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蛋白激酶G介导烧伤休克后内皮细胞骨架的变化
1
作者
肖能坎
吴杰裕
+2 位作者
黄巧冰
黄绪亮
石胜军
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第10期1750-1753,共4页
目的 :探讨蛋白激酶G(PKG)在烧伤休克发病机制中的作用。方法 :用 10 %人烧伤血清刺激培养的内皮细胞后 ,通过细胞裂解和离心获得细胞裂解液 ,用放射性同位素法测定PKG的活性。同时采用特异性荧光染色法检测细胞内肌动蛋白微丝 (F -act...
目的 :探讨蛋白激酶G(PKG)在烧伤休克发病机制中的作用。方法 :用 10 %人烧伤血清刺激培养的内皮细胞后 ,通过细胞裂解和离心获得细胞裂解液 ,用放射性同位素法测定PKG的活性。同时采用特异性荧光染色法检测细胞内肌动蛋白微丝 (F -actin)的结构和分布变化。用PKG特异性抑制剂KT5 82 3预处理细胞后 ,再检测烧伤血清介导的细胞内PKG活性和F -actin的变化。以空白组为阴性对照 ,以PKG激动剂 8-Br -cGMP刺激细胞作为阳性对照组。结果 :人烧伤血清和PKG的激动剂 8-Br -cGMP都可以时间依赖性地激活内皮细胞的PKG ,并且诱导细胞内F -actin呈极性分布。KT5 82 3预处理则明显抑制了这种变化。结论 :烧伤血清可以介导血管内皮细胞PKG的激活和F -actin的应力性变化 ;烧伤休克时的血管通透性升高与PKG的活性变化密切正相关 。
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关键词
烧伤
内皮
蛋白激酶类
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职称材料
三七总皂甙增强人内皮源性一氧化氮合酶基因启动子活性
被引量：
9
2
作者
张丽华
贾钰华
+4 位作者
孙学刚
邢飞跃
刘志锋
宋革
姜勇
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第10期1113-1116,共4页
目的探讨三七总皂甙(tPNS)对人内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子转录活性的调控机制。方法以基因重组技术构建人eNOS基因启动子区(-1~ -1 600 bp)驱动的萤火虫荧光素酶报告基因载体peNOS-Luc,采用脂质体介导的细胞基因共转染技术将...
目的探讨三七总皂甙(tPNS)对人内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子转录活性的调控机制。方法以基因重组技术构建人eNOS基因启动子区(-1~ -1 600 bp)驱动的萤火虫荧光素酶报告基因载体peNOS-Luc,采用脂质体介导的细胞基因共转染技术将peNOS-Luc、空载体pGL2-Basic和β-半乳糖苷酶表达质粒pCMV-β共转染NIH3T3细胞,用细菌脂多糖(LPS)、tPNS和转移生长因子β1(TGFβ1)等因子分别刺激转染后的NIH3T3细胞,检测并比较荧光素酶/β-半乳糖苷酶活性,以确定LPS、tPNS和TGFβ1对人eNOS基因启动子转录活性的影响。结果(1)酶切和测序结果均证实重组载体peNOS-Luc构建正确;(2)重组载体peNOS-Luc在NIH3T3细胞中有效表达;(3)在LPS刺激下,人eNOS启动子的转录活性降低,而在tPNS和TGFβ1刺激下,其启动子的转录活性增强,其中,TGFβ1较tPNS所致的转录活性更强。结论正确构建了人eNOS基因启动子区(-1^-1 600 bp)驱动的萤火虫荧光素酶报告基因载体peNOS-Luc;tPNS在NIH3T3细胞中增强人eNOS基因启动子的转录活性。
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关键词
三七总皂甙
一氧化氮合酶
基因表达调控
酶学
共转染
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职称材料
题名
蛋白激酶G介导烧伤休克后内皮细胞骨架的变化
1
作者
肖能坎
吴杰裕
黄巧冰
黄绪亮
石胜军
机构
南方医科大学
珠江医院烧伤科
南方医科大学全军休克微循环重点实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第10期1750-1753,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目 (No .39870 80 8)
广东省自然科学基金资助项目 (No.980 2 2 0 )
文摘
目的 :探讨蛋白激酶G(PKG)在烧伤休克发病机制中的作用。方法 :用 10 %人烧伤血清刺激培养的内皮细胞后 ,通过细胞裂解和离心获得细胞裂解液 ,用放射性同位素法测定PKG的活性。同时采用特异性荧光染色法检测细胞内肌动蛋白微丝 (F -actin)的结构和分布变化。用PKG特异性抑制剂KT5 82 3预处理细胞后 ,再检测烧伤血清介导的细胞内PKG活性和F -actin的变化。以空白组为阴性对照 ,以PKG激动剂 8-Br -cGMP刺激细胞作为阳性对照组。结果 :人烧伤血清和PKG的激动剂 8-Br -cGMP都可以时间依赖性地激活内皮细胞的PKG ,并且诱导细胞内F -actin呈极性分布。KT5 82 3预处理则明显抑制了这种变化。结论 :烧伤血清可以介导血管内皮细胞PKG的激活和F -actin的应力性变化 ;烧伤休克时的血管通透性升高与PKG的活性变化密切正相关 。
关键词
烧伤
内皮
蛋白激酶类
Keywords
Burns
Endothelium
Protein kinases
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
三七总皂甙增强人内皮源性一氧化氮合酶基因启动子活性
被引量：
9
2
作者
张丽华
贾钰华
孙学刚
邢飞跃
刘志锋
宋革
姜勇
机构
南方医科大学
中医系
南方医科大学全军休克微循环重点实验室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004年第10期1113-1116,共4页
基金
国家杰出青年科学基金(39925014)
国家自然科学基金(30030060
39800074)~~
文摘
目的探讨三七总皂甙(tPNS)对人内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子转录活性的调控机制。方法以基因重组技术构建人eNOS基因启动子区(-1~ -1 600 bp)驱动的萤火虫荧光素酶报告基因载体peNOS-Luc,采用脂质体介导的细胞基因共转染技术将peNOS-Luc、空载体pGL2-Basic和β-半乳糖苷酶表达质粒pCMV-β共转染NIH3T3细胞,用细菌脂多糖(LPS)、tPNS和转移生长因子β1(TGFβ1)等因子分别刺激转染后的NIH3T3细胞,检测并比较荧光素酶/β-半乳糖苷酶活性,以确定LPS、tPNS和TGFβ1对人eNOS基因启动子转录活性的影响。结果(1)酶切和测序结果均证实重组载体peNOS-Luc构建正确;(2)重组载体peNOS-Luc在NIH3T3细胞中有效表达;(3)在LPS刺激下,人eNOS启动子的转录活性降低,而在tPNS和TGFβ1刺激下,其启动子的转录活性增强,其中,TGFβ1较tPNS所致的转录活性更强。结论正确构建了人eNOS基因启动子区(-1^-1 600 bp)驱动的萤火虫荧光素酶报告基因载体peNOS-Luc;tPNS在NIH3T3细胞中增强人eNOS基因启动子的转录活性。
关键词
三七总皂甙
一氧化氮合酶
基因表达调控
酶学
共转染
Keywords
Panax notoginseng saponin
endothelial nitric oxide synthase
gene expression regulation
enzymologic
co-transfection
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蛋白激酶G介导烧伤休克后内皮细胞骨架的变化
肖能坎
吴杰裕
黄巧冰
黄绪亮
石胜军
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
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职称材料
2
三七总皂甙增强人内皮源性一氧化氮合酶基因启动子活性
张丽华
贾钰华
孙学刚
邢飞跃
刘志锋
宋革
姜勇
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2004
9
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