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沉默CTHRC1调控p53介导的线粒体凋亡诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡
被引量：
5
1
作者
曾健
蒋斌
+1 位作者
黄果
陈娟
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2020年第12期1833-1839,共7页
目的探究短发夹RNA(shRNA)干扰载体沉默胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法将shRNA-CTHRC1质粒和阴性对照质粒转染至乳腺癌MCF-7细胞,采用qPCR法和Westernblot法分别检测CTHRC1mRNA和蛋白表达水平;C...
目的探究短发夹RNA(shRNA)干扰载体沉默胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法将shRNA-CTHRC1质粒和阴性对照质粒转染至乳腺癌MCF-7细胞,采用qPCR法和Westernblot法分别检测CTHRC1mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法和流式细胞术法分别检测细胞增殖活力和凋亡率;线粒体膜电位试剂盒(JC-10染色法)检测细胞线粒体膜电位变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白caspase3、细胞色素C(CytC)以及p53介导的线粒体凋亡途径相关蛋白p53、Apaf-1、Cleaved-caspase9、Bcl-2、Bax和PUMA等表达水平。将shRNA-CTHRC1质粒和si-p53干扰质粒分别或同时转染至MCF-7细胞中,Westernblot法检测p53和CytC蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果沉默CTHRC1可降低MCF-7细胞中CTHRC1mRNA和蛋白表达水平,抑制细胞增殖活力,提高细胞凋亡率,降低线粒体膜电位,上调Cleaved-caspase3、p53、Apaf-1、Cleaved-caspase9、Bax、PUMA和胞质中CytC等蛋白表达水平,下调Bcl-2和线粒体中CytC蛋白表达水平。然而,干扰p53表达可逆转CTHRC1沉默对MCF-7细胞凋亡的促进作用。结论CTHRC1沉默通过激活p53介导的线粒体凋亡途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡。
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关键词
乳腺癌
胶原三螺旋重复蛋白1
p53
线粒体
细胞凋亡
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题名
沉默CTHRC1调控p53介导的线粒体凋亡诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡
被引量：
5
1
作者
曾健
蒋斌
黄果
陈娟
机构
南华大学附属第二医院烧伤整形科
南华大学
附属
第二
医院
乳甲外
科
南华大学
附属
第二
医院
放疗
科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2020年第12期1833-1839,共7页
基金
湖南省临床医疗技术创新引导计划(编号:2018SK51508)。
文摘
目的探究短发夹RNA(shRNA)干扰载体沉默胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法将shRNA-CTHRC1质粒和阴性对照质粒转染至乳腺癌MCF-7细胞,采用qPCR法和Westernblot法分别检测CTHRC1mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法和流式细胞术法分别检测细胞增殖活力和凋亡率;线粒体膜电位试剂盒(JC-10染色法)检测细胞线粒体膜电位变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白caspase3、细胞色素C(CytC)以及p53介导的线粒体凋亡途径相关蛋白p53、Apaf-1、Cleaved-caspase9、Bcl-2、Bax和PUMA等表达水平。将shRNA-CTHRC1质粒和si-p53干扰质粒分别或同时转染至MCF-7细胞中,Westernblot法检测p53和CytC蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果沉默CTHRC1可降低MCF-7细胞中CTHRC1mRNA和蛋白表达水平,抑制细胞增殖活力,提高细胞凋亡率,降低线粒体膜电位,上调Cleaved-caspase3、p53、Apaf-1、Cleaved-caspase9、Bax、PUMA和胞质中CytC等蛋白表达水平,下调Bcl-2和线粒体中CytC蛋白表达水平。然而,干扰p53表达可逆转CTHRC1沉默对MCF-7细胞凋亡的促进作用。结论CTHRC1沉默通过激活p53介导的线粒体凋亡途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡。
关键词
乳腺癌
胶原三螺旋重复蛋白1
p53
线粒体
细胞凋亡
Keywords
breast cancer
collagen triple helix repeat containing 1
p53
mitochondria
cell apoptosis
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
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1
沉默CTHRC1调控p53介导的线粒体凋亡诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡
曾健
蒋斌
黄果
陈娟
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2020
5
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