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题名白色念珠菌烯醇化酶免疫磁珠定量检测方法的建立
被引量：9
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作者
胡毓安
史利宁
李芳秋
李伟
马春芳
年娜
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机构
南方医科大学南京临床医学院(南京军区南京总医院)临床中心实验科
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出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2014年第6期568-572,共5页
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基金
国家自然科学基金(81302536)
江苏省科技支撑计划-社会发展项目(BE2009673)
+1 种基金
南京军区医学科技创新重点课题(10Z027)
南京军区南京总医院科研基金(2013058)
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文摘
目的侵袭性念珠菌病临床致死率较高,而白色念珠菌为最常见致病菌。建立定量检测白色念珠菌烯醇化酶（enolase,Eno）的免疫磁珠方法,提高侵袭性念珠菌感染的实验室诊断水平。方法将白色念珠菌Eno单抗耦联至磁性微珠上,以辣根过氧化物酶标记羊抗Eno作为检测抗体,利用重组白色念珠菌Eno蛋白作为标准品评价该方法的精密度、特异性、线性范围、最低检测下限等性能指标。用建立的免疫磁珠方法检测不同真菌培养上清中Eno水平。结果 Eno浓度为25 ng/mL和5 ng/mL时,批内和批间精密度分别为4.54%、5.87%和5.26%、8.82%。最低检出下限为0.5 ng/mL,线性范围为0.5~50 ng/mL。白色念珠菌37℃培养24 h的上清中Eno含量为3.89 ng/mL,培养120 h的Eno水平上升至37.89 ng/mL,Eno水平与白色念珠菌菌丝含量呈正相关。该方法与近平滑念珠菌有微弱交叉反应,与热带念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新型隐球菌和酿酒酵母均无交叉反应。结论成功建立了定量检测白色念珠菌Eno的免疫磁珠法,与前期建立的定性ELISA相比,免疫磁珠法更为简便、准确、敏感,在侵袭性念珠菌感染研究中具有潜在的应用价值。
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关键词
侵袭性念珠菌病
白色念珠菌
烯醇化酶
免疫磁珠
定量检测
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Keywords
Invasive candidiasis
Candida albicans
Enolase
Immunomagetic bead
Quantitative detection
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分类号
R379.4
[医药卫生—病原生物学]
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