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人NKG2D真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的瞬时表达
被引量：
3
1
作者
刘映霞
胡国龄
+3 位作者
刘敏
谭德明
沙新平
何淑雅
《湖南医科大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第6期579-582,共4页
目的 :构建人NKG2D重组真核表达载体 ,并研究其在COS 7细胞中的表达。方法 :应用RT PCR ,自健康人外周血单个核细胞 (PBMC)中获取NKG2DcDNA ,应用基因重组技术构建含目的基因的T载体克隆后 ,构建含目的基因的真核细胞表达质粒 ,并经酶...
目的 :构建人NKG2D重组真核表达载体 ,并研究其在COS 7细胞中的表达。方法 :应用RT PCR ,自健康人外周血单个核细胞 (PBMC)中获取NKG2DcDNA ,应用基因重组技术构建含目的基因的T载体克隆后 ,构建含目的基因的真核细胞表达质粒 ,并经酶切和测序证实。然后应用脂质体介导将重组真核表达质粒转染COS 7细胞 ,用RT PCR和流式细胞术 (FCM)检测转染细胞NKG2D表达。结果 :重组真核表达载体中插入片段序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。NKG2D在COS 7细胞中获得表达。结论 :成功地构建了重组表达载体pcD NA3.1 NKG2D ,并实现了在COS 7细胞中的瞬时表达 ,为研究NKG2D的生物学活性奠定了基础。
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关键词
基因克隆
COS-7细胞
基因表达
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职称材料
题名
人NKG2D真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的瞬时表达
被引量：
3
1
作者
刘映霞
胡国龄
刘敏
谭德明
沙新平
何淑雅
机构
中南
大学
湘雅
医院
传染病研究所
南华大学附一医院神经外科
南华大学
分子生物中心
出处
《湖南医科大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第6期579-582,共4页
基金
湖南省自然科学基金 ( 0 2JJY2 0 2 7)
湖南省卫生厅基金 (Y0 2 0 73 )
文摘
目的 :构建人NKG2D重组真核表达载体 ,并研究其在COS 7细胞中的表达。方法 :应用RT PCR ,自健康人外周血单个核细胞 (PBMC)中获取NKG2DcDNA ,应用基因重组技术构建含目的基因的T载体克隆后 ,构建含目的基因的真核细胞表达质粒 ,并经酶切和测序证实。然后应用脂质体介导将重组真核表达质粒转染COS 7细胞 ,用RT PCR和流式细胞术 (FCM)检测转染细胞NKG2D表达。结果 :重组真核表达载体中插入片段序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。NKG2D在COS 7细胞中获得表达。结论 :成功地构建了重组表达载体pcD NA3.1 NKG2D ,并实现了在COS 7细胞中的瞬时表达 ,为研究NKG2D的生物学活性奠定了基础。
关键词
基因克隆
COS-7细胞
基因表达
Keywords
gene clone
gene expression
COS-7 cell
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
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被引量
操作
1
人NKG2D真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的瞬时表达
刘映霞
胡国龄
刘敏
谭德明
沙新平
何淑雅
《湖南医科大学学报》
CSCD
北大核心
2003
3
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