察记录各组小鼠肿瘤发生率;检测小鼠血清中抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-PX)的活力和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的水平。结果:正常对照组小鼠无肿瘤发生。AOM模型组、5%MS和10%MS干预组三组间肿瘤发生率有差异(χ2=6.607,P=0.048);AOM模型组小鼠平均肿瘤数为(2.20±1.21)个,而5%MS和10%MS干预组小鼠平均肿瘤数分别为(1.07±1.10)个和(0.67±0.89)个,与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。小鼠血清抗氧化酶SOD、CAT、GSH-PX的活力:AOM模型组明显低于正常对照组(P<0.05);MS干预组与AOM模型组相比均有所提高(P<0.05);其中10%MS干预组提高小鼠血清抗氧化酶活力的作用最明显,与5%MS干预组相比有显著性差异(P<0.05)。小鼠血清脂质过氧化产物(MDA)含量:AOM模型组明显高于正常对照组(P<0.05);MS干预组与AOM模型组相比均有所下降(P<0.05);其中10%MS干预组降低小鼠血清MDA的效果最明显,与5%MS干预组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:芥菜籽能明显降低AOM诱导的小鼠大肠癌发生率并减少小鼠的平均肿瘤数,且随芥菜籽浓度的增加,其预防作用增强。芥菜籽能明显增强体内抗氧化的能力,提高体内自由基清除酶的活性,其预防机制可能与其抗氧化作用有关,通过减少自由基对细胞的损伤,预防基因突变和肿瘤发生。 展开更多
关键词 芥菜籽 氧化偶氮甲烷 大肠癌 自由基
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Syndecan-1高表达载体及不脱落突变体的构建及表达鉴定
8
作者 刘俊 王继德 +5 位作者 邝杰思 张绍衡 唐源淋 王中秋 秦和平 陈烨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期388-390,394,共4页
目的:建立小鼠syndecan-1的pcDNA3.0高表达和不脱落的真核表达载体并进行表达鉴定。方法:(1)PCR扩增syndecan-1编码序列,构建载体pcDNA3.0-widetype-synde-can-1(WT-sdc1),经定点突变技术构建载体pcDNA3.0-unshedding-syndecan-1(uS-sdc... 目的:建立小鼠syndecan-1的pcDNA3.0高表达和不脱落的真核表达载体并进行表达鉴定。方法:(1)PCR扩增syndecan-1编码序列,构建载体pcDNA3.0-widetype-synde-can-1(WT-sdc1),经定点突变技术构建载体pcDNA3.0-unshedding-syndecan-1(uS-sdc1);(2)设立阴性对照组、转染组(分别为pcDNA3.0转染组、WT-sdc1转染组及uS-sdc1转染组,转染48 h),予1μmol/L的佛波酯(PMA)刺激15 min后经RT-PCR、Western blot及Dot blot鉴定刺激前后syndecan-1表达的情况。结果:(1)真核表达载体WT-sdc1测序完全正确;载体uS-sdc1目的突变点已成功突变,除了一处无义突变外,其余序列与GenBank中的序列完全一致;(2)转染48 h后,WT-sdc1和uS-sdc1转染组细胞均强表达syndecan-1mRMA和蛋白,细胞上清中仅检测出少量脱落的syndecan-1。PMA刺激后,各组mRMA表达无显著改变;WT-sdc1转染组syndecan-1蛋白表达量较uS-sdc1转染组显著减弱,上清中脱落的syndecan-1含量显著增加。结论:成功构建了WT-sdc1载体和uS-sdc1载体,为深入研究syndecan-1及其脱落在胃肠道疾病中的具体作用及基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 SYNDECAN-1 表达载体 不脱落 突变 胃肠道疾病
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重症急性胰腺炎新亚特兰大分类再评价的临床研究 被引量：7
9
作者 丁晴宇 程天明 +3 位作者 许乙凯 陈嘉莹 吕杨 蔡建群 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第9期1346-1349,共4页
目的分析新亚特兰大分类下重症急性胰腺炎患者(SAP)和中度重症急性胰腺炎患者(MSAP)的临床特点,探讨将持续性器官功能衰竭的数目作为分类标准的临床价值。方法收集207例传统SAP患者的临床资料,按照新亚特兰大分类标准将其重新分类为MSAP... 目的分析新亚特兰大分类下重症急性胰腺炎患者(SAP)和中度重症急性胰腺炎患者(MSAP)的临床特点,探讨将持续性器官功能衰竭的数目作为分类标准的临床价值。方法收集207例传统SAP患者的临床资料,按照新亚特兰大分类标准将其重新分类为MSAP和SAP两组。根据持续性(>48 h)器官衰竭的数目,将新分类下的SAP进一步分成SOF及MOF亚组。分析各组间的临床治疗过程、评分以及预后。结果 207例传统SAP患者包括131例MSAP及76例SAP,SAP组包括SOF亚组52例及MOF亚组24例。新分类下SAP组患者在重症监护病房需要率、透析、气管插管、输血、血管活性药物使用率、评分以及院内死亡率方面均高于MSAP组(P<0.01)。MOF亚组的上述指标亦高于SOF亚组(P<0.05)。结论新亚特兰大分类更准确地反映病情严重程度,同时建议在临床上将持续性器官衰竭的数目纳入分类标准,以在疾病早期及时识别危重患者。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 新亚特兰大分类 持续性器官衰竭 预后评分
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