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Rab18通过JAK2/STAT3下调PLIN2并减少THP-1巨噬细胞脂质蓄积 被引量:4
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作者 杨丽 蒋思怦 +3 位作者 张荣 郭东铭 张星星 袁中华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期769-778,共10页
目的:研究Rab18是否通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路下调脂滴包被蛋白2(PLIN2)表达,并影响人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。方法:采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育人THP-1巨噬细胞不同时间(0、6、12和24 h),用W... 目的:研究Rab18是否通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路下调脂滴包被蛋白2(PLIN2)表达,并影响人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。方法:采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育人THP-1巨噬细胞不同时间(0、6、12和24 h),用Westernblot检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,使用油红O染色法观察细胞内脂质蓄积的变化。制备野生型、活化型和失活型Rab18巨噬细胞,予以ox-LDL孵育,Westernblot和RT-qPCR检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞内p-JAK2和p-STAT3的核转位情况。用JAK2抑制剂AG490预处理活化型Rab18细胞,再用ox-LDL孵育该细胞,Westernblot和RT-qPCR检测JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞中PLIN2的表达,油红O染色和GPO-PAP酶法观察细胞内脂质蓄积情况及甘油三酯(TG)含量。结果:ox-LDL处理24 h后,Rab18、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及PLIN2蛋白水平显著升高(P<0.05),脂质蓄积增加。活化型和野生型Rab18上调JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3水平(P<0.05),下调PLIN2蛋白表达(P<0.05),细胞脂质蓄积及TG含量减少;免疫荧光显示Rab18与JAK2和STAT3存在共定位关系,活化型Rab18上调p-JAK2和p-STAT3水平,促进p-STAT3核移位;JAK2抑制剂AG490处理后,PLIN2表达及TG含量显著增加(P<0.05),细胞脂质蓄积增加。结论:Rab18通过JAK2/STAT3信号通路减少PLIN2表达,并抑制人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。 展开更多
关键词 Rab18蛋白 JANUS激酶2 信号转导及转录激活因子3 脂滴包被蛋白2 脂质蓄积 动脉粥样硬化
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