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当归拈痛汤调控Fas/caspase-8通路促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡 被引量:22
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作者 赵帆 李佳钰 +2 位作者 陆麒瑾 陈恩生 袁立霞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1119-1126,共8页
目的探究当归拈痛汤(DGNTD)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡及TNF受体超族成员6(Fas)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)通路的影响。方法收集临床RA患者的滑膜组织,无菌条件下采用酶解法分离并培养出FLS细胞。采用免疫荧光... 目的探究当归拈痛汤(DGNTD)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡及TNF受体超族成员6(Fas)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)通路的影响。方法收集临床RA患者的滑膜组织,无菌条件下采用酶解法分离并培养出FLS细胞。采用免疫荧光染色法对细胞进行鉴定。FLS细胞分为空白组(NC组)、DGNTD低剂量组、DGNTD中剂量组、DGNTD高剂量组、Fas抑制剂联合DGNTD组(KR-33493+DGNTD组)。NC组:10%空白血清干预FLS细胞;DGNTD低剂量组:10%DGNTD低剂量含药血清干预FLS细胞;DGNTD中剂量组:10%DGNTD中剂量含药血清干预FLS细胞;DGNTD高剂量组:10%DGNTD高剂量含药血清干预FLS细胞;KR-33493+DGNTD组:20μmol/mL KR-33493+10%DGNTD高剂量含药血清干预FLS细胞。通过MTT法检测不同剂量DGNTD对FLS细胞增殖的影响;Hoechst 33342法和Annexin V-FITC/PI流式细胞术分别检测FLS细胞凋亡特性和凋亡率;qPCR和Western blot分别检测FLS细胞Fas、Fas相关蛋白(FADD)、caspase-8、caspase-3的mRNA和蛋白表达量。结果免疫荧光实验证明本实验提取出的细胞为FLS细胞;MTT结果显示DGNTD含药血清随着剂量和干预时间的增加可显著抑制FLS的增殖(P<0.05);Hoechst33342和流式细胞术结果显示不同剂量的DGNTD含药血清可以显著促进FLS细胞凋亡(P<0.05);qPCR和Western blot均显示不同剂量的DGNTD含药血清可以显著提高Fas、FADD、caspase-8、caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05);进一步发现,Fas蛋白抑制剂(KR-33493)可以逆转DGNTD对FLS细胞的上述作用(P<0.05)。结论当归拈痛汤可能通过激活Fas/caspase-8通路来诱导FLS细胞凋亡。 展开更多
关键词 当归拈痛汤 Fas/caspase-8通路 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 细胞凋亡
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血管翳并非类风湿关节炎的专利——膝骨关节炎血管翳病理形态观察 被引量:10
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作者 陈永 邱富娟 +3 位作者 朱兴旺 莫海月 吴自勍 肖长虹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期747-750,共4页
目的比较类风湿关节炎(RA)与骨关节炎(OA)滑膜组织病理学差异。方法回顾性分析72例RA、24例OA患者经关节腔镜手术获得的滑膜标本病理苏木精-伊红(HE)染色切片,经两位高年资病理医师对滑膜细胞(FLS)增生程度、血管增生程度、纤维组织增... 目的比较类风湿关节炎(RA)与骨关节炎(OA)滑膜组织病理学差异。方法回顾性分析72例RA、24例OA患者经关节腔镜手术获得的滑膜标本病理苏木精-伊红(HE)染色切片,经两位高年资病理医师对滑膜细胞(FLS)增生程度、血管增生程度、纤维组织增生程度、淋巴细胞浸润程度几个方面进行量化评分,对有无浆细胞浸润采用计数统计。并结合临床分析RA、OA滑膜病理形态学的差异。结果OA滑膜也存在着血管翳形成,但OA-FLS增生程度、纤维组织增生程度和淋巴细胞浸润程度,及浆细胞浸润比例明显低于RA血管翳;血管增生程度低于RA血管翳,但无统计学差异。OA血管翳在显微镜下可表现的与RA难以区分。结论OA滑膜存在着血管翳病理变化,FLS增生程度、纤维组织增生程度和淋巴细胞浸润程度,及浆细胞浸润比例明显低于RA血管翳;OA与RA血管翳的差异给诊断和治疗提示了一定潜在的价值。 展开更多
关键词 血管翳 骨关节炎 类风湿关节炎 组织病理学
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类风湿性关节炎患者血浆腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平升高并与疾病活动度呈正相关 被引量:7
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作者 陈永 邱富娟 肖长虹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期438-443,共6页
目的探索血浆腺苷酸活化的蛋白激酶α1(AMPKα1)与磷酸化的腺苷酸活化的蛋白激酶(p-AMPK)水平与类风湿性关节炎(RA)炎症活动度的相关性。方法募集健康人(HC)15例、骨关节炎(OA)患者17例、RA患者61例[依据28个关节疾病活动度-血沉(DAS28-... 目的探索血浆腺苷酸活化的蛋白激酶α1(AMPKα1)与磷酸化的腺苷酸活化的蛋白激酶(p-AMPK)水平与类风湿性关节炎(RA)炎症活动度的相关性。方法募集健康人(HC)15例、骨关节炎(OA)患者17例、RA患者61例[依据28个关节疾病活动度-血沉(DAS28-ESR)评分,其中22例为高疾病活动,20例为中度疾病活动,19例为低疾病活动]。测定患者ESR、C-反应蛋白(CRP)水平;ELISA检测血浆AMPKα1与磷酸化的AMPK(p-AMPK)水平以及白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。Pearson检验比较AMPKα1与p-AMPK水平与DAS28、炎症相关性指标及炎症因子的相关性。结果与HC人群相比,OA患者及不同疾病活动度的RA患者血浆AMPKα1与p-AMPK水平在一定程度上增加;p-AMPK水平与DAS28呈中等强度的正相关性(r=0.27,95%CI:0.01~0.49),AMPKα1显示出与TNF-α水平中等强度的正相关性(r=0.46,95%CI:0.24~0.64)。结论p-AMPK水平在RA患者血浆中可能反应性增高,并与临床病情活动度、炎症指标显示出正相关性。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎(RA) 病情活动度 腺苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)
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