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交联草酸脱羧酶聚集体的制备及其性质 被引量:4
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作者 梁跃 林日辉 +4 位作者 黄文勤 秦梦 李香香 何美卿 郑元博 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期215-219,共5页
为了获得缓解泌尿系统草酸盐结石病症的酶制剂,用无载体固定化方法——交联酶聚集体(CLEAs)制备交联草酸脱羧酶聚集体。使用基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET32a/YvrK诱导表达制备草酸脱羧酶粗酶液,用30%的乙醇进行沉淀分离提纯,纯化倍数... 为了获得缓解泌尿系统草酸盐结石病症的酶制剂,用无载体固定化方法——交联酶聚集体(CLEAs)制备交联草酸脱羧酶聚集体。使用基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET32a/YvrK诱导表达制备草酸脱羧酶粗酶液,用30%的乙醇进行沉淀分离提纯,纯化倍数为2.7倍,酶活回收率91.2%;在戊二醛添加量为0.06%、pH5、牛血清白蛋白添加量0.5g/L、4℃的条件下处理该酶2h,得到交联草酸脱羧酶聚集体(oxdc-CLEAs),酶活回收率达95.4%;酶学性质研究表明,相对游离草酸脱羧酶,交联草酸脱羧酶聚集体的耐酸性、耐热性、耐胰蛋白酶降解能力均有提高。 展开更多
关键词 草酸脱羧酶 交联酶聚集体(CLEAs)制备 性质
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单甲氧基聚乙二醇-醛对草酸脱羧酶的修饰 被引量:2
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作者 韦成昱 林日辉 +3 位作者 黄文勤 龙寒 禤金彩 田卫满 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期30-35,共6页
草酸脱羧酶(Oxdc)可用于预防、治疗草酸钙结石症,为了改善其使用性能,该文采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)对Oxdc进行修饰,并对修饰反应条件进行了初步优化,在mPEG一醛/Oxdc摩尔比50:1,pH5.0,37℃反应12h条件下,Oxdc修饰率为5... 草酸脱羧酶(Oxdc)可用于预防、治疗草酸钙结石症,为了改善其使用性能,该文采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)对Oxdc进行修饰,并对修饰反应条件进行了初步优化,在mPEG一醛/Oxdc摩尔比50:1,pH5.0,37℃反应12h条件下,Oxdc修饰率为50.69%,酶活保持率67.52%。经SDS—PAGE和红外光谱(IR)分析,证明mPEG共价结合于酶蛋白分子上。酶学特性分析发现,热处理后修饰草酸脱羧酶(mPEG.Oxdc)的酶活保持21.6%,而野生草酸脱羧酶(Oxdc)酶活完全丧失;在pH2.0~pH6.0酸性环境下mPEG-Oxdc的酶活相对高于Oxdc;经胰蛋白酶处理,Oxdc相对酶活仅为20.6%,而mPEG—Oxdc保持47.1%。结果表明:mPEG—Oxdc相对于Oxdc,其热稳定性、pH适应性及对胰蛋白酶的耐受性都有所增强。 展开更多
关键词 草酸脱羧酶 单甲氧基聚乙二醇 活化 化学修饰
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高产琥珀酸放线杆菌的诱变选育 被引量:2
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作者 林日辉 黄新林 黄文勤 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期161-164,共4页
对琥珀酸放线杆菌(Actinobacillus succinogenes mdrh-5)进行紫外-亚硝基胍复合诱变,采用变色圈、氟乙酸耐受和CuSO_4快速分析结合的筛选方法,获得1株高产琥珀酸突变菌株。与野生菌相比,突变株琥珀酸产量提高了43%,副产物乙酸降低了66%... 对琥珀酸放线杆菌(Actinobacillus succinogenes mdrh-5)进行紫外-亚硝基胍复合诱变,采用变色圈、氟乙酸耐受和CuSO_4快速分析结合的筛选方法,获得1株高产琥珀酸突变菌株。与野生菌相比,突变株琥珀酸产量提高了43%,副产物乙酸降低了66%,突变株遗传性质稳定。 展开更多
关键词 琥珀酸 发酵 紫外-亚硝基胍复合诱变
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固定化脂肪酶催化合成松香淀粉酯的研究 被引量:1
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作者 李贺 林日辉 +3 位作者 黄文勤 龙寒 刘作娇 粟佳婷 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期103-110,共8页
采用木薯淀粉和松香为原料,研究了酶法催化松香木薯淀粉酯的合成。通过单因素和响应面法优化了各因素对松香淀粉酯取代度影响,结果表明最佳工艺条件为:松香与淀粉的质量比为3.6∶1,反应时间4.2 h,反应温度48.5℃,固定化脂肪酶用量为15%... 采用木薯淀粉和松香为原料,研究了酶法催化松香木薯淀粉酯的合成。通过单因素和响应面法优化了各因素对松香淀粉酯取代度影响,结果表明最佳工艺条件为:松香与淀粉的质量比为3.6∶1,反应时间4.2 h,反应温度48.5℃,固定化脂肪酶用量为15%(以淀粉质量计),此时松香淀粉酯取代度可达0.106。通过FT-IR,XRD和SEM对产物进行表征,产物在1729 cm-1产生CO的伸缩振动,说明松香与淀粉发生了酯化反应形成了松香淀粉酯,并且晶体形貌和结构发生了改变。同时对产物的性能进行了研究,结果表明,与预处理淀粉相比酯化产物的乳化能力和乳化稳定性分别增加了122.26%和134.16%、表面张力和透明度分别降低了46.9%和5.22%。 展开更多
关键词 酯化 木薯淀粉 松香 固定化脂肪酶 响应面法
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