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PKD3促进非小细胞肺癌A549细胞迁移的作用和机制
被引量：
2
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作者
邹志鹏
曾方银
+3 位作者
冯丽
柯志勇
Wang Q Jane
邓凡
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第15期1609-1612,共4页
目的探讨PKD3在非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭中的作用及机制。方法以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,通过重组腺病毒感染和siRNA转染的策略,采用HEK293细胞测定病毒滴度;荧光定量RT-PCR和Westernblot检测转染对照siRNA与PKD3 siRNA的A...
目的探讨PKD3在非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭中的作用及机制。方法以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,通过重组腺病毒感染和siRNA转染的策略,采用HEK293细胞测定病毒滴度;荧光定量RT-PCR和Westernblot检测转染对照siRNA与PKD3 siRNA的A549细胞中PKD3、MT1-MMP、MMP-2的mRNA和蛋白表达水平差异;创伤愈合实验检测PKD3过表达或siRNA转染后不同时间点各组细胞的迁移能力。结果经HEK293细胞病毒滴度测定,3种重组腺病毒Ade-LacZ、Ade-PKD3和Ade-PKD3-DN滴度分别达2.4×109、3.0×109、3.2×109PFU/ml;免疫印迹证实Ade-PKD3和Ade-PKD3-DN在A549中高效过表达;在感染细胞24 h后和细胞划痕后4、20 h,与Ade-LacZ感染的对照细胞相比,感染Ade-PKD3的A549迁移能力显著增强(P<0.01),而细胞划痕后8 h和20 h后,与Ade-LacZ感染细胞相比,Ade-PKD3-DN的A549迁移能力显著减弱(P<0.01);同时,siRNA敲低A549细胞中内源性PKD3的表达不仅在细胞划痕后的16、24、36 h明显抑制细胞的迁移,而且在mRNA和蛋白水平下调肿瘤细胞迁移和侵袭相关基因MT1-MMP、MMP-2的表达。结论 PKD3的表达可显著增强A549的迁移能力,这种作用可能通过上调MT1-MMP、MMP-2的表达实现。
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关键词
非小细胞肺癌
蛋白激酶D3
腺病毒
SIRNA
细胞迁移
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职称材料
题名
PKD3促进非小细胞肺癌A549细胞迁移的作用和机制
被引量：
2
1
作者
邹志鹏
曾方银
冯丽
柯志勇
Wang Q Jane
邓凡
机构
南方医科大学
:
细胞
生物学
教研室
南方医科大学
:
南方
医院检验科
University of Pittsburgh School of Medicine
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第15期1609-1612,共4页
基金
国家自然科学基金(30973014)
教育部留学回国人员科研启动基金(K1010353)~~
文摘
目的探讨PKD3在非小细胞肺癌细胞迁移和侵袭中的作用及机制。方法以人非小细胞肺癌A549细胞为研究对象,通过重组腺病毒感染和siRNA转染的策略,采用HEK293细胞测定病毒滴度;荧光定量RT-PCR和Westernblot检测转染对照siRNA与PKD3 siRNA的A549细胞中PKD3、MT1-MMP、MMP-2的mRNA和蛋白表达水平差异;创伤愈合实验检测PKD3过表达或siRNA转染后不同时间点各组细胞的迁移能力。结果经HEK293细胞病毒滴度测定,3种重组腺病毒Ade-LacZ、Ade-PKD3和Ade-PKD3-DN滴度分别达2.4×109、3.0×109、3.2×109PFU/ml;免疫印迹证实Ade-PKD3和Ade-PKD3-DN在A549中高效过表达;在感染细胞24 h后和细胞划痕后4、20 h,与Ade-LacZ感染的对照细胞相比,感染Ade-PKD3的A549迁移能力显著增强(P<0.01),而细胞划痕后8 h和20 h后,与Ade-LacZ感染细胞相比,Ade-PKD3-DN的A549迁移能力显著减弱(P<0.01);同时,siRNA敲低A549细胞中内源性PKD3的表达不仅在细胞划痕后的16、24、36 h明显抑制细胞的迁移,而且在mRNA和蛋白水平下调肿瘤细胞迁移和侵袭相关基因MT1-MMP、MMP-2的表达。结论 PKD3的表达可显著增强A549的迁移能力,这种作用可能通过上调MT1-MMP、MMP-2的表达实现。
关键词
非小细胞肺癌
蛋白激酶D3
腺病毒
SIRNA
细胞迁移
Keywords
non-small cell lung cancer
protein kinase D3
adenovirus
siRNA
cell migration
分类号
R345.557 [医药卫生—基础医学]
R730.23 [医药卫生—肿瘤]
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出处
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1
PKD3促进非小细胞肺癌A549细胞迁移的作用和机制
邹志鹏
曾方银
冯丽
柯志勇
Wang Q Jane
邓凡
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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引证文献
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