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重组海藻糖合成酶工程菌的pH-stat高密度发酵工艺研究
被引量:
6
1
作者
蒙健宗
陈发忠
+1 位作者
王青艳
黄日波
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期125-128,共4页
重组海藻糖合成酶工程菌的分批补料发酵中,用氨水调节培养液的pH为6.78~6.80,初糖耗尽后按培养液的pH从6.80起每升高0.01即开始补充葡萄糖至0.7g·L-1。据此补料策略可将发酵过程的乙酸积累控制在6.26g·L-1以下;补料发酵12h后...
重组海藻糖合成酶工程菌的分批补料发酵中,用氨水调节培养液的pH为6.78~6.80,初糖耗尽后按培养液的pH从6.80起每升高0.01即开始补充葡萄糖至0.7g·L-1。据此补料策略可将发酵过程的乙酸积累控制在6.26g·L-1以下;补料发酵12h后,即获得细胞干重为51.5g·L-1的细胞高密度,细胞密度是分批培养的7.5倍;诱导后重组海藻糖合成酶表达率为15.2%,单位体积内的表达量是分批培养的4.5倍。
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关键词
海藻糖合成酶
高密度发酵
PH-STAT
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职称材料
海藻糖的酶转化法生产技术
被引量:
5
2
作者
韦航
马少敏
+1 位作者
张云光
梁树华
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第22期12016-12018,共3页
评述了海藻糖-6-磷酸合成酶和海藻糖-6-磷酸酯酶、海藻糖磷酸化酶、海藻糖合成酶和蔗糖磷酸化酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶、糖基转移酶和淀粉酶转化法、海藻糖合酶等酶转化法生产海藻糖的技术路线和特点,并展...
评述了海藻糖-6-磷酸合成酶和海藻糖-6-磷酸酯酶、海藻糖磷酸化酶、海藻糖合成酶和蔗糖磷酸化酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶、糖基转移酶和淀粉酶转化法、海藻糖合酶等酶转化法生产海藻糖的技术路线和特点,并展望了海藻糖合成酶转化法生产海藻糖的前景。
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关键词
海藻糖
酶转化
淀粉
海藻糖合酶
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职称材料
谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)海藻糖合成酶的定点突变及其酶学性质研究
3
作者
朱绮霞
陈发忠
+4 位作者
罗兆飞
韦宇拓
杜丽琴
王青艳
黄日波
《广西科学》
CAS
2012年第2期169-173,共5页
以已知晶体结构的Pseudomonas mesoacidophila MX-45菌株海藻酮糖合成酶(MutB)的晶体结构为模板,在SWISS-MODEL模建立谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)海藻糖合成酶的立体结构,并对初始结构作能量优化,通过氨基酸序列比对,选择...
以已知晶体结构的Pseudomonas mesoacidophila MX-45菌株海藻酮糖合成酶(MutB)的晶体结构为模板,在SWISS-MODEL模建立谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)海藻糖合成酶的立体结构,并对初始结构作能量优化,通过氨基酸序列比对,选择TreS-glu保守区内的氨基酸R245、D247、E289、F244和保守区外的氨基酸A288进行定点突变,并对突变酶F244C、F244L、F244W、F244Y、A288G、R245X、E289X、D247N、D247E进行纯化和酶学性质研究,比较突变子对酶活性和热稳定性的影响。结果表明,R245、E289突变为其它的19个氨基酸后酶活力全部丧失,D247E和D247N也丧失酶活,F244C、F244L、F244W、F244Y和A288G的比活力分别降低到TreS-glu的38%、24%、62%、64%和35%,A288突变成T288后没有酶活。与TreS-glu相比,F244C、F244W、A288G的Km值基本不变,F244L、F244Y对底物麦芽糖的亲和力降低,F244Y的最适反应温度和TreS-glu相同,均为27℃,而F244C、F244L、F244W和A288G的最适温度提高到32℃。与TreS-glu相比,突变酶的最适反应pH值均有所下降,其中F244C、F244Y和A288G的为7.5,比TreS-glu的8.0均下降了约0.5个单位,而F244L和F244W的为6.5,比TreS-glu的8.0均下降了近1.5个单位。与TreS-glu相比,突变酶的热稳定性均有不同程度提高,其中F244Y、F244W和A288G的Tm值比TreS-glu的提高约1℃,F244L提高约2℃,F244C提高了近4℃。
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关键词
海藻糖合成酶
谷氨酸棒杆菌
定点突变
酶学性质
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职称材料
题名
重组海藻糖合成酶工程菌的pH-stat高密度发酵工艺研究
被引量:
6
1
作者
蒙健宗
陈发忠
王青艳
黄日波
机构
广西大学生命科学与技术学院
南宁中诺生物工程有限责任公司
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第8期125-128,共4页
基金
国家"863"计划(AA214171)
文摘
重组海藻糖合成酶工程菌的分批补料发酵中,用氨水调节培养液的pH为6.78~6.80,初糖耗尽后按培养液的pH从6.80起每升高0.01即开始补充葡萄糖至0.7g·L-1。据此补料策略可将发酵过程的乙酸积累控制在6.26g·L-1以下;补料发酵12h后,即获得细胞干重为51.5g·L-1的细胞高密度,细胞密度是分批培养的7.5倍;诱导后重组海藻糖合成酶表达率为15.2%,单位体积内的表达量是分批培养的4.5倍。
关键词
海藻糖合成酶
高密度发酵
PH-STAT
Keywords
trehalose synthase
high cell -density fermentation
pH-stat
分类号
TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
海藻糖的酶转化法生产技术
被引量:
5
2
作者
韦航
马少敏
张云光
梁树华
机构
广西大学学报编辑部
南宁
发酵与酶
工程
技术研究
中
心
南宁中诺生物工程有限责任公司
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第22期12016-12018,共3页
文摘
评述了海藻糖-6-磷酸合成酶和海藻糖-6-磷酸酯酶、海藻糖磷酸化酶、海藻糖合成酶和蔗糖磷酸化酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶、糖基转移酶和淀粉酶转化法、海藻糖合酶等酶转化法生产海藻糖的技术路线和特点,并展望了海藻糖合成酶转化法生产海藻糖的前景。
关键词
海藻糖
酶转化
淀粉
海藻糖合酶
分类号
Q533 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)海藻糖合成酶的定点突变及其酶学性质研究
3
作者
朱绮霞
陈发忠
罗兆飞
韦宇拓
杜丽琴
王青艳
黄日波
机构
广西科学院国家非粮
生物
质能源
工程
技术研究
中
心
南宁中诺生物工程有限责任公司
广西大学生命科学与技术学院
出处
《广西科学》
CAS
2012年第2期169-173,共5页
文摘
以已知晶体结构的Pseudomonas mesoacidophila MX-45菌株海藻酮糖合成酶(MutB)的晶体结构为模板,在SWISS-MODEL模建立谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)海藻糖合成酶的立体结构,并对初始结构作能量优化,通过氨基酸序列比对,选择TreS-glu保守区内的氨基酸R245、D247、E289、F244和保守区外的氨基酸A288进行定点突变,并对突变酶F244C、F244L、F244W、F244Y、A288G、R245X、E289X、D247N、D247E进行纯化和酶学性质研究,比较突变子对酶活性和热稳定性的影响。结果表明,R245、E289突变为其它的19个氨基酸后酶活力全部丧失,D247E和D247N也丧失酶活,F244C、F244L、F244W、F244Y和A288G的比活力分别降低到TreS-glu的38%、24%、62%、64%和35%,A288突变成T288后没有酶活。与TreS-glu相比,F244C、F244W、A288G的Km值基本不变,F244L、F244Y对底物麦芽糖的亲和力降低,F244Y的最适反应温度和TreS-glu相同,均为27℃,而F244C、F244L、F244W和A288G的最适温度提高到32℃。与TreS-glu相比,突变酶的最适反应pH值均有所下降,其中F244C、F244Y和A288G的为7.5,比TreS-glu的8.0均下降了约0.5个单位,而F244L和F244W的为6.5,比TreS-glu的8.0均下降了近1.5个单位。与TreS-glu相比,突变酶的热稳定性均有不同程度提高,其中F244Y、F244W和A288G的Tm值比TreS-glu的提高约1℃,F244L提高约2℃,F244C提高了近4℃。
关键词
海藻糖合成酶
谷氨酸棒杆菌
定点突变
酶学性质
Keywords
trehalose synthase
Corynebacterium glutamicum
site-mutagenesis
enzyme properties
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组海藻糖合成酶工程菌的pH-stat高密度发酵工艺研究
蒙健宗
陈发忠
王青艳
黄日波
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2006
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
海藻糖的酶转化法生产技术
韦航
马少敏
张云光
梁树华
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)海藻糖合成酶的定点突变及其酶学性质研究
朱绮霞
陈发忠
罗兆飞
韦宇拓
杜丽琴
王青艳
黄日波
《广西科学》
CAS
2012
0
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