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不同治法方药对大鼠脂肪肝Kupffer细胞ERK1/2蛋白活性的影响 被引量：26
1
作者 孟民杰 杨钦河 +8 位作者 王强 陈雪梅 王凤珍 王彦平 唐海兰 程少冰 凌家生 温承远 谢芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1551-1555,共5页
目的:观察疏肝、健脾、活血、祛湿、综合不同治法方药对大鼠脂肪肝Kupffer细胞ERK1/2蛋白活性的影响。方法:利用高脂饮食、白酒灌胃复制大鼠脂肪肝实验动物模型,同时给予疏肝、健脾、活血、祛湿、综合不同方药进行干预。12周后以Ⅳ型胶... 目的:观察疏肝、健脾、活血、祛湿、综合不同治法方药对大鼠脂肪肝Kupffer细胞ERK1/2蛋白活性的影响。方法:利用高脂饮食、白酒灌胃复制大鼠脂肪肝实验动物模型,同时给予疏肝、健脾、活血、祛湿、综合不同方药进行干预。12周后以Ⅳ型胶原酶、蛋白酶E联合灌注消化、梯度离心、选择性贴壁分离不同组别大鼠Kupffer细胞,采用Western blotting方法检测不同组别大鼠Kupffer细胞ERK1/2蛋白的表达及其磷酸化水平的变化。结果:模型组大鼠Kupffer细胞ERK1/2蛋白的表达和磷酸化ERK1/2蛋白的表达较正常组明显增加(P<0.01),各干预组ERK1/2表达和磷酸化ERK1/2蛋白的表达较模型组显著降低(P<0.01),其中疏肝组(柴胡疏肝散:柴胡、川芎、枳壳、陈皮、白芍、香附、炙甘草)、健脾组(参苓白术散:人参、白术、茯苓、薏苡仁、砂仁、山药、桔梗、白扁豆、莲子、炙甘草)ERK1/2蛋白表达和磷酸化ERK1/2蛋白的表达下降最为明显。结论:在大鼠脂肪肝的形成过程中Kupffer细胞ERK1/2蛋白高表达和磷酸化ERK1/2蛋白高表达可能起到了重要作用,Kupffer细胞ERK1/2蛋白的高表达和磷酸化ERK1/2蛋白高表达可能参与并促进了脂肪性肝损伤,抑制ERK1/2蛋白的表达及磷酸化可能是健脾疏肝等治法方药抗实验性大鼠脂肪肝的作用机制之一。 展开更多
关键词 脂肪肝 大鼠 有些分裂素激活蛋白激酶类 中草药
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丁酸钠对人结肠癌细胞株HCT-116细胞凋亡及基质相互作用分子和Orai1蛋白活性的影响 被引量：5
2
作者 孙素霞 李文军 +4 位作者 陈思强 张贺 余少珍 张敏红 邹飞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期189-192,共4页
目的研究丁酸钠诱导结肠癌细胞株HCT-116细胞凋亡机制。方法 hoechst 33342和AnnexinV+PI检测丁酸钠诱导结肠癌细胞HCT-116的凋亡作用;免疫荧光法检测丁酸钠对基质相互作用分子(STIMl)和钙离子通道Orail蛋白在细胞内定位的影响;免疫印... 目的研究丁酸钠诱导结肠癌细胞株HCT-116细胞凋亡机制。方法 hoechst 33342和AnnexinV+PI检测丁酸钠诱导结肠癌细胞HCT-116的凋亡作用;免疫荧光法检测丁酸钠对基质相互作用分子(STIMl)和钙离子通道Orail蛋白在细胞内定位的影响;免疫印迹法检测STIMl和Orail蛋白表达量的变化。结果丁酸钠可诱导结肠癌细胞HCT-116凋亡、STIMl移位并与Orail具有共定位现象。结论丁酸钠可通过调节STIM1和Orail在结肠癌细胞中的定位而促发细胞凋亡。 展开更多
关键词 丁酸钠 人结肠癌细胞 细胞凋亡 STIM1 Orai1
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全血中性粒细胞分离方法对fMLP诱导极性化的影响 被引量：4
3
作者 罗琼 蔡春青 +4 位作者 谢翠华 楚心唯 武清宜 孟晓静 邹飞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1514-1517,共4页
目的比较Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法两种常用的中性粒细胞分离方法 ,为中性粒细胞极性化研究提供有效手段。方法取健康成年人外周血,采用Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法分离中性粒细胞,分别检测分离后的... 目的比较Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法两种常用的中性粒细胞分离方法 ,为中性粒细胞极性化研究提供有效手段。方法取健康成年人外周血,采用Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法分离中性粒细胞,分别检测分离后的中性粒细胞的极性、纯度、存活率,比较二者对极性信号分子F-actin的聚合和胞内Ca2+的影响。结果二者在极性率、纯度、存活率方面并不存在显著性差异,但Dextran沉降法在fMLP诱导细胞极性3min内对F-actin的聚合产生抑制作用,同时可使胞内Ca2+升高的Ca2+峰降低约25%。结论对PMNs极性功能研究时,两种分离方法都可以选择。Percoll非连续密度梯度离心法更有优势,但在需要纯化大量PMNs时,Dextran沉降法也是一种好的选择。 展开更多
关键词 中性粒细胞 极性 Percoll非连续密度梯度离心法 Dextran沉降法
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芒果甙抗肿瘤作用研究进展 被引量：5
4
作者 林周孟 何春拉 孟晓静 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期663-664,共2页
芒果甙（mangiferin），又名芒果素、知母宁．是一种四羟基吡啶的碳糖甙．属双苯吡酮类化合物。芒果甙可从漆树科芒果树和扁桃树的叶、果实、树皮及龙胆科植物东北龙胆、川西獐芽菜、水龙骨科植物光石韦等中提取得到。现代药理和临床研... 芒果甙（mangiferin），又名芒果素、知母宁．是一种四羟基吡啶的碳糖甙．属双苯吡酮类化合物。芒果甙可从漆树科芒果树和扁桃树的叶、果实、树皮及龙胆科植物东北龙胆、川西獐芽菜、水龙骨科植物光石韦等中提取得到。现代药理和临床研究证明．芒果甙有多方面的生理活性和药理作用， 展开更多
关键词 芒果甙 抗肿瘤作用 酮类化合物 东北龙胆 水龙骨科 药理作用 生理活性 临床研究
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RNA干扰热休克蛋白90α表达对NIH-3T3细胞应激反应的影响 被引量：1
5
作者 陈雪梅 邹飞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1118-1120,共3页
目的用RNA干扰方法建立稳定的热休克蛋白90α(HSP90α)抑制表达细胞株,研究热休克蛋白90α抑制表达对细胞应激反应的影响。方法将人Hsp90αRNA干扰基因片段连接入pSilencer2.1-U6neo载体,重组质粒pSilencerHSP90经亚克隆、纯化、测序鉴... 目的用RNA干扰方法建立稳定的热休克蛋白90α(HSP90α)抑制表达细胞株,研究热休克蛋白90α抑制表达对细胞应激反应的影响。方法将人Hsp90αRNA干扰基因片段连接入pSilencer2.1-U6neo载体,重组质粒pSilencerHSP90经亚克隆、纯化、测序鉴定后,用电穿孔法转染到小鼠成纤维细胞系NIH-3T3细胞内。经G418筛选、克隆分离培养,用免疫荧光、免疫印迹鉴定阳性克隆。用高温作用(44℃,40min)模拟氧化应激环境,以NIH-3T3细胞为对照,流式细胞仪测定DNA受损细胞数,分析在细胞应激状态下对细胞膜和DNA的损害及HSP90低表达对细胞应激反应的影响。结果转染pSilencerHSP90的NIH-3T3细胞Hsp90免疫荧光染色减弱,主要分布于胞浆;与对照相比,44℃,40min时DNA的损害加重(9.2%vs18.5%,P<0.01)。结论建立稳定低表达HSP90αNIH-3T3细胞株;热休克蛋白90表达与其应激保护作用密切相关。 展开更多
关键词 HSP90 RNA干扰 转染 氧化应激
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中性粒细胞趋化的细胞内信号传导机制的研究进展
6
作者 袁春华 王斌 +1 位作者 蔡春青 邹飞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1054-1056,F0003,共4页
关键词 中性粒细胞 细胞趋化 细胞内 信号传导机制 浓度梯度 信号传导通路 信号分子 信号放大
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热射病合并细菌内毒素感染大鼠动物模型的复制
7
作者 李亚洁 林晓静 +5 位作者 罗炳德 王斌 谭琳玲 钟小红 张立颖 赵志荣 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期494-498,共5页
目的复制热射病合并细菌内毒素感染的动物模型,为进一步探讨重度热射病的发病机制奠定基础。方法雄性SPF级Wistar大鼠随机分为:常温生理盐水组(C组)、高温生理盐水组(H组)、常温细菌内毒素组(L组)、高温细菌内毒素组(HL组)。持续监测动... 目的复制热射病合并细菌内毒素感染的动物模型,为进一步探讨重度热射病的发病机制奠定基础。方法雄性SPF级Wistar大鼠随机分为:常温生理盐水组(C组)、高温生理盐水组(H组)、常温细菌内毒素组(L组)、高温细菌内毒素组(HL组)。持续监测动物肛温(Tr)、心率(HR)、平均动脉压(MAP)、呼吸频率(RR)的动态变化,观察致伤0、40、80、120min的外周血白细胞计数、肺湿质量/干质量比值(W/D)以及肺病理改变。结果(1)HL组Tr上升到(43.04±0.11)℃,HR加快到(660±42)次/min,RR加快到(150±11)次/min,MAP下降到(49.0±3.5)mmHg;其中Tr、HR、RR、MAP与L组之间存在显著性差异,HR、MAP与H组之间存在显著性差异。(2)L组、HL组WBC显著下降而H组WBC显著上升,L组、HL组WBC计数与H组之间存在显著性差异。(3)HL组动物W/D显著性升高,肺急性微血管损伤改变显著。结论本研究模拟了临床热射病合并内毒素感染发展为重度热射病的过程,是用于重度热射病多器官损伤肺启动机制研究较好的模型。 展开更多
关键词 热射病 重度 内毒素血症 动物模型
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预热适应成纤维细胞NIH-3T3应激保护相关蛋白的初步筛选
8
作者 陈雪梅 邹飞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1493-1496,共4页
目的:初步分析应激与适应对蛋白质合成的影响,筛选应激适应相关蛋白。方法:通过双向电泳分离总蛋白、PDQUEST软件分析、肽质量指纹图谱分析候选蛋白肽段组成,分析应激与适应对细胞蛋白质合成的影响。初步鉴定应激适应蛋白质点的类别。结... 目的:初步分析应激与适应对蛋白质合成的影响,筛选应激适应相关蛋白。方法:通过双向电泳分离总蛋白、PDQUEST软件分析、肽质量指纹图谱分析候选蛋白肽段组成,分析应激与适应对细胞蛋白质合成的影响。初步鉴定应激适应蛋白质点的类别。结果:预适应后再次热应激组表达增加的蛋白质点在各分子量范围均有分布,而直接热应激组表达增加的蛋白质点大多局限于低分子量范围。肽质量指纹图谱分析候选蛋白序列,初步鉴定了Tubu linβ、中间丝vim entin、起始因子eIF-4AI、Eno1蛋白与应激适应密切相关。结论:细胞在紧急应激状态,可能会倾向于选择性地合成能够迅速翻译的小分子量蛋白质,应对应激损伤。预适应可通过提高细胞内保护性蛋白的贮备量,在再次应激时发挥保护作用。Tubu linβ、中间丝vim entin、起始因子eIF-4AI、Eno1蛋白差异表达,提示细胞骨架、蛋白质合成、糖代谢通路在应激适应中的重要作用。 展开更多
关键词 热预处理 应激 蛋白质组 成纤维细胞
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钙稳态失衡在1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡中的作用 被引量：6
9
作者 徐蕾 李文军 +2 位作者 林丹苗 张洪梅 邹飞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期479-485,共7页
目的研究钙稳态失衡在1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导SH-SY5Y细胞凋亡中的作用。方法 MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342和Annexin V+PI染色检测MPP+诱导人神经神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的凋亡作用;Western blot检测PARP蛋白表达的变... 目的研究钙稳态失衡在1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导SH-SY5Y细胞凋亡中的作用。方法 MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342和Annexin V+PI染色检测MPP+诱导人神经神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的凋亡作用;Western blot检测PARP蛋白表达的变化;罗丹明123染色检测MPP+对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响;激光共聚焦显微镜检测MPP+对SH-SY5Y细胞胞质钙、线粒体钙和内质网钙浓度的影响以及线粒体钙通道抑制剂钌红与MPP+联合应用对线粒体游离钙浓度、胞质游离钙浓度的影响。结果 MPP+导致SH-SY5Y细胞存活率下降且具有剂量-反应关系、MPP+能导致SH-SY5Y细胞凋亡、MPP+导致SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降、MPP+使SH-SY5Y细胞胞质和内质网游离钙离子浓度下降而使线粒体游离钙离子浓度上升。钌红可对抗MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡、阻止线粒体膜电位下降,减少PARP的切割片段以及阻断线粒体游离钙浓度的上升。结论线粒体钙超载在MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡中起重要作用。MPP+诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的凋亡可能与细胞质、线粒体及内质网的钙稳态失衡有关。 展开更多
关键词 MPP+ 凋亡 钙稳态 神经母细胞瘤
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Tubulin和HSP90在氧化应激预适应中的作用 被引量：2
10
作者 康红云 陈雪梅 邹飞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期104-106,共3页
目的:探讨热休克蛋白90和细胞骨架蛋白tubulin在氧化应激预适应中的作用。方法:应用不同浓度H2O2作用于HepG2细胞,建立HSP90不同表达量的模型后,MTT比色法检测细胞活力,Western blotting定量检测各模型中HSP90、tubulin量,激光扫描共聚... 目的:探讨热休克蛋白90和细胞骨架蛋白tubulin在氧化应激预适应中的作用。方法:应用不同浓度H2O2作用于HepG2细胞,建立HSP90不同表达量的模型后,MTT比色法检测细胞活力,Western blotting定量检测各模型中HSP90、tubulin量,激光扫描共聚焦显微镜测定该两种蛋白在对照、预适应、氧化应激、预适应后氧化应激下的分布和共定位。结果:MTT比色法结果提示预适应可提高应激状态下的细胞生存活力;Western blotting结果显示氧化应激预适应可提高细胞内HSP90和tubulin含量,减轻再次应激所致的HSP90和tubulin总量下降;激光共聚焦显示该两种蛋白有相似的细胞分布。结论:Tubulin可能协同HSP90在氧化应激预适应中起保护作用。 展开更多
关键词 热休克蛋白质90 微管蛋白 预处理 氧化性应激
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