医院动物实验伦理学审查的意义与规范 被引量：8

1

作者 朱玉峰 王元占 +4 位作者 杨培梁 弓莉 刘谋荣 吴湘慧 曾俊岭 《中国医学伦理学》 2013年第3期284-286,共3页

阐述了实验动物对医院医、教、研的作用,即借助实验动物完成的新药新技术对于医院的发展起到了很大的促进作用;实验动物平台是医院教学工作不可缺少的重要的组成部分;实验动物是医学研究进步与发展的重要支撑条件,是提升医院科研水平与... 阐述了实验动物对医院医、教、研的作用,即借助实验动物完成的新药新技术对于医院的发展起到了很大的促进作用;实验动物平台是医院教学工作不可缺少的重要的组成部分;实验动物是医学研究进步与发展的重要支撑条件,是提升医院科研水平与竞争实力、实现可持续发展的重要平台。讨论了保护、关爱动物对建立和谐医院、提高医生医德、促进科技交流的意义,并简要介绍了某医院规范实验动物伦理审查的一些经验与体会。 展开更多

关键词 实验动物 伦理规范 伦理审查 动物保护 伦理教育

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浅谈实验动物安乐死 被引量：17

2

作者 朱玉峰 王元占 +4 位作者 杨培梁 弓莉 吴湘慧 曾俊岭 刘谋荣 《中国医学伦理学》 2011年第2期260-261,264,共3页

在动物实验过程中或结束后,通常会为免除或减轻动物痛苦、节约动物饲养成本、获取精确的实验数据等原因,对实验动物施行安乐死。实施实验动物安乐死,应当由经过伦理道德、技术和心理培训的人员选择适当的仁慈终点,根据动物的品种、年龄... 在动物实验过程中或结束后,通常会为免除或减轻动物痛苦、节约动物饲养成本、获取精确的实验数据等原因,对实验动物施行安乐死。实施实验动物安乐死,应当由经过伦理道德、技术和心理培训的人员选择适当的仁慈终点,根据动物的品种、年龄、数量、身体状况及实验目的选择最合适的安乐死方法,使动物在无痛苦的状态下迅速失去意识,直至死亡。 展开更多

关键词 实验动物 动物伦理 动物福利 动物安乐死 医学伦理

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我国实验动物伦理委员会建设的现状及问题分析 被引量：28

3

作者 朱玉峰 王元占 +4 位作者 杨培梁 弓莉 刘谋荣 吴湘慧 曾俊岭 《医学与哲学（A）》 北大核心 2012年第8期19-21,共3页

我国动物实验的伦理审查工作在不断地进步,但大多数实验动物伦理委员会还存在管理不规范、人员培训缺乏、资金投入不足、监管不力等方面的问题。对我国实验动物伦理委员会的建设现状和存在的问题进行了分析,并对如何加强我国实验动物伦... 我国动物实验的伦理审查工作在不断地进步,但大多数实验动物伦理委员会还存在管理不规范、人员培训缺乏、资金投入不足、监管不力等方面的问题。对我国实验动物伦理委员会的建设现状和存在的问题进行了分析,并对如何加强我国实验动物伦理委员会建设提出了一些建议。 展开更多

关键词 实验动物 伦理审查 伦理委员会

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动物实验伦理审查后监管的规范与建议 被引量：6

4

作者 朱玉峰 王元占 +4 位作者 弓莉 杨培梁 吴湘慧 曾俊岭 刘谋荣 《中国医学伦理学》 2016年第2期298-300,共3页

阐述了动物实验伦理审查后监管的必要性,由谁监管,如何监管,监管什么等问题。并提出以下建议:制订详细的规章制度与SOP,加强动物实验伦理审查后监管小组成员与动物实验人员的培训,用动物实验伦理学审查软件对动物实验的伦理学审查进行... 阐述了动物实验伦理审查后监管的必要性,由谁监管,如何监管,监管什么等问题。并提出以下建议:制订详细的规章制度与SOP,加强动物实验伦理审查后监管小组成员与动物实验人员的培训,用动物实验伦理学审查软件对动物实验的伦理学审查进行全程监控。 展开更多

关键词 动物实验 伦理审查 监管 审查软件

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BCR/ABL转基因动物模型研究进展及应用 被引量：1

5

作者 朱玉峰 王元占 孟凡义 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期1532-1535,共4页

转基因动物模型为研究慢性粒系白血病的发病机理与治疗提供了一个良好平台。利用不同的启动子或四环素调控系统已建立了一系列的BCR/ABL转基因动物模型,其中相当一部分动物模型能很好的模拟人的CML特征,并在CML的发病机理与治疗的研究... 转基因动物模型为研究慢性粒系白血病的发病机理与治疗提供了一个良好平台。利用不同的启动子或四环素调控系统已建立了一系列的BCR/ABL转基因动物模型,其中相当一部分动物模型能很好的模拟人的CML特征,并在CML的发病机理与治疗的研究中广泛应用。本文就目前BCR/ABL转基因动物模型的研究进展、优缺点及应用作一综述。 展开更多

关键词 BCR/ABL 慢性髓系白血病 转基因动物

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弓形虫感染实验动物模型的特点及建模方案的选择 被引量：4

6

作者 杨培梁 王元占 陈晓光 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第6期82-86,共5页

弓形虫感染对人类生活和畜牧业发展构成严重威胁。弓形虫感染实验动物模型是进行弓形虫学相关研究的基础条件之一。在实际研究工作中,根据不同的实验目的、选取不同的实验动物和以不同的实验方法所建立的实验动物模型,呈现出复杂和多变... 弓形虫感染对人类生活和畜牧业发展构成严重威胁。弓形虫感染实验动物模型是进行弓形虫学相关研究的基础条件之一。在实际研究工作中,根据不同的实验目的、选取不同的实验动物和以不同的实验方法所建立的实验动物模型,呈现出复杂和多变的特点。这一方面可以满足不同实验的需要,但同时也在实验结果的评价上导致一定程度的不足。根据弓形虫感染实验动物模型的不同特点,针对特定的实验目的,选择适合方法建立适合的实验动物模型,是进行相关弓形虫学研究的有效基础和前提。 展开更多

关键词 弓形虫 模型 动物

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快速高效植物瞬时表达的实验室烟草无土栽培体系的构建 被引量：3

7

作者 莫倩珍 麦荣嘉 +6 位作者 杨志晓 陈敏芳 杨铁钊 赖华芳 杨培梁 陈强 周晓红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期772-777,共6页

目的构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系。方法优化烟草的无土栽培条件,基于Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达绿色荧光蛋... 目的构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系。方法优化烟草的无土栽培条件,基于Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达绿色荧光蛋白(GFP)的影响,以Western blot和ELISA分析GFP表达情况。结果烟草无土培育的最佳条件为:光照强度9000LX/层,光照时间16 h/d,日/夜温度28/21℃,相对湿度80%。侵染工程菌的最佳D600为0.8;叶片采收最佳时间为侵染后4 d;本明烟和豫烟5号最佳侵染时机分别为第6周和第5周;工程菌pBYGFPDsRed.R/LBA4404侵染的本明烟和豫烟5号均能高效表达GFP;豫烟5号的平均生物量高于本明烟。结论基于人工气候箱成功构建了实验室烟草无土栽培体系,并可实现GFP在本明烟和豫烟5号的快速高效表达。 展开更多

关键词 烟草 瞬时表达 无土栽培 绿色荧光蛋白

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慢病毒介导shRNA稳定干扰P210^(bcr/abl)基因表达的体内外研究 被引量：1

8

作者 朱玉峰 王元占 孟凡义 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1090-1094,共5页

P210bcr/abl融合基因在慢性髓系白血病(CML)发生、发展中起重要作用。针对P210bcr/abl融合基因的小分子抑制剂(如伊马替尼)治疗CML非常有效,但容易产生耐药性。P210bcr/abl基因的融合区为RNA干扰其表达提供了一个特异性靶点。本研究通... P210bcr/abl融合基因在慢性髓系白血病(CML)发生、发展中起重要作用。针对P210bcr/abl融合基因的小分子抑制剂(如伊马替尼)治疗CML非常有效,但容易产生耐药性。P210bcr/abl基因的融合区为RNA干扰其表达提供了一个特异性靶点。本研究通过病毒载体建立能同时表达P210bcr/ablshRNA和P210bcr/abl基因的BaF3细胞系,并探讨慢病毒介导的shRNA对P210bcr/abl基因表达的作用。用荧光显微镜检测慢病毒对BaF3细胞的感染率,用台盼蓝拒染法检测细胞的增殖能力;用RT-PCR和Western blot分别检测P210bcr/ablmRNA和蛋白的表达。结果发现,P210bcr/ablshRNA能使BaF3-P210bcr/abl细胞中的P210bcr/ablmRNA及蛋白表达明显下降,并且能增强BaF3-P210bcr/abl细胞对伊马替尼的敏感性,与不表达P210bcr/ablshRNA的BaF3-P210bcr/abl细胞相比,伊马替尼对该细胞系的IC50下降50%以上。将该细胞由尾静脉移植到受致死剂量照射的裸小鼠体内,移植该细胞的小鼠生存期较移植BaF3-P210bcr/abl细胞的小鼠生存期明显延长。结论:稳定表达针对P210bcr/abl基因融合区的shRNA可能增强CML常规治疗的效果。 展开更多

关键词 慢性髓系白血病 P210bcr/abl融合基因 RNA干扰 慢病毒载体

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TLR2激动剂Pam3CK逆转IL-10转染小鼠髓样树突状细胞免疫功能的研究 被引量：2

9

作者 张志丽 吴砂 +2 位作者 卢晓 弓莉 富宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期300-302,307,共4页

目的:观察TLR2激活剂Pam3CK对IL-10转染小鼠髓样树突状细胞免疫功能影响。方法:转染IL-10至小鼠髓样树突状细胞(mDC),TLR2配体Pam3CK刺激48小时,利用流式细胞仪检测DC表面标志MHCⅡ、CD80、CD86及FasL等分子的表达;ELISA检测细胞产生IL-... 目的:观察TLR2激活剂Pam3CK对IL-10转染小鼠髓样树突状细胞免疫功能影响。方法:转染IL-10至小鼠髓样树突状细胞(mDC),TLR2配体Pam3CK刺激48小时,利用流式细胞仪检测DC表面标志MHCⅡ、CD80、CD86及FasL等分子的表达;ELISA检测细胞产生IL-6、TNF-α。结果:IL-10抑制mDC表达CD80、CD86、MHCⅡ类分子,降低其分泌IL-6、TNF-α,促进其表达FasL,而TLR2激动剂刺激增加了IL-10转染DC表达MHC-Ⅱ类分子及CD80、CD86,促进其产生IL-6及TNF-α,抑制了FasL表达。结论:TLR2激动剂可逆转IL-10诱发的DC免疫应答低下。 展开更多

关键词 IL-10 树突状细胞 TLR2激动剂

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具有免疫反应性的弓形虫多表位抗原在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定 被引量：4

10

作者 杨培梁 陈晓光 +4 位作者 王元占 李华 周晓红 吴焜 言慧 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期528-530,544,共4页

目的获得弓形虫多表位基因在原核系统中可溶性表达产物,为弓形虫病重组抗原试剂盒的制备及疫苗的研究奠定基础。方法以PCR法扩增弓形虫多表位基因,使其两端带有与载体pET32a相匹配的酶切位点,插入载体pET32a,酶切并测序鉴定后,转入大肠... 目的获得弓形虫多表位基因在原核系统中可溶性表达产物,为弓形虫病重组抗原试剂盒的制备及疫苗的研究奠定基础。方法以PCR法扩增弓形虫多表位基因,使其两端带有与载体pET32a相匹配的酶切位点,插入载体pET32a,酶切并测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行诱导,SDS-PAGE分析和鉴定该基因的表达水平、表达产物的可溶性及其相对分子质量,Western-blot分析表达产物的免疫反应性。结果该基因在原核表达系统中经诱导,得到了Mr31000的可溶性融合表达产物。经Ni-NTA纯化,纯度可达90%以上。免疫印迹实验表明该产物能够被弓形虫B36感染的小鼠血清和弓形虫RH感染的兔血清特异识别。结论弓形虫多表位基因在原核中的可溶性表达产物在弓形虫病诊断及疫苗研究中有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 弓形虫 多表位 大肠杆菌 蛋白表达 免疫反应性

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TLR7激动剂Imiquimod减弱转染IL-10的小鼠髓样树突状细胞的负向调节功能 被引量：1

11

作者 弓莉 王元占 +3 位作者 卢涛 白晓燕 朱玉峰 吴湘慧 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1360-1363,共4页

目的 :观察Toll样受体7(Toll like receptor 7,TLR7)激动剂Imiquimod对白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)转染小鼠骨髓来源的树突状细胞(bone-marrow derived dendritic cell,mDC)免疫功能影响。方法:转染IL-10至小鼠m DC,TLR7激动剂I... 目的 :观察Toll样受体7(Toll like receptor 7,TLR7)激动剂Imiquimod对白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)转染小鼠骨髓来源的树突状细胞(bone-marrow derived dendritic cell,mDC)免疫功能影响。方法:转染IL-10至小鼠m DC,TLR7激动剂Imiquimod刺激48 h,利用流式细胞仪检测DC表面标志MHCⅡ、CD80、CD86及Fas L等分子的表达;ELISA检测细胞产生IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)。结果 :IL-10抑制m DC表达MHCⅡ、CD80、CD86分子,降低其分泌IL-6、TNF-α,促进其表达Fas L,而TLR7激动剂刺激增加了IL-10转染m DC表达MHCⅡ、CD80、CD86分子,促进其产生IL-6、TNF-α,抑制Fas L表达。结论:TLR7激动剂可逆转IL-10诱发的DC免疫应答低下。 展开更多

关键词 IL-10 树突状细胞 TLR7激动剂

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TLR7刺激对系统性红斑狼疮易感型小鼠树突状细胞免疫功能的影响

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作者 弓莉 王元占 +3 位作者 张志丽 阳大庆 徐梅 吴砂 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第6期478-482,共5页

目的研究TLR7通路对于系统性红斑狼疮易感Fas-/-MRLlpr/lpr小鼠树突状细胞免疫功能的影响。方法 从5周龄MRLlpr/lpr小鼠骨髓提取DC体外培养,以TLR7激活剂咪喹莫特处理48h,流式细胞仪检测细胞表面分子CD80、MHCⅡ表达。ELISA法检测细胞... 目的研究TLR7通路对于系统性红斑狼疮易感Fas-/-MRLlpr/lpr小鼠树突状细胞免疫功能的影响。方法 从5周龄MRLlpr/lpr小鼠骨髓提取DC体外培养,以TLR7激活剂咪喹莫特处理48h,流式细胞仪检测细胞表面分子CD80、MHCⅡ表达。ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-10。结果咪喹莫特处理后,树突状细胞表面抗原提呈相关分子MHCⅡ和CD80分子均降低,分泌的IFN-γ、TNF-α和IL-10均明显增加。结论 TLR7通路调节系统性红斑狼疮易感小鼠MRLlpr/lpr小鼠DC抗原呈递能力,具有影响免疫应答作用。 展开更多

关键词 TLR7 树突状细胞 系统性红斑狼疮 MRLIpr/Ipr小鼠

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TEC启动子介导BCR/ABL基因在BaF3细胞中的表达

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作者 朱玉峰 王元占 孟凡义 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期769-772,共4页

转P210bcr/abl基因小鼠是研究慢性髓系白血病的理想模型,但广泛表达的启动子容易引起转基因小鼠的胚胎致死,所以应用在造血细胞中特异表达的启动子是成功建立转P210bcr/abl基因小鼠模型的关键。本研究探讨TEC启动子介导BCR/ABL基因在BF... 转P210bcr/abl基因小鼠是研究慢性髓系白血病的理想模型,但广泛表达的启动子容易引起转基因小鼠的胚胎致死,所以应用在造血细胞中特异表达的启动子是成功建立转P210bcr/abl基因小鼠模型的关键。本研究探讨TEC启动子介导BCR/ABL基因在BF3细胞中的表达。从小鼠的基因组中克隆TEC启动子的-364至+22区域,并替换掉IRES2-eGFP载体的CMVie启动子,同时在该载体的EcorⅠ酶切位点插入7.2 kb的P210bcr/abl基因,再将构建好的载体分别转染BaF3细胞和293细胞,观察eGFP基因与P210bcr/abl基因在2种细胞中的表达情况。结果通过荧光显微镜和流式细胞仪检测发现,eGFP基因在BaF3细胞成功表达,表达率在转染后6、24、72 h分别为7.10%、23.35%和64.61%,而在293细胞中未见eG FP基因表达。RT-PCR在BaF3细胞中扩增出BCR/ABL mRNA中372 bp的片段,而在293细胞中未扩增出任何片段。结论:TEC启动子的-364至+22区域能介导相关基因在造血细胞中高效特异性表达,适合于构建转P210bcr/abl基因小鼠模型。 展开更多

关键词 TEC启动子 BCR/ABL基因 BaF3细胞 转基因小鼠模型

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