槐定碱对裸鼠移植性实体瘤SW480生长及p53、VEGF表达作用的研究 被引量：13

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作者 王启瑞 黎春华 +4 位作者 符秀琼 刘亚伟 唐靖 范钦 孙学刚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1593-1596,共4页

目的探讨盐酸槐定碱对裸鼠移植性实体瘤SW480的作用及对p53和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法建立裸鼠移植性实体瘤SW480模型,观察在槐定碱作用下移植性实体瘤SW480的体积和质量,用免疫组化法、Western blotting、荧光定量PCR... 目的探讨盐酸槐定碱对裸鼠移植性实体瘤SW480的作用及对p53和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法建立裸鼠移植性实体瘤SW480模型,观察在槐定碱作用下移植性实体瘤SW480的体积和质量,用免疫组化法、Western blotting、荧光定量PCR法检测移植性实体瘤组织中p53、VEGF的表达。结果槐定碱组裸鼠移植性实体瘤SW480的体积和质量、p53表达、VEGF表达均显著低于对照组,对移植性实体瘤抑瘤率为34.07%。结论槐定碱对裸鼠移植性实体瘤SW480的生长有明显抑制作用,与抑制p53、VEGF表达相关。 展开更多

关键词 移植性实体瘤 SW480 槐定碱 P53 血管内皮生长因子

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了哥王根茎中的酚性成分及其抗肿瘤活性研究 被引量：20

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作者 邵萌 黄晓君 +5 位作者 孙学刚 王英 杨雨 王启瑞 范钦 叶文才 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期851-855,875,共6页

采用多种色谱手段,从了哥王根茎中共分离得到17个酚类化合物;通过理化常数和NMR、MS等光谱数据分别鉴定为：荛花酚（1）、罗汉松脂素（2）、丁香脂素（3）、松脂酚（4）、异落叶松脂素（5）、刺五加酮（6）、异鼠李素-3-O-刺槐双糖苷（... 采用多种色谱手段,从了哥王根茎中共分离得到17个酚类化合物;通过理化常数和NMR、MS等光谱数据分别鉴定为：荛花酚（1）、罗汉松脂素（2）、丁香脂素（3）、松脂酚（4）、异落叶松脂素（5）、刺五加酮（6）、异鼠李素-3-O-刺槐双糖苷（7）、wikstaiwanone A（8）、wikstaiwanone B（9）、山奈酚（10）、芦丁（11）、西瑞香素（12）、triumbelletin（13）、赤杨二醇（14）、芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷（15）、绿原酸（16）、对羟基苯甲酸（17）,其中化合物3~9、13~16为首次从该植物中分离得到。体外抗肿瘤活性筛选实验表明,化合物1~4,6~9对人结肠癌SW480和SW620细胞均表现出不同程度的增殖抑制作用,其中化合物6对两种细胞的作用最为显著。 展开更多

关键词 了哥王 化学成分 酚性成分 抗肿瘤

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穗花杉双黄酮通过影响caspase-3和β-catenin表达诱导结肠癌细胞SW480凋亡 被引量：20

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作者 杨雨 徐文娟 +1 位作者 彭康 孙学刚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1035-1038,共4页

目的观察穗花杉双黄酮对人结肠癌细胞SW480增殖及凋亡相关因子caspase-3、β-catenin的影响,初步探讨其诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。方法 MTT细胞增殖试验检测穗花杉双黄酮对SW480细胞活力的影响,流式细胞术检测其对SW480细胞凋亡的... 目的观察穗花杉双黄酮对人结肠癌细胞SW480增殖及凋亡相关因子caspase-3、β-catenin的影响,初步探讨其诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。方法 MTT细胞增殖试验检测穗花杉双黄酮对SW480细胞活力的影响,流式细胞术检测其对SW480细胞凋亡的诱导作用,Western blot法检测穗花杉双黄酮作用细胞后caspase-3、β-catenin蛋白的表达。结果穗花杉双黄酮对SW480细胞生长有抑制作用,具有剂量依赖性。150μmol/L穗花杉双黄酮明显促进其凋亡,凋亡率显著高于对照组(P<0.01)。Western bolt结果表明,穗花杉双黄酮干预可以使caspase-3表达明显增强,β-catenin表达明显减弱。结论穗花杉双黄酮可诱导人结肠癌细胞SW480凋亡,并影响凋亡相关因子caspase-3、β-catenin的表达,从而达到抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 穗花杉双黄酮 SW480 CASPASE-3 Β-CATENIN

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慢病毒介导LOX-1基因RNA干扰抑制氧化应激诱导心肌细胞凋亡 被引量：7

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作者 刘彬 黄佳城 +5 位作者 周迎春 孙学刚 曾文璧 李杏 臧书文 郝文文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期165-168,172,共5页

目的构建大鼠凝集素养氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)RNA干扰慢病毒表达载体并观察LOX-1在氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用。方法设计针对大鼠LOX-1的shRNA序列,将shRNA序列插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,构建慢病毒载体pLL3.... 目的构建大鼠凝集素养氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)RNA干扰慢病毒表达载体并观察LOX-1在氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用。方法设计针对大鼠LOX-1的shRNA序列,将shRNA序列插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,构建慢病毒载体pLL3.7-LOXl。慢病毒载体及包装载体dR8.9、VSVG共转染293FT细胞包装慢病毒。慢病毒侵染H9C2大鼠心肌细胞,RT-PCR鉴定对LOX-1抑制效率,CCK-8、Hochest33258染色检测LOX-1对H_2O_2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响。结果通过双酶切鉴定,证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,抑制LOX-1能抑制H_2O_2诱导的细胞活力下降,减轻H_2O_2诱导的心肌细胞凋亡,与H_2O_2组比较均有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建靶向大鼠LOX-1基因RNAi慢病毒载体,LOX-1激活可能在H_2O_2诱导心肌细胞凋亡中发挥重要作用。 展开更多

关键词 慢病毒 RNA干扰 LOX-1 氧化应激 凋亡

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哈蟆油对D-半乳糖所致雄性衰老大鼠肝组织CyclinD1、CDK6和P15蛋白表达的影响 被引量：7

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作者 姚晖 王晓娟 +2 位作者 黄莉萍 刁建新 邓虹珠 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1044-1046,1049,共4页

目的探讨哈蟆油对D-半乳糖所致雄性衰老大鼠肝组织细胞周期素D1(CyclinD1)、周期性依赖性激酶6(CDK6)和细胞周期蛋白D/CDK激酶的抑制因子P15蛋白表达调控的影响。方法 SPF级SD雄性大鼠18只,随机分为模型、维生素E(VE)和哈蟆油组,每组6只... 目的探讨哈蟆油对D-半乳糖所致雄性衰老大鼠肝组织细胞周期素D1(CyclinD1)、周期性依赖性激酶6(CDK6)和细胞周期蛋白D/CDK激酶的抑制因子P15蛋白表达调控的影响。方法 SPF级SD雄性大鼠18只,随机分为模型、维生素E(VE)和哈蟆油组,每组6只,D-半乳糖颈背部皮下连续注射6周,另取雄性大鼠6只,同样部位每日注射生理盐水,作为空白组。第3周开始灌胃给药,给药时间30d。给药结束后收集标本采用Western blotting法检测肝组织CyclinD1、CDK6和P15蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠肝脏CyclinD1蛋白、CDK6蛋白、P15蛋白表达明显下调。雄性衰老大鼠口服哈蟆油后,CyclinD1、CDK6和P15蛋白表达量(与内参比较)分别为41.73±0.54、23.29±0.30和21.49±0.30。与模型组相比,哈蟆油组能明显上调肝脏CyclinD1、CDK6、P15蛋白的表达(P<0.01)。结论哈蟆油能不同程度上调CyclinD1和CDK6蛋白表达,促进衰老雄性大鼠肝细胞增殖。同时反馈性上调细胞增殖负性调控蛋白P15表达,防止不必要的过度增殖。哈蟆油延缓雄性衰老作用可能通过调控肝脏有关增殖蛋白表达发挥抗衰老作用,与VE作用有所不同。 展开更多

关键词 哈蟆油 衰老 肝脏 D-半乳糖 细胞增殖

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巨泡式死亡:一种新的细胞死亡方式 被引量：6

6

作者 蔡红兵 刘金坤 +1 位作者 范钦 李欣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1844-1847,共4页

细胞死亡是生命活动过程中一项重要的生理或病理现象。传统的细胞死亡方式主要包括凋亡、坏死和自噬等。新近研究发现了一种新的细胞死亡方式-methuosis,在这种细胞死亡过程中,由于过度刺激导致细胞内水泡吸收、积累、融合而逐步形成相... 细胞死亡是生命活动过程中一项重要的生理或病理现象。传统的细胞死亡方式主要包括凋亡、坏死和自噬等。新近研究发现了一种新的细胞死亡方式-methuosis,在这种细胞死亡过程中,由于过度刺激导致细胞内水泡吸收、积累、融合而逐步形成相对于细胞本身而言的大量巨大液泡,最终导致细胞代谢活动减少、细胞膜破裂、细胞死亡。本文对巨泡式死亡的命名来源、形态特征、可能的机制、与相关死亡方式的区别及其研究进展进行了阐述。 展开更多

关键词 细胞死亡 methuosis 巨泡式死亡 细胞质空泡化

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硫利达嗪诱导SW480细胞凋亡的机制 被引量：2

7

作者 刘金坤 郝亚娟 +3 位作者 黄嘉维 李欣 蔡红兵 彭康 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期511-515,共5页

目的：研究硫利达嗪对结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响。方法应用5-30μmol/L硫利达嗪处理SW480细胞，MTT法检测细胞增殖抑制率；Hoechst33342细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变；流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期；RT-qPCR分析... 目的：研究硫利达嗪对结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响。方法应用5-30μmol/L硫利达嗪处理SW480细胞，MTT法检测细胞增殖抑制率；Hoechst33342细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变；流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期；RT-qPCR分析PDCD4、c-MYC、BCL2、CCND1、CASPASE3、PARP1、CDK4、EIF4A基因表达水平；Western blotting检测AKT、p-AKT、PDCD4蛋白表达水平。结果 MTT结果表明硫利达嗪抑制SW480细胞的增殖，硫利达嗪处理细胞后出现核固缩、染色质凝集和核碎片化等典型的细胞凋亡特征；流式检测表明硫利达嗪诱导G0/G1期阻滞，细胞凋亡增加。RT-PCR结果表明硫利达嗪处理细胞后PDCD4表达上调，CCND1、CDK4、c-MYC、BCL2、CASPASE3、PARP1和EIF4A表达下调。免疫印迹分析结果显示PDCD4蛋白表达上调，p-AKT蛋白表达下调。结论硫利达嗪能够抑制人结肠癌SW480细胞的增殖，并诱导其凋亡，其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路导致PDCD4表达水平升高有关。 展开更多

关键词 结肠癌 SW480 硫利达嗪 细胞凋亡

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脑摄取平衡时丙泊酚对犬脑不同区域GAT-1 mRNA和GAD65 mRNA的影响 被引量：1

8

作者 杨晶晶 林春水 +4 位作者 古妙宁 李洋 刘亚伟 范钦 陈莺 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1469-1473,共5页

目的 探讨不同剂量丙泊酚恒速静注50 min时对犬脑不同区域γ-氨基丁酸浆膜转运体1（GAT-1）及谷氨酸脱羧酶65（GAD65）mRNA的影响。方法 18只12-18月健康杂种犬，雌雄不限，体质量10-12 kg，随机分为对照组（C组）、低剂量组（L组）和... 目的 探讨不同剂量丙泊酚恒速静注50 min时对犬脑不同区域γ-氨基丁酸浆膜转运体1（GAT-1）及谷氨酸脱羧酶65（GAD65）mRNA的影响。方法 18只12-18月健康杂种犬，雌雄不限，体质量10-12 kg，随机分为对照组（C组）、低剂量组（L组）和高剂量组（H组），每组6只。L组和H组分别以丙泊酚5.5 mg/kg和7.0 mg/kg静脉注射，续以55 mg/（kg.h）和70 mg/（ kg.h）恒速静脉输注50 min，分别取颈内动、静脉血各2 ml后，快速静脉注射10% KCl注射液2 mg/kg处死；采用高效液相色谱-紫外法（HPLC-UV）测动、静脉血浆丙泊酚浓度。C组不给予任何干预措施，快速静脉注射10% KCl注射液2 mg/kg处死。3组均解剖获取下丘脑、底丘脑、背侧丘脑、海马、脑桥、顶叶、额叶组织，采用实时荧光定量PCR技术测脑组织中GAT-1 mRNA和GAD65 mRNA的表达水平。结果 丙泊酚静脉输注50 min时，L组和H组丙泊酚血浆浓度（动脉-动脉，静脉-静脉比较）差异显著（P〈0.01），而两组颈内动脉和静脉丙泊酚血浆浓度比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。L组和H组下丘脑和海马GAT-1 mRNA的相对表达量均明显高于C组（P〈0.05, P〈0.01），两组之间差异无统计学意义（P〉0.05）；其他脑区GAT-1 mRNA的相对表达量3组均无显著差异。下丘脑和海马GAT-1 mRNA相对表达量的变化率，L组分别为（61.26±7.17）%和（79.34±39.95）%，差异无统计学意义（P〉0.05）；H组分别为（74.64±19.63）%和（97.12±32.31）%，差异无统计学意义（P〉0.05）。背侧丘脑GAD65 mRNA 的相对表达量，L组和H组均明显高于C组（P〈0.01）；其他脑区GAD65 mRNA的相对表达量3组均无显著差异。结论 丙泊酚恒速静注50 min，犬脑对丙泊酚的摄取处于平衡状态，此时，丙泊酚可明显上调下丘脑和海马GAT-1 mRNA以及背侧丘脑GAD65 mRNA的表达，呈非剂量依赖性。 展开更多

关键词 丙泊酚 γ氨基丁酸浆膜转运体1 谷氨酸脱羧酶2 脑 犬

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慢病毒介导的ebv-miR-BART7稳定过表达鼻咽癌细胞株CNE1的建立 被引量：1

9

作者 袁存存 蔡红兵 +4 位作者 黄宇琦 叶艳芬 赵曼丽 吕晓明 李欣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期419-422,共4页

目的构建ebv-miR-BART7慢病毒表达载体,建立其稳定表达的鼻咽癌细胞株CNE1-pLVTHM/BART7。方法构建慢病毒表达质粒pLVTHM/BART7。用293FT细胞包装后产生的成熟慢病毒颗粒感染CNE1细胞。经流式细胞仪筛选后,建立稳定表达ebv-miR-BART7鼻... 目的构建ebv-miR-BART7慢病毒表达载体,建立其稳定表达的鼻咽癌细胞株CNE1-pLVTHM/BART7。方法构建慢病毒表达质粒pLVTHM/BART7。用293FT细胞包装后产生的成熟慢病毒颗粒感染CNE1细胞。经流式细胞仪筛选后,建立稳定表达ebv-miR-BART7鼻咽癌细胞株。最后用荧光定量PCR检测其表达水平。结果 PCR和测序验证pLVTHM/BART7重组质粒构建成功;经293FT细胞病毒包装,感染CNE1细胞后,与阴性对照组和未感染组相比,其表达水平明显升高。结论成功构建了pLVTHM/BART7慢病毒重组质粒,建立了稳定表达ebv-miR-BART7的鼻咽癌细胞株CNE1-pLVTHM/BART7,为研究ebv-miR-BART7在鼻咽癌发生发展过程中的基因调控和相应的作用机制提供了有用的细胞模型。 展开更多

关键词 ebv-miR-BART7 慢病毒 重组质粒 鼻咽癌细胞

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对比超声评价急性脑缺血对犬脑组织血流灌注的影响 被引量：1

10

作者 曾平 孙学刚 +4 位作者 查道刚 宾建平 周颖玲 陈勇驰 刘伊丽 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1518-1521,共4页

目的应用对比超声(CEU)定量评价急性脑缺血对脑组织血流灌注的影响。方法健康杂种犬6条,左侧顶骨开窗。动脉夹夹闭左颈总动脉(LCCA)后即刻、30、60、90及120min后行声学造影。对图像进行脱机分析,得出不同时间点左右大脑皮质相应的脑组... 目的应用对比超声(CEU)定量评价急性脑缺血对脑组织血流灌注的影响。方法健康杂种犬6条,左侧顶骨开窗。动脉夹夹闭左颈总动脉(LCCA)后即刻、30、60、90及120min后行声学造影。对图像进行脱机分析,得出不同时间点左右大脑皮质相应的脑组织微循环血管容积(A)、血流速度(β)及血流量(A×β)。以右侧颈总动脉血流及犬头部SPECT扫描与CEU结果相对照。结果 CEU估测脑血流量(CBF)与颈动脉血流量具有良好相关性。夹闭LCCA后同一大脑半球前后不同时间点之间及双侧大脑半球同一时间点之间A、β及A×β均有显著性差异(P<0.001)。夹闭侧大脑半球即刻出现缺血性低灌注,对侧大脑半球出现充血性高灌注,120min后两侧大脑半球CBF基本一致。结论对比超声实现了实时观察犬一侧颈总动脉夹闭后时双侧大脑半球CBF的动态变化过程,血流速度β可能是急性脑缺血时CBF变化的主要调节因素。 展开更多

关键词 对比超声 脑缺血 脑组织血流灌注

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芍药苷抑制Src/STAT3信号通路协同替莫唑胺抑制胶质瘤细胞增殖和迁移 被引量：11

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作者 高卓维 陈广鸿 符路娣 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第23期3199-3205,共7页

目的观察芍药苷协同替莫唑胺对原代胶质瘤细胞体外增殖和迁移的影响,初步探讨其作用机制。方法MTS法检测芍药苷、替莫唑胺以及两药联合对原代胶质瘤胶质瘤细胞活力的影响,应用等效线图分析协同效应。采用EdU染色检测细胞增殖,Transwell... 目的观察芍药苷协同替莫唑胺对原代胶质瘤细胞体外增殖和迁移的影响,初步探讨其作用机制。方法MTS法检测芍药苷、替莫唑胺以及两药联合对原代胶质瘤胶质瘤细胞活力的影响,应用等效线图分析协同效应。采用EdU染色检测细胞增殖,Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移,通过反向药效团对接技术探索芍药苷抑制原代胶质瘤细胞的潜在作用靶点并采用Western blot进行验证。结果芍药苷及替莫唑胺呈浓度和时间依赖性抑制原代胶质瘤细胞活力,两药联合具有协同抑制作用;两药联合对胶质瘤细胞增殖和迁移的抑制作用明显高于芍药苷及替莫唑胺单药组;反向药效团对接技术提示Src可能是芍药苷的作用靶点,Western blot检测表明芍药苷能够显著抑制p⁃Src和p⁃STAT3的表达,芍药苷通过抑制Src/STAT3信号通路协同替莫唑胺增强了对增殖和迁移相关蛋白的抑制作用。结论芍药苷能显著提高替莫唑胺的抗胶质瘤作用,此协同作用主要通过抑制Src/STAT3信号通路的激活,从而进一步增强对增殖和迁移相关蛋白的抑制作用,抑制胶质瘤细胞增殖和迁移。 展开更多

关键词 胶质瘤 替莫唑胺 芍药苷 Src/STAT3信号通路 增殖 迁移

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靶向结直肠癌的小白菊内酯脂质体纳米颗粒诱导程序性坏死并改善T细胞耗竭 被引量：2

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作者 姚婉瑜 汪枭睿 +7 位作者 杨雨 游俊雄 金军国 曾平 韩钦芮 姚学清 孙学刚 周瑾 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1674-1681,共8页

目的研究小白菊内酯(PTL)诱导结直肠癌细胞程序性坏死,并通过调节T细胞耗竭抑制结直肠癌的发展的机制,并通过构建其靶向脂质体改进其临床应用。方法通过CCK8实验检测不同结直肠肿瘤细胞经PTL处理后的增殖能力。利用ROS与LDH检测分析PTL... 目的研究小白菊内酯(PTL)诱导结直肠癌细胞程序性坏死,并通过调节T细胞耗竭抑制结直肠癌的发展的机制,并通过构建其靶向脂质体改进其临床应用。方法通过CCK8实验检测不同结直肠肿瘤细胞经PTL处理后的增殖能力。利用ROS与LDH检测分析PTL诱导MC38细胞死亡的方式并进行蛋白免疫印迹分析。将24只小鼠随机分成对照组(等量生理盐水)、低剂量PTL组(5 mg/kg)与高剂量PTL组(15 mg/kg),通过在小鼠腹股沟皮下注射MC38细胞构建皮下瘤模型,给药后检测各组小鼠皮下瘤的重量与CD8^(+)T细胞的浸润情况,分析CD8^(+)T细胞耗竭表型的变化。构建PTL脂质体并对其进行表征。通过在小鼠回盲部移植肿瘤构建结直肠癌原位移植瘤模型,将32只小鼠随机分成对照组(等量生理盐水)、PTL处理组(100μg/mL)、低剂量靶向脂质体TCP-1-PTL-LNPs组(100μg/mL)和高剂量TCP-1-PTL-LNPs组(200μg/mL),尾静脉注射给药,通过免疫组化分析CD8在肿瘤中的表达情况。结果多种结直肠癌细胞(SW480、DLD1、HCT116和MC38)在PTL作用下随着药物浓度梯度增加细胞活力逐渐下降。在MC38细胞中,这一效应可被抑制剂Nec-1拮抗,同时免疫蛋白印迹分析显示经PTL处理细胞出现RIP3和MLKL的磷酸化。在小鼠皮下瘤模型中,经流式细胞术分析,与对照组或低剂量组相比,高剂量PTL组出现了肿瘤CD3^(+)CD8^(+)T细胞的浸润增加(P<0.01),同时PD1hiTIM3^(+)T细胞比例显著增加(P<0.01),而PD1loTIM3-T细胞比例显著降低(P<0.01)。在小鼠结直肠癌原位移植瘤模型中,经过PTL治疗,免疫组化结果显示CD8表达较对照组明显增加,而使用了高浓度靶向脂质体治疗的肿瘤中CD8表达更进一步增加(P<0.01)。结论小白菊内酯通过诱导细胞程序性坏死、增加肿瘤CD8^(+)T细胞浸润,改善CD8^(+)T细胞耗竭,其靶向脂质体能提高其抗肿瘤效应。 展开更多

关键词 小白菊内酯 结直肠癌 程序性坏死 纳米颗粒 T细胞耗竭

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