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携带GFP发光基因人猴嵌合免疫缺陷病毒SHIV的构建及活性检测
1
作者
李悦
莎日娜
+3 位作者
许璇
乔文涛
邵一鸣
杨贵波
《中国比较医学杂志》
CAS
2011年第2期7-11,F0002,I0001,共7页
目的获得正常感染宿主细胞并稳定表达绿色荧光的SHIV毒株,为后期建立发光SHIV/恒河猴感染模型奠定基础。方法通过分子克隆手段,将绿色荧光蛋白基因克隆到携带HIV-1包膜蛋白的SHIV病毒全基因组中,并在细胞水平检测各毒株的感染活性及荧...
目的获得正常感染宿主细胞并稳定表达绿色荧光的SHIV毒株,为后期建立发光SHIV/恒河猴感染模型奠定基础。方法通过分子克隆手段,将绿色荧光蛋白基因克隆到携带HIV-1包膜蛋白的SHIV病毒全基因组中,并在细胞水平检测各毒株的感染活性及荧光蛋白表达能力。结果得到一株可表达绿色荧光蛋白的病毒株SHIV-KB9nefGFP,并具有感染TZM-bl细胞系及猴PBMC的能力。结论该毒株在宿主细胞恒河猴PBMC中具有一定复制能力,希望通过后续的猴体内传代实验获得毒力更强的发光病毒。
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关键词
HIV-1
SHIV
模型
动物
GFP荧光蛋白
感染活性
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职称材料
SHIV-XJ02170感染恒河猴后期的传代特点和env基因变异
2
作者
陶真
丛喆
+10 位作者
刘强
李悦
刘浩
王卫
金光
陈霆
姚南
蒋虹
杨贵波
李喆
魏强
《中国比较医学杂志》
CAS
2011年第2期36-43,共8页
目的研究SHIV-XJ02170在中国恒河猴感染后期传代过程中病毒和宿主的变化特点,并分析env基因的序列变异。方法将感染中国恒河猴G0401V后期(5年)的SHIV-XJ02170病毒垂直传代2只猴(G0401V→G0402V→0403V),同时,剔除G0401V猴CD8+T细胞使潜...
目的研究SHIV-XJ02170在中国恒河猴感染后期传代过程中病毒和宿主的变化特点,并分析env基因的序列变异。方法将感染中国恒河猴G0401V后期(5年)的SHIV-XJ02170病毒垂直传代2只猴(G0401V→G0402V→0403V),同时,剔除G0401V猴CD8+T细胞使潜伏的病毒大量复制后传代1只猴(G0401V→G0404V),应用流式细胞术、病毒载量测定、序列分析等方法研究该病毒在猴体内长期适应后的病毒和免疫学指标及序列变异特点。结果 G0401V在感染后期仍能稳定传代,且表现出毒力增强的特点。其传代猴G0402V在传代后41 d死亡,外周血CD4+T淋巴细胞衰竭,仅为43个/mL,符合艾滋病感染猴快速进展型的特征。剔除体内CD8+T细胞之后的传代猴G0404V的表现类似G0401V,即长期低水平的病毒血症水平。env基因序列分析发现SHIV-XJ02170在G0401V体内长期适应后发生了可遗传的序列变异,并引起糖基化位点的改变。结论 SHIV-XJ02170在猴体长期适应后的传代过程中表现出向强毒株过渡的特征,为进行SHIV-XJ02170感染性克隆的构建奠定了良好的实验基础。
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关键词
SHIV-XJ02170
CD8+T细胞体内剔除
传代
ENV
变异
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职称材料
题名
携带GFP发光基因人猴嵌合免疫缺陷病毒SHIV的构建及活性检测
1
作者
李悦
莎日娜
许璇
乔文涛
邵一鸣
杨贵波
机构
南开大学艾滋病研究中心
天津市医学高等专科学校
中国疾病预防控制
中心
性病与
艾滋病
中心
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2011年第2期7-11,F0002,I0001,共7页
基金
南开大学基本科研资助项目(65010681)
文摘
目的获得正常感染宿主细胞并稳定表达绿色荧光的SHIV毒株,为后期建立发光SHIV/恒河猴感染模型奠定基础。方法通过分子克隆手段,将绿色荧光蛋白基因克隆到携带HIV-1包膜蛋白的SHIV病毒全基因组中,并在细胞水平检测各毒株的感染活性及荧光蛋白表达能力。结果得到一株可表达绿色荧光蛋白的病毒株SHIV-KB9nefGFP,并具有感染TZM-bl细胞系及猴PBMC的能力。结论该毒株在宿主细胞恒河猴PBMC中具有一定复制能力,希望通过后续的猴体内传代实验获得毒力更强的发光病毒。
关键词
HIV-1
SHIV
模型
动物
GFP荧光蛋白
感染活性
Keywords
HIV-1
SHIV
Animal model
Green fluorescent protein
Infectious activity
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
SHIV-XJ02170感染恒河猴后期的传代特点和env基因变异
2
作者
陶真
丛喆
刘强
李悦
刘浩
王卫
金光
陈霆
姚南
蒋虹
杨贵波
李喆
魏强
机构
中国医学科学院医学实验动物
研究
所
中国疾病预防控制
中心
性艾
中心
南开大学艾滋病研究中心
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2011年第2期36-43,共8页
基金
国家十一五科技重大专项课题(2009ZX10004-402)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(DWS201009)
文摘
目的研究SHIV-XJ02170在中国恒河猴感染后期传代过程中病毒和宿主的变化特点,并分析env基因的序列变异。方法将感染中国恒河猴G0401V后期(5年)的SHIV-XJ02170病毒垂直传代2只猴(G0401V→G0402V→0403V),同时,剔除G0401V猴CD8+T细胞使潜伏的病毒大量复制后传代1只猴(G0401V→G0404V),应用流式细胞术、病毒载量测定、序列分析等方法研究该病毒在猴体内长期适应后的病毒和免疫学指标及序列变异特点。结果 G0401V在感染后期仍能稳定传代,且表现出毒力增强的特点。其传代猴G0402V在传代后41 d死亡,外周血CD4+T淋巴细胞衰竭,仅为43个/mL,符合艾滋病感染猴快速进展型的特征。剔除体内CD8+T细胞之后的传代猴G0404V的表现类似G0401V,即长期低水平的病毒血症水平。env基因序列分析发现SHIV-XJ02170在G0401V体内长期适应后发生了可遗传的序列变异,并引起糖基化位点的改变。结论 SHIV-XJ02170在猴体长期适应后的传代过程中表现出向强毒株过渡的特征,为进行SHIV-XJ02170感染性克隆的构建奠定了良好的实验基础。
关键词
SHIV-XJ02170
CD8+T细胞体内剔除
传代
ENV
变异
Keywords
SHIV-XJ02170
CD8+ T cells deletion in vivo
Passage
env
Sequence variation
Rhesus macaques
分类号
R33 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
携带GFP发光基因人猴嵌合免疫缺陷病毒SHIV的构建及活性检测
李悦
莎日娜
许璇
乔文涛
邵一鸣
杨贵波
《中国比较医学杂志》
CAS
2011
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
SHIV-XJ02170感染恒河猴后期的传代特点和env基因变异
陶真
丛喆
刘强
李悦
刘浩
王卫
金光
陈霆
姚南
蒋虹
杨贵波
李喆
魏强
《中国比较医学杂志》
CAS
2011
0
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