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实时荧光定量PCR检测外周血TREC的方法研究
被引量：
2
1
作者
阴继霞
武大林
+1 位作者
许文娟
孙竞
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第7期1009-1013,共5页
目的建立及优化检测移植后患者外周血TREC拷贝数的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法及实验影响条件,为临床研究造血干细胞移植的免疫功能重建机制提供方法学基础。方法在ABI7000PCR仪上实时扩增检测构建的TREC质粒标准品,摸索最佳扩增条...
目的建立及优化检测移植后患者外周血TREC拷贝数的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法及实验影响条件,为临床研究造血干细胞移植的免疫功能重建机制提供方法学基础。方法在ABI7000PCR仪上实时扩增检测构建的TREC质粒标准品,摸索最佳扩增条件及建立标准曲线,然后用优化的FQ-PCR方法检测临床样本。结果T3、T4引物和R3、R4引物的扩增效率分别优于T1、T2引物和R1、R2引物。TaqMan-MGB探针比普通的TaqMan探针扩增效率高。金牌热启动Taq酶,比较普通Taq酶而言,提高了PCR的特异性和敏感性。FQ-PCR的反应条件设定:95℃10min后95℃5s,53℃30s,40循环结束。结论通过摸索与优化实验条件,建立了实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中TREC的方法。
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关键词
实时荧光定量PCR
T细胞受体删除DNA环(TREC)
造血干细胞移植
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职称材料
PCR-SSP法HLA-A、B基因分型与血清学分型的比较
被引量：
1
2
作者
武大林
凌汉新
唐浩
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第11期1267-1270,共4页
目的比较聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)进行HLA-Ⅰ类A、B抗原位点分型的准确性,并探讨血清学分型错误发生的原因。方法用PCR-SSP以及单克隆抗体血清学分型技术对HLA-A、B分型并比较。结果34例样本PCR-SSP基因分型无假阳性和假...
目的比较聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)进行HLA-Ⅰ类A、B抗原位点分型的准确性,并探讨血清学分型错误发生的原因。方法用PCR-SSP以及单克隆抗体血清学分型技术对HLA-A、B分型并比较。结果34例样本PCR-SSP基因分型无假阳性和假阴性出现。PCR-SSP法与血清学比较,血清学检出错误或漏检率分别为HLA-A位点23.5%,B位点26.5%。血清学发生错误或易混淆的抗原有:A2和A68、A32和A33,B5、B60和61。结论PCR-SSP法进行HLA-A、B抗原等位基因分型具有分辨率高、特异性强、重复性好、实验过程简捷快速、分型结果较血清学更加准确可靠的优点。
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关键词
HLA-A
基因分型
血清学分型
聚合酶链反应-序列特异性引物法
B抗原
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职称材料
基因芯片检测广东省汉族人群HLA-DQB1基因多态性
被引量：
1
3
作者
武大林
王晖
张文
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第22期2230-2231,共2页
目的调查研究了700名广东省汉族人群HLA-DQB1等位基因频率及多态性分布。方法采用深圳益生堂生物企业有限公司研制开发的“HLA-DQB1低分辨率基因分型芯片试剂盒”,应用PCR-SSP+SSO芯片检测技术,对700名广东省的中国人群进行基因分型。...
目的调查研究了700名广东省汉族人群HLA-DQB1等位基因频率及多态性分布。方法采用深圳益生堂生物企业有限公司研制开发的“HLA-DQB1低分辨率基因分型芯片试剂盒”,应用PCR-SSP+SSO芯片检测技术,对700名广东省的中国人群进行基因分型。结果鉴定了10个HLA-DQB1等位基因。广东省人群HLA-DQB1等位基因频率分布为HLA-DQB1*05>*0301>*0303>*0601>*02>*0302>*04>*0602>*0604>*0603。结论为我国疾病相关性研究、人类学研究提供了可靠的遗传学参数。
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关键词
基因芯片
HLA-DQB1
基因多态性
中国广东汉族人群
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职称材料
题名
实时荧光定量PCR检测外周血TREC的方法研究
被引量：
2
1
作者
阴继霞
武大林
许文娟
孙竞
机构
南方医科大学南方医院医学中心实验科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第7期1009-1013,共5页
文摘
目的建立及优化检测移植后患者外周血TREC拷贝数的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法及实验影响条件,为临床研究造血干细胞移植的免疫功能重建机制提供方法学基础。方法在ABI7000PCR仪上实时扩增检测构建的TREC质粒标准品,摸索最佳扩增条件及建立标准曲线,然后用优化的FQ-PCR方法检测临床样本。结果T3、T4引物和R3、R4引物的扩增效率分别优于T1、T2引物和R1、R2引物。TaqMan-MGB探针比普通的TaqMan探针扩增效率高。金牌热启动Taq酶,比较普通Taq酶而言,提高了PCR的特异性和敏感性。FQ-PCR的反应条件设定:95℃10min后95℃5s,53℃30s,40循环结束。结论通过摸索与优化实验条件,建立了实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中TREC的方法。
关键词
实时荧光定量PCR
T细胞受体删除DNA环(TREC)
造血干细胞移植
Keywords
real-time fluorescent quantitative
T-cell receptor excision circles
hematopoietic stem cell transplantation
分类号
R450 [医药卫生—治疗学]
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职称材料
题名
PCR-SSP法HLA-A、B基因分型与血清学分型的比较
被引量：
1
2
作者
武大林
凌汉新
唐浩
机构
南方医科大学南方医院医学中心实验科
广州市第十二人民
医院
肾内
科
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第11期1267-1270,共4页
基金
第一军医大学南方医院1998新技术攻关项目(98字第011号)~~
文摘
目的比较聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)进行HLA-Ⅰ类A、B抗原位点分型的准确性,并探讨血清学分型错误发生的原因。方法用PCR-SSP以及单克隆抗体血清学分型技术对HLA-A、B分型并比较。结果34例样本PCR-SSP基因分型无假阳性和假阴性出现。PCR-SSP法与血清学比较,血清学检出错误或漏检率分别为HLA-A位点23.5%,B位点26.5%。血清学发生错误或易混淆的抗原有:A2和A68、A32和A33,B5、B60和61。结论PCR-SSP法进行HLA-A、B抗原等位基因分型具有分辨率高、特异性强、重复性好、实验过程简捷快速、分型结果较血清学更加准确可靠的优点。
关键词
HLA-A
基因分型
血清学分型
聚合酶链反应-序列特异性引物法
B抗原
Keywords
HLA antigens
polymeras chain reaction
sequence-specific primers
monoclonal antibody
allele typing
分类号
R446.9 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
基因芯片检测广东省汉族人群HLA-DQB1基因多态性
被引量：
1
3
作者
武大林
王晖
张文
机构
南方医科大学南方医院医学中心实验科
深圳益生堂生物企业有限公司
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第22期2230-2231,共2页
文摘
目的调查研究了700名广东省汉族人群HLA-DQB1等位基因频率及多态性分布。方法采用深圳益生堂生物企业有限公司研制开发的“HLA-DQB1低分辨率基因分型芯片试剂盒”,应用PCR-SSP+SSO芯片检测技术,对700名广东省的中国人群进行基因分型。结果鉴定了10个HLA-DQB1等位基因。广东省人群HLA-DQB1等位基因频率分布为HLA-DQB1*05>*0301>*0303>*0601>*02>*0302>*04>*0602>*0604>*0603。结论为我国疾病相关性研究、人类学研究提供了可靠的遗传学参数。
关键词
基因芯片
HLA-DQB1
基因多态性
中国广东汉族人群
Keywords
genechip
HLA-DQB1
gene polymorphisms
Southern China
分类号
R181.33 [医药卫生—流行病学]
R318 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光定量PCR检测外周血TREC的方法研究
阴继霞
武大林
许文娟
孙竞
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
PCR-SSP法HLA-A、B基因分型与血清学分型的比较
武大林
凌汉新
唐浩
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
基因芯片检测广东省汉族人群HLA-DQB1基因多态性
武大林
王晖
张文
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
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职称材料
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