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IMP3基因沉默介导Notch信号通路对结直肠癌上皮间质转化及血管生成的影响 被引量：5
1
作者 肖忠盛 龙泓 +2 位作者 丁成明 肖友忠 刘丽兵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第14期1714-1719,共6页
目的:探究胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)基因沉默介导Notch信号通路对结直肠癌上皮间质转化(EMT)及血管生成的调控机制。方法:收集我院73例结直肠癌患者肿瘤切除术后癌组织及癌旁组织。免疫组化检测结直肠癌组织及癌旁组织中I... 目的:探究胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)基因沉默介导Notch信号通路对结直肠癌上皮间质转化(EMT)及血管生成的调控机制。方法:收集我院73例结直肠癌患者肿瘤切除术后癌组织及癌旁组织。免疫组化检测结直肠癌组织及癌旁组织中IMP3蛋白表达。将人结肠癌细胞系SW620细胞进行IMP3沉默或Notch通路抑制处理,设置阴性对照。Western blot检测处理后的细胞中Notch1、Hes1、Vimentin、E-cadherin、N-cadherin、VEGF、TNF-α和TGF-β蛋白表达。MTT比色法检测各组细胞活力。Transwell实验测定各组细胞侵袭能力。结果:免疫组化实验发现IMP3在癌组织中高表达。细胞实验表明IMP3沉默可下调Notch通路相关蛋白Notch1及Hes1表达。与阴性对照组相比,沉默IMP3或抑制Notch通路后,SW620细胞活力、转移能力、EMT管生成明显受到抑制(P<0.05)。细胞经沉默IMP3联合抑制Notch通路处理,对上述指标的抑制效果较单独处理(沉默IMP3或抑制Notch通路)更加显著(P<0.05)。结论:IMP3基因沉默能够抑制Notch通路活化进而抑制结直肠癌EMT及血管生成。 展开更多
关键词 IMP3 NOTCH信号通路 结直肠癌 上皮间质转化 血管生成
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术前采用mFOLFOX6方案化学治疗可切除的局部进展期直肠癌的安全性和有效性 被引量：11
2
作者 刘丽兵 蒋忠军 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期32-38,共7页
目的:新辅助化学治疗(以下简称化疗)联合根治性手术已成为治疗局部进展期直肠癌的主要手段,本研究旨在评价对可切除的局部进展期直肠癌患者应用mFOLFOX6方案化疗的安全性和有效性。方法:本研究为前瞻性研究。选择南华大学附属南华医院2... 目的:新辅助化学治疗(以下简称化疗)联合根治性手术已成为治疗局部进展期直肠癌的主要手段,本研究旨在评价对可切除的局部进展期直肠癌患者应用mFOLFOX6方案化疗的安全性和有效性。方法:本研究为前瞻性研究。选择南华大学附属南华医院2015年2月至2017年12月收治的82名局部进展期直肠癌患者作为研究对象。患者接受4疗程的mFOLFOX6方案化疗,化疗结束后的4~6周内行手术治疗。观察化疗相关不良反应发生率、术后并发症发生率及患者对化疗的临床病理反应。结果:在mFOLFOX6化疗后至术前,82例局部进展期直肠癌患者出现的化疗相关不良反应包括4级中性粒细胞减少(2.4%)、导管相关性感染(2.4%)、厌食(2.4%),3级恶心(2.4%)、厌食(2.4%),2级中性粒细胞减少(14.6%)、周围神经病变(7.3%)等。76例局部进展期直肠癌患者完成手术,其中直肠前切除术56例(73.7%)、腹会阴联合切除术16例(21.1%)、保留骨盆神经72例(94.7%)。22例(28.9%)患者发生手术并发症,其中8例(10.5%)发生≥3级的并发症,发生率较高的并发症为肠梗阻、吻合口漏及脓毒症。完成化疗和手术的76例患者中28例(36.8%)T分期下降,44例(57.9%)N分期下降。术后病理I期42例(55.3%)、IIA期20例(26.3%)、IIB期12例(15.8%)、IIIA期2例(2.6%)。10例在化疗前被怀疑肿瘤侵犯周围器官,其中4例经过化疗不再需要扩大切除周围器官并实现肿瘤的R0切除;2例化疗前T4b期患者行周围器官的扩大切除,术后病理结果为T3期,实现R0切除;1例在化疗前评估中被诊断为低分化腺癌并侵袭精囊的患者术后出现T分期进展。66例(86.8%)患者部分缓解(partial response,PR),9例(11.8%)疾病稳定(stable disease,SD),1例(1.3%)疾病进展(progressive disease,PD)。无1例获得完全缓解(complete response,CR),无1例出现新病灶。结论:术前采用mFOLFOX6方案化疗对于可切除的局部进展期直肠癌来说是一种安全可行的治疗策略,值得临床应用推广。 展开更多
关键词 MFOLFOX6 新辅助化学治疗 直肠癌 切除 降低分期
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慢病毒介导PDIA3过表达对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜屏障的影响及其机制 被引量：1
3
作者 黄靖 闫圣玉 +2 位作者 许志杰 刘婉莹 刘丽兵 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第11期1768-1773,共6页
目的探讨蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的保护作用及其可能机制。方法将60只C57BL/6小鼠随机分成正常对照组(Control组)、模型组(Model组)、空载慢病毒组(Lv-NC组)和PDIA3过表达慢病毒组(Lv-PDIA3组),每组15只。... 目的探讨蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的保护作用及其可能机制。方法将60只C57BL/6小鼠随机分成正常对照组(Control组)、模型组(Model组)、空载慢病毒组(Lv-NC组)和PDIA3过表达慢病毒组(Lv-PDIA3组),每组15只。采用连续7 d自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液建立UC小鼠模型,造模成功后开始注射慢病毒干预。慢病毒干预7 d后结束实验,对各组小鼠进行疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理学变化,ELISA法检测血清中炎症因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及肠黏膜屏障通透性标志物D-乳酸(D-Lac)、二胺氧化酶(DAO)含量,qRT-PCR检测结肠组织中PDIA3 mRNA水平,Western blot检测结肠组织中PDIA3、ZO-1、Occludin、Claudin-1、IκBα、p-NF-κB p65(Ser536)、NF-κB p65蛋白表达水平。结果与Control组比较,Model组小鼠结肠组织受损严重,DAI评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、D-Lac、DAO含量以及结肠组织中IκBα和p-NF-κB p65(Ser536)蛋白表达水平均升高,而ZO-1、Occludin和Claudin-1等蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);与Model组比较,Lv-PDIA3组小鼠结肠组织受损程度减轻,DAI评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、D-Lac、DAO含量以及结肠组织中IκBα和p-NF-κB p65(Ser536)蛋白表达水平降低,同时ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.01),而Lv-NC组差异无统计学意义。结论过表达PDIA3能明显改善UC小鼠肠黏膜屏障功能,其机制可能与抑制NF-κB信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 蛋白质二硫键异构酶A3 溃疡性结肠炎 肠黏膜屏障 NF-ΚB信号通路
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抗菌肽LL-37对结肠癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其机制 被引量：2
4
作者 闫圣玉 谢亚锋 +5 位作者 许志杰 刘英 丁雅婷 张侨 刘菀莹 刘丽兵 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期575-581,共7页
目的:探讨抗菌肽LL-37对结肠癌小鼠肿瘤生长和细胞凋亡的影响,阐明其抗肿瘤作用的可能分子机制。方法:构建LL-37过表达结肠癌HT-29细胞,采用qRT-PCR和Western blotting法检测HT-29细胞中LL-37 mRNA和蛋白表达水平。30只BALB/c小鼠随机... 目的:探讨抗菌肽LL-37对结肠癌小鼠肿瘤生长和细胞凋亡的影响,阐明其抗肿瘤作用的可能分子机制。方法:构建LL-37过表达结肠癌HT-29细胞,采用qRT-PCR和Western blotting法检测HT-29细胞中LL-37 mRNA和蛋白表达水平。30只BALB/c小鼠随机分为对照组(给予未经感染的HT-29细胞)、空载组(给予感染空载质粒的HT-29细胞)、LL-37过表达组(给予感染LL-37过表达载体的HT-29细胞)、AMPK抑制剂组[给予感染空载体的HT-29细胞后,立刻尾静脉注射2 mg·kg-1(Dorsomorphin,Dor)]和联合组(给予感染LL-37过表达载体的HT-29细胞后,立刻尾静脉注射2 mg·kg-1 Dor),每组6只。采用结肠癌HT-29细胞复制结肠癌小鼠模型,观察各组小鼠肿瘤体积并绘制生长曲线,感染24 d后剥离肿瘤测量质量并计算抑瘤率,TUNEL染色检测各组小鼠肿瘤细胞凋亡情况,Western blotting法检测各组小鼠肿瘤组织中自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ及AMPK/mTOR通路相关蛋白AMPK、p-AMPK、mTOR及p-mTOR表达水平。结果:与对照组和空载组比较,LL-37过表达组小鼠结肠癌HT-29细胞中LL-37 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01),肿瘤质量和体积明显降低(P<0.05),抑瘤率升高(P<0.05),肿瘤细胞凋亡数减少,肿瘤组织中自噬相关蛋白Beclin1和Atg5表达水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及p-AMPK/AMPK比值均明显升高(P<0.05),p-mTOR/mTOR比值明显降低(P<0.05);与空载组比较,AMPK抑制剂组小鼠肿瘤质量和体积明显升高(P<0.05)、抑瘤率降低(P<0.05),肿瘤细胞凋亡数减少,自噬相关蛋白Beclin1和Atg5表达水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及p-AMPK/AMPK比值明显降低(P<0.05),p-mTOR/mTOR比值明显升高(P<0.05);与LL-37过表达组比较,联合组小鼠肿瘤组织中Beclin1和Atg5表达水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及p-AMPK/AMPK比值明显降低(P<0.05或P<0.01),p-mTOR/mTOR比值明显升高(P<0.01)。结论:抗菌肽LL-37能激活AMPK/mTOR信号通路促进细胞自噬,进而抑制结肠癌HT-29荷瘤小鼠的肿瘤生长。 展开更多
关键词 抗菌肽LL-37 AMPK/mTOR信号通路 自噬 结肠肿瘤
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抗菌肽LL-37通过激活AMPK介导的自噬对结肠癌HT-29细胞凋亡的研究 被引量：1
5
作者 谢亚锋 许志杰 +4 位作者 丁雅婷 闫圣玉 张侨 刘菀莹 刘丽兵 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第12期1845-1849,共5页
目的探讨抗菌肽LL-37对结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其分子机制。方法以结肠癌HT-29细胞作为研究对象,加入不同浓度(50、100、200μg/ml)的抗菌肽LL-37或联合AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂多索吗啡(10μmol/L)处理48h后,采用流式细胞... 目的探讨抗菌肽LL-37对结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及其分子机制。方法以结肠癌HT-29细胞作为研究对象,加入不同浓度(50、100、200μg/ml)的抗菌肽LL-37或联合AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂多索吗啡(10μmol/L)处理48h后,采用流式细胞术检测HT-29细胞凋亡率,Westernblot实验检测HT-29细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)、自噬相关蛋白(Beclin1、Atg5、LC3I和LC3II)和AMPK蛋白的表达。结果高浓度抗菌肽LL-37能促进结肠癌HT-29细胞凋亡(P<0.05),并上调自噬相关蛋白Bec-lin1、Atg5表达水平以及提高LC3II/LC3I值(P<0.05),并且伴随着AMPK异常激活(P<0.01);AMPK抑制剂联合干预能逆转抗菌肽LL-37对HT-29细胞的作用效果。结论抗菌肽LL-37通过激活AMPK介导的自噬促进结肠癌HT-29细胞的凋亡。 展开更多
关键词 结肠癌HT-29细胞 AMPK 抗菌肽LL-37 细胞自噬 细胞凋亡
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miR-142-3p通过靶向CD_(133)抑制鼻咽癌细胞和鼻咽癌干细胞生长的效果研究 被引量：3
6
作者 汤国辉 张志伟 +3 位作者 黄卫国 谢运杰 刑佼涛 贺修胜 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第17期2085-2088,2094,共5页
目的明确miR-142-3p能否通过靶向CD_(133)的表达进而抑制鼻咽癌细胞增殖和侵袭能力,探讨miR-142-3p在抑制肿瘤生长中的分子机制。方法于2015年7月—2016年9月,构建CD_(133)mRNA 3'-UTR荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统观察miR... 目的明确miR-142-3p能否通过靶向CD_(133)的表达进而抑制鼻咽癌细胞增殖和侵袭能力,探讨miR-142-3p在抑制肿瘤生长中的分子机制。方法于2015年7月—2016年9月,构建CD_(133)mRNA 3'-UTR荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统观察miR-142-3p对CD_(133)mRNA 3'-UTR荧光素酶活性的影响。将对照control、CD_(133)siRNA及miR-142-3p模拟物各40μmol/L分别转染至鼻咽癌CNE2细胞,采用Western blotting法检测其对CD_(133)表达水平的影响;设立阴性对照组[瞬时转染对照control(40μmol/L)]、阳性对照组[瞬时转染CD_(133)siRNA(40μmol/L)]、miR-142-3p组[瞬时转染miR-142-3p模拟物(40μmol/L)]、联合组[瞬时共转染miR-142-3p模拟物(40μmol/L)和pc DNA3.1(+)-CD_(133)0.8μg],MTS法检测4组对CNE2细胞增殖活性的影响,Transwell法检测4组对CNE2细胞侵袭能力的影响,干细胞成球实验检测阴性对照组和miR-142-3p组对CNE2干细胞成球能力的影响。结果单光子荧光素酶活性检测结果显示,无miR-142-3p转染的p CD_(133)-Wt型细胞荧光素酶活性为(0.924±0.107),miR-142-3p转染的p CD_(133)-Wt型细胞荧光素酶活性为(0.535±0.035),两者比较,差异有统计学意义(t=7.924,P=0.022)。Western blotting法检测结果显示,阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组CD_(133)表达水平比较,差异有统计学意义(F=12.44,P<0.05);其中阳性对照组和miR-142-3p组CD_(133)表达水平低于阴性对照组(P<0.05)。阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组、联合组CNE2细胞数量比较,差异有统计学意义(F=16.78,P<0.05);其中阳性对照组和miR-142-3p组CNE2细胞数量低于阴性对照组(P<0.05)。Transwell侵袭实验检测结果显示,阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组、联合组穿过基质胶的CNE2细胞数量比较,差异有统计学意义(F=13.19,P<0.05);其中阳性对照组和miR-142-3p组穿过基质胶的CNE2细胞数量低于阴性对照组(P<0.05)。阴性对照组和miR-142-3p组干细胞成球数量比较,差异有统计学意义(t=14.92,P<0.05)。结论 miR-142-3p通过靶向调控CD_(133)的表达而抑制鼻咽癌细胞增殖、侵袭及干细胞球的形成。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 肿瘤干细胞 细胞增殖 细胞侵袭
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