心肌型脂肪酸结合蛋白早期诊断急性冠脉综合征 被引量：11

1

作者 张鹏 王前 +2 位作者 郑磊 曾方银 裘宇容 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期358-360,共3页

目的探讨心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在病人出现急性胸痛症状早期区分诊断急性冠脉综合征(ACS)患者与正常人的效果。方法人为纳入正常人、急性心肌梗死(AMI)确诊病人比例2∶1以及正常人、不稳定心绞痛(UAP)确诊病人比例2∶1的小样本... 目的探讨心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在病人出现急性胸痛症状早期区分诊断急性冠脉综合征(ACS)患者与正常人的效果。方法人为纳入正常人、急性心肌梗死(AMI)确诊病人比例2∶1以及正常人、不稳定心绞痛(UAP)确诊病人比例2∶1的小样本人群。采用双抗体夹心ELISA法对40例正常人、19例AMI患者以及20例UAP患者血清H-FABP浓度进行定量。分别绘制H-FABP在正常人、AMI患者组成的人群以及正常人、UAP患者组成的人群中用于诊断AMI和UAP者的特征曲线(ROC曲线)并比较曲线下面积(AUC)与0.5的大小,0.5被认为是确定一项指标是否具有任何诊断意义的AUC临界值。结果H-FABP浓度定量正常人组为(1.29±0.64)ng/ml、AMI组为(24.45±32.40)ng/ml、UAP组为(1.95±3.11)ng/ml,依此绘制出的ROC曲线其AUC分别为AUCAMI:0.978(95%CI:0.948￣1.000),AUCUAP:0.503(95%CI:0.334￣0.671)。前者与0.5相比具有显著差异而后者没有。结论H-FABP具备在急性胸痛症状出现早期区分AMI与正常人的能力,但不具备早期区分UAP与正常人的能力。H-FABP定量检测可用于AMI早期诊断。 展开更多

关键词 脂肪酸类 心肌梗死 不稳定心绞痛 生化标志物

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人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞培养及生物学特性研究 被引量：10

2

作者 黄宪章 王前 +7 位作者 郑磊 陈晓 肖萍 熊石龙 包杰 丁海明 黄妩姣 庄俊华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期462-465,共4页

目的探讨人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)的分离及生物学特性。方法分别取4例RA患者膝关节滑膜组织、1例软骨瘤患者膝关节滑膜组织和1名健康人膝关节滑膜组织,采用组织块培养法培养FLS,使用相差显微镜观察细胞形态,流式细胞... 目的探讨人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)的分离及生物学特性。方法分别取4例RA患者膝关节滑膜组织、1例软骨瘤患者膝关节滑膜组织和1名健康人膝关节滑膜组织,采用组织块培养法培养FLS,使用相差显微镜观察细胞形态,流式细胞术(FCM)检测培养细胞的表面标志,酶联免疫吸附法定量检测RA第4代FLS细胞培养液上清液白细胞介素-1受体I型(IL-1RI)和白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果组织块培养法成功培养出FLS。RA患者FLS细胞4～7d细胞数量明显增加,8～12d细胞可以长满瓶底。第3代以后细胞均质性最好,3～7代细胞稳定且增殖活跃,8代以后增长缓慢并逐渐老化。软骨瘤患者和健康人滑膜组织培养7d后才有散在单个FLS细胞爬出,大约16d后FLS细胞可以长满瓶底。FCM分析RA第4代FLSCD90+细胞的百分率为99.04%,CD3+为2.73%,CD3-CD19+为0.29%,CD3-CD16+CD56+为2.81%,CD14+为5.89%,CD55+为54.17%。RA第4代FLS细胞培养上清液IL-1RI浓度为(158.63±20.32)pg/ml,IL-1β为(4.67±0.82)pg/ml。结论组织块培养法能有效分离RA患者FLS,FLS具有高水平表达CD90、IL-1RI和IL-1β的特性。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎 成纤维样滑膜细胞 流式细胞术 细胞培养液上清液 白细胞介素-1受体Ⅰ型 白细胞介素1Β

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血清N端前体脑钠肽在心血管病患者的表达及其临床意义 被引量：11

3

作者 杨春莉 裘宇容 +2 位作者 周芳 冯平峰 陈宇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期866-869,共4页

目的测定心血管疾病患者血清N端前体脑钠肽(NT-proBNP)浓度变化,并探讨其临床意义。方法采用电化学发光免疫试验(ECLIA)测定460例心血管疾病患者及50名健康体检者的血清NT-proBNP浓度,超声心动图测定左室射血分数(LVEF),分析NT-proBNP... 目的测定心血管疾病患者血清N端前体脑钠肽(NT-proBNP)浓度变化,并探讨其临床意义。方法采用电化学发光免疫试验(ECLIA)测定460例心血管疾病患者及50名健康体检者的血清NT-proBNP浓度,超声心动图测定左室射血分数(LVEF),分析NT-proBNP与美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级、LVEF、心血管疾病危险因素之间的关系。结果心血管病组患者血清LgNT-proBNP浓度为3.74,显著高于健康对照组的1.42;单因素方差分析示不同的心血管病组间患者血清NT-proBNP浓度差异有统计学意义(F=17.761,P<0.001)。心血管病患者血清NT-proBNP浓度随着NYHA心功能分级升高而显著上升,相同NYHA心功能和LVEF分级下,不同心血管病组间血清NT-proBNP浓度差异亦有统计学意义(P<0.001)。多变量相关分析表明,血清NT-proBNP浓度与患者年龄、NYHA心功能分级之间具有良好的正相关性(r=0.152,P<0.001及r=0.725,P<0.001),与LVEF分级、预后之间呈良好的负相关关系(r=-0.634,P<0.001和r=-0.581,P<0.001)。Logistic回归分析显示,NT-proBNP是心血管疾病事件强的预测因子(HR=2.763,P<0.01),并与患者的临床治疗结局密切相关。结论心血管病患者血清NT-proBNP水平随着心力衰竭程度的增加而升高,可用来评价患者的心功能状况,且与临床预后关系密切,但其对心血管疾病的分层诊断价值有待进一步研究。 展开更多

关键词 N端前体脑钠肽 心血管疾病 电化学发光免疫试验

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小鼠骨髓成熟与不成熟树突状细胞中RelB基因的表达 被引量：8

4

作者 包杰 郑磊 +3 位作者 王前 顾春瑜 裘宇容 李娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期703-705,共3页

目的:探讨体外分离培养的小鼠骨髓来源的成熟与未成熟DC中核转录因子RelB(avianreticuloendotheliosisviral(v-rel)oncogenerelatedB)基因的表达。方法:无菌从C57BL/6小鼠股骨和胫骨中取出骨髓细胞,利用rmGM-CSF和rmIL-4联合诱导骨髓前... 目的:探讨体外分离培养的小鼠骨髓来源的成熟与未成熟DC中核转录因子RelB(avianreticuloendotheliosisviral(v-rel)oncogenerelatedB)基因的表达。方法:无菌从C57BL/6小鼠股骨和胫骨中取出骨髓细胞,利用rmGM-CSF和rmIL-4联合诱导骨髓前体细胞产生未成熟的DC,未成熟的DC在培养结束前18h经LPS刺激获得成熟的DC,用流式细胞术分析它们的表型,用RT-PCR和免疫荧光染色法检测成熟与未成熟DC中,RelBmRNA和其蛋白的表达。结果:流式细胞术分析显示未成熟的DC中MHC-Ⅱ类分子和共刺激分子(CD86和CD40)呈低水平表达;而成熟的DC则呈高水平表达。RT-PCR和免疫荧光染色法检测结果均显示,RelB基因在未成熟的DC中呈低水平表达;而在成熟的DC中呈高水平表达,两者比较具有统计学意义(P<0.01)。结论:RelB基因的表达与小鼠骨髓来源的DC的成熟状态密切相关。抑制DC中RelB基因的表达,有可能诱导产生具有耐受原性的未成熟的DC。 展开更多

关键词 RelB基因 小鼠 骨髓树突状细胞 表达

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心肌型脂肪酸结合蛋白与肌钙蛋白Ⅰ联合检测对于急性心肌梗死的诊断价值评价 被引量：5

5

作者 郑磊 张鹏 +2 位作者 王前 曾方银 孙德华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期38-40,共3页

目的探讨心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)与肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)联合检测对于急性心肌梗死(AMI)诊断的价值及H-FABP在增加心肌标志物组合诊断效能方面的作用。方法以急诊就诊的急性胸痛症状患者133例为待研究人群,对每位患者入院第一管血血... 目的探讨心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)与肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)联合检测对于急性心肌梗死(AMI)诊断的价值及H-FABP在增加心肌标志物组合诊断效能方面的作用。方法以急诊就诊的急性胸痛症状患者133例为待研究人群,对每位患者入院第一管血血清H-FABP浓度及临床常用的心肌损伤标志物[cTnⅠ,肌红蛋白(Myo)]进行定量检测,随后根据WHO标准将研究对象分为AMI患者(46例)与AMI疑似患者(87例)。绘制3种标志物诊断AMI的受试者工作特征曲线(ROC曲线)并确定其最佳cutoff值,对设计出的3种诊断AMI的心肌标志物组合试验(cTnⅠ+H-FABP、cTnⅠ+Myo、cTnⅠ+Myo+H-FABP)的诊断准确度指标进行比较。结果根据ROC曲线确定的cTnⅠ、Myo、H-FABP诊断AMI的cutoff值分别为0.5、90、5.7ng/ml,据此算出的各心肌标志物组合诊断AMI的灵敏度分别为(按cTnⅠ+Myo、cTnⅠ+H-FABP、cTnⅠ+Myo+H-FABP的顺序)0.957、0.957、0.957,特异度分别为0.724、0.92、0.724,诊断符合率分别为0.805、0.932、0.805,其中cTnⅠ+H-FABP组合的特异度及诊断符合率均明显高于cTnⅠ+Myo和cTnⅠ+Myo+H-FABP组合(P<0.05)。结论新建立的心肌标志物组合cTnⅠ+H-FABP对AMI具有较高的诊断特异度和诊断符合率,在临床出现急性胸痛症状人群中诊断AMI的价值优于目前临床使用的心肌损伤标志物组合cTnⅠ+Myo。 展开更多

关键词 心肌梗死 生物学标记 诊断技术 心血管

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使用多因素易患性阈值模型评估双相情感障碍的遗传度缺失 被引量：6

6

作者 李康 许瑞环 +1 位作者 张洪德 王前 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期897-902,共6页

为了评估双向情感障碍的遗传度缺失,文章通过查询美国国家人类基因组研究所(National Human Genome Research Institute,NHGRI)的gwascatalog目录,检索出所有已发现的双相情感障碍易感变异,使用多因素易患性阈值模型计算每个易感变异对... 为了评估双向情感障碍的遗传度缺失,文章通过查询美国国家人类基因组研究所(National Human Genome Research Institute,NHGRI)的gwascatalog目录,检索出所有已发现的双相情感障碍易感变异,使用多因素易患性阈值模型计算每个易感变异对双相情感障碍遗传度的解释度。将所有易感变异遗传度解释度求和得到双相情感障碍已知易感变异对遗传度的总解释度,使用此总解释度评估双相情感障碍的遗传度缺失。结果显示,已知双相情感障碍易感变异对双相情感障碍遗传度的合计解释度为38.34%,尚有61.66%的遗传度无法被已有易感变异解释,属于遗传度缺失。双相情感障碍38.34%的遗传度解释度较早前国外同类研究大幅度提高,表明随着新的双相情感障碍易感变异被不断发现,双相情感障碍遗传度缺失得到大幅度减小。但双相情感障碍遗传度缺失依然存在且数目较大的事实也表明双相情感障碍尚存在许多未知的分子遗传学机制有待进一步阐明。 展开更多

关键词 双相情感障碍 遗传度 遗传度缺失 易患性阈值模型

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2型糖尿病患者尿液组织因子及其促凝血活性检测的意义 被引量：3

7

作者 付文金 郑磊 +6 位作者 王前 邓任堂 叶长钦 王少波 彭兰芬 熊诗龙 汤惠华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期878-881,共4页

目的探讨尿液组织因子(TF)含量及其促凝血活性(PCA)在不同尿微白蛋白水平的2型糖尿病(DM)患者中的变化及其意义。方法 86名2型DM患者按照尿白蛋白/肌酐(UACR)比共分为3组,即UACR<30mg/g的正常蛋白尿组42例,30mg/g≤UACR<300mg/g... 目的探讨尿液组织因子(TF)含量及其促凝血活性(PCA)在不同尿微白蛋白水平的2型糖尿病(DM)患者中的变化及其意义。方法 86名2型DM患者按照尿白蛋白/肌酐(UACR)比共分为3组,即UACR<30mg/g的正常蛋白尿组42例,30mg/g≤UACR<300mg/g的微量白蛋白尿组26例,UACR≥300mg/g的大量白蛋白尿组18例,21名健康体检者为对照组。ELISA法测定各组尿液TF含量和一步凝固法检测TF-PCA活性。常规检测空腹血糖、糖化血红蛋白、超敏CRP(Hs-CRP)、肾功能。结果 DM组TF含量和PCA活性随尿蛋白水平升高而升高,在不同糖尿病组别间存在差异;尿液TF活性与尿素、肌酐、胱抑素C、hs-CRP、UACR、空腹血糖呈正相关(P<0.05),与其他测定指标无相关性,而尿液TF含量仅与hs-CRP、UACR呈正相关。结论 2型DM尤其是早期糖尿病肾病患者尿液TF呈高表达,可能与糖尿病肾病的发病机制、病程进展相关。 展开更多

关键词 2型糖尿病 尿液 组织因子 凝血活性 微白蛋白

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急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子、组织因子途径抑制物、因子Ⅶ的检测及临床意义 被引量：4

8

作者 熊石龙 王前 +3 位作者 郑磊 李俊玲 文志斌 贺石林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1821-1823,共3页

目的探讨急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子途径相关凝血因子的变化及其临床意义。方法观察分析69例急性心肌梗死、71例急性脑梗死患者以及50名健康老年人组织因子、组织因子途径抑制物、因子VII等指标。血浆中组织因子(TF)和组织因子... 目的探讨急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子途径相关凝血因子的变化及其临床意义。方法观察分析69例急性心肌梗死、71例急性脑梗死患者以及50名健康老年人组织因子、组织因子途径抑制物、因子VII等指标。血浆中组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)活性测定采用发色底物法,抗原测定用ELISA法;凝血因子VII(FVII)促凝活性测定采用一期凝固法,FVIIa水平测定采用重组可溶性组织因子法。结果与对照组相比,急性心肌梗死患者血浆中TF活性、TF抗原、TFPI活性与TFPI抗原均显著增加(P均<0.05),而血浆中FⅦ:C无显著变化(P>0.05),但FⅦa显著增加(P<0.05);急性脑梗死患者血浆中TF活性、TF抗原均升高(P均<0.05),TFPI活性、TFPI抗原均降低(P均<0.05),而血浆中FⅦ:C、FⅦa显著增加(P均<0.05)。两病例组相比,急性心肌梗死组TF活性、抗原升高更为显著(P均<0.05);急性心肌梗死组TFPI活性、抗原增加,而急性脑梗死组均降低,差异具有显著性意义(P均<0.05);FⅦ:C在急性脑梗死组显著升高(P<0.05),而FⅦa两组差异并无显著性(P>0.05)。结论急性心肌梗死和急性脑梗死患者均存在组织因子途径的启动,血栓形成风险增加,测定上述指标对了解疾病发展趋势具有辅助作用。 展开更多

关键词 急性心肌硬死 急性脑梗死 组织因子 组织因子途径抑制物

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定量计算已知易感变异对精神分裂症遗传度的解释度 被引量：6

9

作者 李康 许瑞环 +1 位作者 张洪德 王前 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期449-453,共5页

目的评估已发现精神分裂症易感变异对精神分裂症遗传度的解释程度。方法查询美国国家人类基因组研究所(National Human Genome Research Institute,NHGRI)编制的全基因组关联研究(genome-wide as-sociation study,GWAS)目录,检索所有已... 目的评估已发现精神分裂症易感变异对精神分裂症遗传度的解释程度。方法查询美国国家人类基因组研究所(National Human Genome Research Institute,NHGRI)编制的全基因组关联研究(genome-wide as-sociation study,GWAS)目录,检索所有已发现的精神分裂症易感变异位点共347个,纳入其中已提供风险等位基因频率和比值比的62个位点,使用多因素易患性阈值模型计算每个易感变异对精神分裂症遗传度的解释度。结果已知的62个精神分裂症易感变异对精神分裂症遗传度的合计解释度为25.66%,尚有74.34%的遗传度无法被已知易感变异解释,属于遗传度缺失。结论已知精神分裂症易感变异对精神分裂症遗传度的解释度依然较低,表明精神分裂症尚存在许多未知的分子遗传学机制,有待进一步阐明。 展开更多

关键词 精神分裂症 全基因组关联研究 单核苷酸多态性

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DC2.4表面分子与RelB基因表达的关系 被引量：4

10

作者 包杰 郑磊 +4 位作者 曾方银 杨红玲 裘宇容 李娟 王前 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期56-58,共3页

目的探讨DC2.4表面分子表达水平与RelB基因表达间的关系。方法用RPMI1640完全培养液培养DC2.4细胞系,光学显微镜观察培养细胞的形态特征;透射电镜观察DC2.4的细胞结构;流式细胞术分析DC2.4的表面标记(MHC-II、CD86和CD40);RT-PCR检测DC... 目的探讨DC2.4表面分子表达水平与RelB基因表达间的关系。方法用RPMI1640完全培养液培养DC2.4细胞系,光学显微镜观察培养细胞的形态特征;透射电镜观察DC2.4的细胞结构;流式细胞术分析DC2.4的表面标记(MHC-II、CD86和CD40);RT-PCR检测DC2.4的RelB表达水平。结果光镜观察DC2.4细胞表面有明显的树突状突起,形态极不规则;透射电镜显示DC2.4细胞内含许多质地均匀的脂滴,可见吞噬小泡样的结构。流式细胞术显示MHC-II类分子和CD40呈低水平表达,而CD86分子却呈高水平表达;RT-PCR结果显示RelB呈低水平表达,与骨髓源性DC中的未成熟状态DC的RelB表达水平接近。结论DC2.4具有强吞噬功能,其表面CD40分子和细胞内RelB基因均呈低水平表达,提示DC2.4是一种未成熟状态的细胞系。 展开更多

关键词 DC2.4 RELB 基因表达

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IL-18单核苷酸多态性rs1946519和rs360718与宫颈癌的关系 被引量：3

11

作者 杨红玲 平宝红 +4 位作者 王前 郑磊 唐雯 亓涛 包杰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1006-1008,共3页

目的探讨IL-18基因单核苷酸多态性rs1946519和rs360718与宫颈癌关系,为研究宫颈癌患病风险奠定基础。方法常规方法对107例原发性宫颈癌患者和80名正常人群外周血进行基因组DNA抽提,并自行设计引物和探针,用等位基因特异性杂交技术对IL-1... 目的探讨IL-18基因单核苷酸多态性rs1946519和rs360718与宫颈癌关系,为研究宫颈癌患病风险奠定基础。方法常规方法对107例原发性宫颈癌患者和80名正常人群外周血进行基因组DNA抽提,并自行设计引物和探针,用等位基因特异性杂交技术对IL-18基因rs360718和rs1946519位点进行TaqMan探针荧光定量PCR分型,应用χ2检验统计分析病例组和对照组等位基因频率、等位基因型频率及其患病风险。结果宫颈癌患者组与对照组IL-18rs360718TT和GT基因型频率及其G和T等位基因频率比较无显著性差异(P>0.05);而宫颈癌患者组与对照组IL-18rs1946519AA、AC和CC基因型频率及A和C等位基因频率差异显著(P<0.05),AC和CC基因型及C等位基因的患病风险分别为2.883,2.750和1.611。宫颈癌与正常人群中IL-18rs1946519和rs360718位点有6种基因型,比较发现AC+TT基因型频率较正常对照组高,有显著性差异(P<0.05)。结论IL-18rs360718等位基因变异与宫颈癌的易感性无关;IL-18rs1946519与宫颈癌的发生有密切关系,具有AC+TT基因型的人发生宫颈癌的危险性相对较高。 展开更多

关键词 IL-18 宫颈癌 单核苷酸多态性 等位基因

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肾功能损害标志物测定在慢性肾脏病诊断中的临床价值 被引量：3

12

作者 张成禄 谢健敏 +1 位作者 王前 余一海 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1329-1331,共3页

目的研究慢性肾脏病(CKD)患者肾功能损害标志物水平的变化,评价其在CKD诊断中的意义。方法研究对象共66例,其中病例组(CKD患者)37例,对照组29例。采用谷氨酸脱氢酶法检测血清尿素氮(SBUN)浓度,肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐(SCr)和尿肌酐(... 目的研究慢性肾脏病(CKD)患者肾功能损害标志物水平的变化,评价其在CKD诊断中的意义。方法研究对象共66例,其中病例组(CKD患者)37例,对照组29例。采用谷氨酸脱氢酶法检测血清尿素氮(SBUN)浓度,肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐(SCr)和尿肌酐(UCr)含量,尿酸酶比色法测定血清尿酸(SUA)含量。免疫透射比浊法分析受试者血清胱抑素C(Cys C)和尿微量白蛋白(UmAlb)水平,考马斯亮蓝(CBB)法测定尿蛋白(U-PRO)含量。UmAlb、U-PRO水平均以mg/mmolUCr为单位表示。结果独立样本t检验结果表明,病例组与对照组比较,SBUN、SCr、SUA、Cys C、UmAlb和U-PRO差异有统计学意义(P<0.05)。诊断效果评价表明,SBUN、SCr、SUA、Cys C、UmAlb和U-PRO在ROC曲线下的面积分别为0.907、0.912、0.742、0.982、0.984和0.991。结论在评价CKD患者肾功能损害及其程度时,以U-PRO、UmAlb和Cys C为最佳,SCr、SBUN次之,SUA居后。 展开更多

关键词 胱抑素C 尿微量白蛋白 尿蛋白 慢性肾脏病

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ST段抬高性心肌梗死蛇毒纤溶酶治疗过程内皮祖细胞的变化 被引量：3

13

作者 姜朝新 王前 +1 位作者 郑磊 包杰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期734-737,共4页

目的研究ST段抬高性心肌梗死患者经蛇毒纤溶酶治疗过程中外周血中循环内皮祖细胞(EPCs)形态、数量的变化。方法选择ST段抬高性心肌梗死(STEMI)患者60例和对照组20例,分别在蛇毒纤溶酶给药前,给药3d用密度梯度离心法从外周血获取单个核细... 目的研究ST段抬高性心肌梗死患者经蛇毒纤溶酶治疗过程中外周血中循环内皮祖细胞(EPCs)形态、数量的变化。方法选择ST段抬高性心肌梗死(STEMI)患者60例和对照组20例,分别在蛇毒纤溶酶给药前,给药3d用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,用加入血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的RPMI-1640培养基培养细胞。用激光共聚焦显微镜初步鉴定DiL标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的荆豆凝集素I双染色阳性细胞为EPCs;相差显微镜分析细胞形态数量变化和集落形成单位的数量。结果ST段抬高性心肌梗死患者给予蛇毒纤溶酶治疗3d后EPCs数目较治疗前明显增加,7d有所下降,但仍高于对照组,但给药前后细胞集落形成单位的数量并无变化。结论ST段抬高性心肌梗死患者给予蛇毒纤溶酶治疗后,可引起EPCs数量的增加。 展开更多

关键词 内皮祖细胞 ST段抬高性心肌梗死 纤溶酶 集落形成单位

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荧光定量PCR检测侵袭性曲霉菌感染方法的建立 被引量：2

14

作者 张梦宇 郑磊 +2 位作者 温淑娟 杨春莉 王前 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期731-733,共3页

目的建立并评价从血标本中检测曲霉菌的实时PCR方法。方法摸索真菌DNA提取方法,用自行设计的高效率引物探针对种植在健康人血中的曲霉菌进行检测,对方法的敏感性、特异性进行评价。结果检测出种植到血中的曲霉菌,敏感性达10拷贝ITSⅠ基... 目的建立并评价从血标本中检测曲霉菌的实时PCR方法。方法摸索真菌DNA提取方法,用自行设计的高效率引物探针对种植在健康人血中的曲霉菌进行检测,对方法的敏感性、特异性进行评价。结果检测出种植到血中的曲霉菌,敏感性达10拷贝ITSⅠ基因,相当于(1～5)CFU/ml,与人类基因组、其他真菌及细菌无交叉阳性反应,特异性好。结论实时PCR检测血中真菌病原菌有较高的敏感性、特异性;可有效防止携带污染,避免假阳性结果,有一定的临床应用前景。 展开更多

关键词 荧光定量PCR 曲霉菌 DNA 敏感性 特异性

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HBV基因型(B/C)是影响HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清HBsAg水平的重要因素 被引量：2

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作者 陈金军 王战会 +3 位作者 马世武 周彬 侯金林 温淑娟 《临床肝胆病杂志》 CAS 2009年第4期247-250,共4页

目的了解HBV基因型(HBV/B和HBV/C)对血清HBsAg水平的影响。方法对492例慢乙型肝炎患者应用亚培12000进行血清HBsAg定量检测,基因分型采用PCR联合限制性片段长度多态性方法。将不同基因型HBV复制质粒转染Huh7细胞,比较HBsAg分泌效率。结... 目的了解HBV基因型(HBV/B和HBV/C)对血清HBsAg水平的影响。方法对492例慢乙型肝炎患者应用亚培12000进行血清HBsAg定量检测,基因分型采用PCR联合限制性片段长度多态性方法。将不同基因型HBV复制质粒转染Huh7细胞,比较HBsAg分泌效率。结果HBV/B患者(n=260)血清HBsAg水平高于HBV/C(n=197)患者(P<0.001)。以全部患者为研究对象的多变量回归分析发现,HBV DNA水平(B=0.098,P=0.002)、HBeAg状态(B=0.594,P<0.001)和HBV基因型(B=-0.420,P<0.001)决定血清HBsAg水平;在HBeAg(+)患者中(n=337),HBV DNA水平(B=0.136,P=0.001)、性别(B=0.441,P=0.011)和HBV基因型(B=-0.278,P=0.049)决定血清HBsAg水平;而在HBeAg(-)患者中(n=155),仅HBV DNA水平(B=0.195,P=0.018)是影响血清HBsAg水平的因素。转染试验表明HBV/C的HBsAg的分泌效率仅有HBV/B的1/3(P=0.010)。结论HBV基因型因为不同的HBsAg分泌效率影响HBeAg阳性患者HBsAg水平。 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 HBSAG 基因型 乙型肝炎病毒

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人CDK2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 被引量：2

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作者 黄宪章 王前 +6 位作者 郑磊 陈晓 熊石龙 包杰 丁海明 黄妩姣 庄俊华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1246-1248,共3页

目的:构建人细胞周期素依赖蛋白激酶2(CDK2)基因RNA干扰慢病毒载体。方法:利用Invitro-gen公司在线软件设计人CDK2(NM001798)shRNA序列,退火形成dsoligo后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,测序,再与慢病毒载体重组,测序鉴定,在脂质体的... 目的:构建人细胞周期素依赖蛋白激酶2(CDK2)基因RNA干扰慢病毒载体。方法:利用Invitro-gen公司在线软件设计人CDK2(NM001798)shRNA序列,退火形成dsoligo后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,测序,再与慢病毒载体重组,测序鉴定,在脂质体的介导下将慢病毒的包装混合物和CDK2基因重组慢病毒载体转染293FT细胞,包装成病毒后,收集细胞培养上清液,测定病毒滴度。结果:测序证实pENTRTM/U6-CDK2-shRNA为阳性克隆,与慢病毒载体重组后测序结果显示也为阳性克隆,CDK2基因重组慢病毒载体传染293FT细胞后48h,细胞培养上清液,病毒的滴度为6×108TU/L。结论:成功构建人CDK2基因RNAi慢病毒载体,为研究CDK2在自身免疫病中的应用提供了稳定的转染细胞载体。 展开更多

关键词 基因 CDK2 RNA干扰 慢病毒载体

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慢病毒携带shRNA对内皮细胞组织因子表达的抑制作用 被引量：1

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作者 熊石龙 王前 +5 位作者 郑磊 包杰 黄宪章 刘竞争 曾方银 裘宇容 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期682-687,共6页

目的:构建RNA干扰慢病毒载体,研究慢病毒携带的短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)对内皮细胞中组织因子(tissue factor,TF)表达的抑制作用。方法:将靶向人TF基因的2条shRNA表达序列克隆到慢病毒载体pENTRTM/U6的黏性末端,测序鉴定... 目的:构建RNA干扰慢病毒载体,研究慢病毒携带的短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)对内皮细胞中组织因子(tissue factor,TF)表达的抑制作用。方法:将靶向人TF基因的2条shRNA表达序列克隆到慢病毒载体pENTRTM/U6的黏性末端,测序鉴定后,与目标载体pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST vector进行位点特异性重组,再测序;经脂质体导入293FT细胞,包装成慢病毒,收集病毒上清并测定病毒滴度。RT-PCR和ELISA检测干扰后内皮细胞TF的表达。结果:将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功;在293FT细胞中进行慢病毒包装,收集上清并检测病毒滴度为5×105/TU。RT-PCR和ELISA检测结果证实构建的携带shRNA的慢病毒可显著抑制内皮细胞TF的表达。结论:成功构建了携带人TF基因的RNAi慢病毒载体,慢病毒携带的短发夹干扰RNA能干扰内皮细胞中TF的表达,可为血栓栓塞性疾病的防治提供一种有效的方法。 展开更多

关键词 组织因子 RNAI 慢病毒载体

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心肌型脂肪酸结合蛋白及其在急性心肌梗死早期诊断中的应用 被引量：5

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作者 张鹏 王前 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2006年第1期77-79,共3页

心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)是一种较特异存在于心胍细胞胞质内的小分子蛋白,研究发现 H-FABP 可作为心肌损伤标志物用于急性心肌梗死的早期诊断。本文就 H-FABP 的结构功能、检测方法及其在急性心肌梗死早期诊断方面的应用做一简要... 心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)是一种较特异存在于心胍细胞胞质内的小分子蛋白,研究发现 H-FABP 可作为心肌损伤标志物用于急性心肌梗死的早期诊断。本文就 H-FABP 的结构功能、检测方法及其在急性心肌梗死早期诊断方面的应用做一简要综述。 展开更多

关键词 心肌梗塞 心肌型脂肪酸结合蛋白

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人组织因子基因RNA干扰载体的构建与鉴定 被引量：1

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作者 唐雯 熊石龙 +5 位作者 杨红玲 包杰 杜江 花少栋 孙学刚 封志纯 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1065-1067,1070,共4页

目的构建人组织因子基因RNA干扰载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础。方法利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM_001993)干扰片段,合成shRNA序列,再制备双链寡核苷酸(dsoligo),退火后形成的dsoligo双链克隆到pENTRTM/U... 目的构建人组织因子基因RNA干扰载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础。方法利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM_001993)干扰片段,合成shRNA序列,再制备双链寡核苷酸(dsoligo),退火后形成的dsoligo双链克隆到pENTRTM/U6载体的粘性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒DNA小提、测序。将构建的载体转染到脐静脉内皮细胞,应用RT-PCR和免疫荧光验证载体对目的基因的干扰情况。结果测序证实阳性克隆为pENTRTM/U6-TF-shRNA,转染到脐静脉内皮细胞后组织因子的表达受到明显抑制。结论成功构建出凝血途径的人组织因子基因RNA干扰载体,为研究组织因子基因RNA干扰载体在凝血疾病中的应用提供了稳定的转染细胞载体。 展开更多

关键词 组织因子基因 RNA干扰载体 内皮细胞

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RNAi RelB DC对CD4^+CD25^+双阳性T细胞诱导效应的实验研究

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作者 郑磊 颜晓慧 +2 位作者 王前 包杰 裘宇容 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期104-106,共3页

目的:探讨核转录因子NF-κB/RelB基因沉默的树突状细胞(RNAiRelB dendritic cell,RNAiRelBDC)诱导异基因CD4+CD25+双阳性T细胞生成的生物效应。方法:实验分为Control-DC组、LPS-DC组、RNAiRelBDC组和LPS-RNAiRelBDC组,各组DC均与同种异... 目的:探讨核转录因子NF-κB/RelB基因沉默的树突状细胞(RNAiRelB dendritic cell,RNAiRelBDC)诱导异基因CD4+CD25+双阳性T细胞生成的生物效应。方法:实验分为Control-DC组、LPS-DC组、RNAiRelBDC组和LPS-RNAiRelBDC组,各组DC均与同种异基因T淋巴细胞混合反应后,采用流式细胞术(FCM)分析各组CD4+CD25+双阳性T细胞生成比例。结果:Control-DC组DC较LPS-DC组DC诱导CD4+CD25+双阳性T细胞的增高幅度更显著,两者差异具有统计学意义(P<0.01)。RNAiRelBDC组和LPS-RNAiRelBDC组DC诱导CD4+CD25+双阳性T细胞生成比例与LPS-DC组相比均存在显著差异(P<0.01),RNAiRelBDC组DC诱导CD4+CD25+双阳性T细胞生成能力较Control-DC组强,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:RelB基因被沉默后DC具有较强的诱导CD4+CD25+双阳性T细胞生成的能力,表现出未成熟DC的特点,这种RNAiRelBDC有望成为一种新型的致耐受DC用于免疫耐受的诱导研究。 展开更多

关键词 RELB 基因沉默 树突状细胞 生物学效应

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