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Sp1和Egr-1对LCRG1基因启动子转录活性的调节研究 被引量:4
1
作者 谢海龙 曾龙武 周晓军 《医学研究生学报》 CAS 2009年第4期343-346,共4页
目的:目前LCRG1基因转录调控机制不清,现拟研究Sp1和Egr-1对人LCRG1基因启动子的转录调节。方法:利用MatInspector软件分析LCRG1基因启动子区域内潜在的转录因子结合位点,Sp1、wtEgr-1、mtEgr-1真核表达质粒与LCRG1启动子重组质粒的共... 目的:目前LCRG1基因转录调控机制不清,现拟研究Sp1和Egr-1对人LCRG1基因启动子的转录调节。方法:利用MatInspector软件分析LCRG1基因启动子区域内潜在的转录因子结合位点,Sp1、wtEgr-1、mtEgr-1真核表达质粒与LCRG1启动子重组质粒的共转染实验,分析其对LCRG1启动子活性的影响。结果:生物信息学提示LCRG1基因启动子区域存在Sp1和Egr-1等位点,外源性突变型转录因子Egr-1能上调LCRG1基因启动子的活性。结论:突变型转录因子Egr-1可能参与该基因的表达调控。 展开更多
关键词 LCRG1 喉癌 启动子
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人canstatin cDNA分泌型真核表达载体的表达及生物学作用研究 被引量:2
2
作者 胡丽 朱建思 王成昆 《中国实用医药》 2007年第15期4-8,共5页
目的将人canstatin cDNA分泌型真核表达载体pSecTag2B/canstatin稳定转染中国仓鼠卵巢(CHO-K1)细胞并获得稳定表达canstatin蛋白产物的细胞株。再进一步研究表达产物的生物学作用。方法将人canstatin cDNA的重组1质粒pSecTag2B/canstati... 目的将人canstatin cDNA分泌型真核表达载体pSecTag2B/canstatin稳定转染中国仓鼠卵巢(CHO-K1)细胞并获得稳定表达canstatin蛋白产物的细胞株。再进一步研究表达产物的生物学作用。方法将人canstatin cDNA的重组1质粒pSecTag2B/canstatin稳定转染CHO-K1细胞,应用RT-PCR、western-blotting法检测表达产物,再用多种方法进一步研究canstatin的生物学作用。结果成功的将pSecTag2B/canstatin稳定转染CHO-K1细胞并鉴定出上清液中有目的蛋白的表达。该细胞培养上清液能抑制鸡胚绒毛尿囊膜中微血管的生成,抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC-12)的生长并诱导其凋亡。结论①成功的将pSecTag2B/canstatin稳定转染CHO-K1细胞并获得能稳定表达can-statin蛋白产物的细胞株;②证实含canstatin蛋白产物的细胞培养上清液具有抑制鸡胚绒毛尿囊膜微血管生成的活性并可在体外抑制HUVEC-12的生长和诱导其凋亡。 展开更多
关键词 稳定转染 脂质体 鸡胚绒毛尿囊膜实验 生长曲线 流式细胞学技术
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Avellino型角膜营养不良的研究进展 被引量:3
3
作者 谭俊凯 王芝 +1 位作者 刘旭阳 张志伟 《国际眼科杂志》 CAS 2017年第8期1461-1464,共4页
Avellino型角膜营养不良(Avellino corneal dystrophy,ACD)是一种常染色体显性眼异常疾病,其病因是位于第5号人类染色体上的转化生长因子β诱导基因(transforming growth factor-beta induced gene,TGFBI)存在R124H突变最终导致异常TGFB... Avellino型角膜营养不良(Avellino corneal dystrophy,ACD)是一种常染色体显性眼异常疾病,其病因是位于第5号人类染色体上的转化生长因子β诱导基因(transforming growth factor-beta induced gene,TGFBI)存在R124H突变最终导致异常TGFBI蛋白沉积于角膜组织,而由突变导致异常蛋白质沉积的潜在分子机制目前尚不清楚。近年来,随着人类遗传学、眼病的分子生物学的快速发展和研究技术的不断提高,人们对Avellino型角膜营养不良的发病基础和可能的发病机制有了更多的认识,而尝试组织该疾病发病机制方面的有关研究成果,理解TGFBI和与之相互作用蛋白Periostin在该疾病中所扮演的作用将有助于后续的相关研究。 展开更多
关键词 TGFBI PERIOSTIN Avellino型角膜营养不良 基因 相互作用
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DNA甲基化调控的MicroRNA在乳腺癌中的研究进展
4
作者 邓南星 《分子影像学杂志》 2014年第3期190-192,共3页
微小核糖核酸(mi RNA)是一类内源性非编码小RNA,长约18~25个核苷酸,其通过与特定靶m RNA结合来抑制m RNA翻译过程,从而在转录后水平调节靶基因的表达水平,与恶性肿瘤的发生、发展、侵袭以及转移密切相关。前期大量研究发现,DNA甲基化可... 微小核糖核酸(mi RNA)是一类内源性非编码小RNA,长约18~25个核苷酸,其通过与特定靶m RNA结合来抑制m RNA翻译过程,从而在转录后水平调节靶基因的表达水平,与恶性肿瘤的发生、发展、侵袭以及转移密切相关。前期大量研究发现,DNA甲基化可能是调控乳腺癌中mi RNA表达异常的机制,包括癌基因mi RNA低甲基化激活和抑癌基因mi RNA高甲基化失活,从而导致mi RNA调控的下游靶基因表达异常,参与乳腺癌的发生发展。因此,本文主要就DNA甲基化调控的mi RNA在乳腺癌中的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 MICRO RNA DNA甲基化 乳腺癌
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miR-1264对喉癌Hep2细胞增殖和迁移的影响 被引量:8
5
作者 侯素平 赵娟霞 +3 位作者 杨丽娟 王林娜 孙晓玲 谢海龙 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第3期273-278,共6页
目的 miR-1264在喉癌中表达下调。文中旨在研究miR-1264对喉癌Hep2细胞生物学功能的影响及是否参与下调LCRG1基因的表达。方法 Real-time quantitative PCR检测miR-1264在人喉癌组织中的表达情况;将转染mimic/inhibitor NC Hep2细胞设... 目的 miR-1264在喉癌中表达下调。文中旨在研究miR-1264对喉癌Hep2细胞生物学功能的影响及是否参与下调LCRG1基因的表达。方法 Real-time quantitative PCR检测miR-1264在人喉癌组织中的表达情况;将转染mimic/inhibitor NC Hep2细胞设为对照组,将未转染Hep2细胞设为空白组,将转染miR-1264 mimic/inhibitor设为实验组。利用MTT、Transwell分别观察miR-1264对Hep2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;luciferase实验验证miR-1264和LCRG1 3'UTR的结合;RT-PCR、Western blot分别检测miR-1264、LCRG1蛋白表达。结果与对照组和空白组相比,Hep2细胞瞬转miR-1264mimic后,活细胞数量明显增加,增殖能力显著增强(P<0.05);而瞬转miR-1264 inhibitor后,活细胞数量明显降低,增殖能力减弱(P<0.05)。与对照组[(80.80±1.07)个]及空白组[(73.60±1.44)个]迁移细胞数量相比,实验组[(97.00±1.41)个]明显增加(P<0.05),迁移能力亦显著增强(P<0.05);与对照组[(80.00±1.11)个]及空白组[(73.60±1.44)个]迁移细胞数量相比,miR-1264 inhibitor组[(71.40±1.21)个]明显降低(P<0.05),迁移能力亦减弱(P<0.05)。与对照组[(43.00±1.41)个]和空白组[(50.60±1.03)个]侵袭细胞数量相比,实验组[(57.00±1.00)个]明显增加(P<0.05),侵袭能力亦显著增强(P<0.05);与对照组[(61.20±1.50)个]和空白组[(50.60±1.03)个]侵袭细胞数量相比,实验组[(27.60±0.93)个]明显降低,侵袭能力受到显著抑制(P<0.05),利用RT-PCR验证瞬转成功后,进一步应用Western blot实验检测LCRG1蛋白表达结果,显示:实验组LCRG1蛋白表达较NC对照组和空白组均无明显差异(P>0.05)。结论 miR-1264在喉癌组织中高表达,miR-1264可能不参与LCRG1蛋白的表达下调,但能增强Hep2细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 miR-1264 LCRG1 Hep2细胞 喉癌
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胃癌组织中CD_(147)和整合素α3的表达变化及意义 被引量:6
6
作者 陈涛 谢黎明 周秀田 《山东医药》 CAS 2013年第27期33-34,共2页
目的观察CD147和整合素α3在胃癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组织化学SP法检测40份正常胃黏膜组织及126例胃癌组织中CD147、整合素α3的表达,并分析两者之间及其与胃癌临床病理参数的相关性。结果 CD147和整合素α3在... 目的观察CD147和整合素α3在胃癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组织化学SP法检测40份正常胃黏膜组织及126例胃癌组织中CD147、整合素α3的表达,并分析两者之间及其与胃癌临床病理参数的相关性。结果 CD147和整合素α3在胃癌组织组中的阳性表达率均显著高于正常胃黏膜(P均<0.05);在有淋巴结转移胃癌者中明显高于无淋巴结转移者,在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者中明显高于Ⅰ~Ⅱ期者(P均<0.05),但与胃癌患者的年龄、性别及组织学类型均无明显相关性(P均>0.05);CD147与整合素α3的表达呈显著正相关(r=0.667,P<0.05)。结论胃癌组织中CD147和整合素α3表达升高,两者可能协同参与胃癌的发生和侵袭、转移,有望成为评估胃癌侵袭、转移能力的新指标及胃癌靶向治疗的新型分子靶点。 展开更多
关键词 胃肿瘤 胃癌 CD147 整合素Α3
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6,8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白杨素抑制人肝癌裸鼠移植瘤生长 被引量:5
7
作者 谭翔文 夏红 +1 位作者 许金华 曹建国 《中国医药导报》 CAS 2011年第32期5-6,25,F0003,共4页
目的:研究6,8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白杨素(dFMAChR)对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:建立人肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为6组,生理盐水(0.1 ml/10 g)组、氟尿嘧啶(5-Fu,20 mg/kg)组、白杨素(100 mg/kg)组、低剂量dFM... 目的:研究6,8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白杨素(dFMAChR)对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:建立人肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为6组,生理盐水(0.1 ml/10 g)组、氟尿嘧啶(5-Fu,20 mg/kg)组、白杨素(100 mg/kg)组、低剂量dFMAChR(20 mg/kg)组、中剂量dFMAChR(40 mg/kg)组和高剂量dFMAChR(80 mg/kg)组。测定移植瘤大小和重量;HE染色,光镜下观察移植瘤组织形态学特征;TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡作用。结果:20、40、80 mg/kg dFMAChR诱导的移植瘤的瘤重抑制率分别为40.17%、47.41%和66.81%。HE染色与TUNEL法检测结果表明,dFMAChR能明显诱导移植瘤细胞凋亡。结论:dFMAChR具有抗人肝癌治疗作用。 展开更多
关键词 肝癌 白杨素 6 8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白杨素 移植瘤
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七氟醚对人胃癌细胞株MGC-803黏附能力及miR-34a表达的影响 被引量:2
8
作者 李超 曾希 +2 位作者 胡啸 旷昕 刘文捷 《山东医药》 CAS 2014年第23期40-42,共3页
目的观察不同浓度七氟醚对人胃癌细胞株MGC-803黏附能力、miR-34a表达的影响。方法人胃癌MGC-803细胞随机分为4组:对照组、3.4%七氟醚组(Treat1组)、6.8%七氟醚组(Treat2组)和13.6%七氟醚组(Treat3组)。对照组通入95%O2-2.5%CO2混合气体... 目的观察不同浓度七氟醚对人胃癌细胞株MGC-803黏附能力、miR-34a表达的影响。方法人胃癌MGC-803细胞随机分为4组:对照组、3.4%七氟醚组(Treat1组)、6.8%七氟醚组(Treat2组)和13.6%七氟醚组(Treat3组)。对照组通入95%O2-2.5%CO2混合气体6 L/min,后3组在此基础上分别通入3.4%、6.8%、13.6%七氟醚,4组处理2、4和6 h时分别进行检测。细胞黏附实验检测各组MGC-803细胞黏附能力;qRT-PCR法检测miR-34a。结果与处理前相比,Treat1组、Treat2组和Treat3组处理2、4和6 h时细胞黏附率均降低,miR-34a表达均上调(P均<0.05);且4组间比较,P均<0.05。结论七氟醚可降低人胃癌细胞株MGC-803的黏附能力,且呈浓度和时间依赖性,其机制可能与上调miR-34a的表达有关。 展开更多
关键词 麻醉药 七氟醚 细胞黏附
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MIF和MMP-2在宫颈癌中的表达及临床意义 被引量:6
9
作者 谭琛 罗招阳 《中国实用医药》 2010年第27期35-36,共2页
目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在宫颈癌的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测68例宫颈癌组织、24例宫颈上皮内瘤病变(CIN)组织和21例正常宫颈组织(对照组)中MIF及MMP-2的表达,并对宫颈癌组织MIF与... 目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在宫颈癌的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测68例宫颈癌组织、24例宫颈上皮内瘤病变(CIN)组织和21例正常宫颈组织(对照组)中MIF及MMP-2的表达,并对宫颈癌组织MIF与MMP-2表达进行相关性分析。结果宫颈癌组MIF和MMP-2阳性表达率显著高于CIN组和对照组;宫颈癌组不同临床分期、组织分化、有无淋巴结转移之间比较,MIF和MMP-2的阳性表达率均有显著性差异(P<0.05),且二者表达强度呈显著正相关(r=0.82,P<0.05)。结论 MIF和MMP-2过表达可能与宫颈癌的发生、发展有关,二者联合检测可作为评估宫颈癌恶性程度、判断预后及指导治疗的重要参考指标。 展开更多
关键词 宫颈癌 巨噬细胞移动抑制因子 基质金属蛋白酶-2 免疫组织化学
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STGC3基因突变载体的构建及其在CNE2细胞中的表达 被引量:1
10
作者 李素云 刘慧晴 +2 位作者 刘芳 周小兵 贺修胜 《解剖学杂志》 CAS 2019年第5期453-457,共5页
目的:构建STGC3基因单碱基位点突变载体并观察CNE2细胞中STGC3蛋白表达情况,为探讨STGC3基因发挥抑瘤作用的功能性位点提供前期基础。方法:针对STGC3基因糖基化、蛋白激酶C磷酸化、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化3个(656C、725C、913T)可能性功能位... 目的:构建STGC3基因单碱基位点突变载体并观察CNE2细胞中STGC3蛋白表达情况,为探讨STGC3基因发挥抑瘤作用的功能性位点提供前期基础。方法:针对STGC3基因糖基化、蛋白激酶C磷酸化、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化3个(656C、725C、913T)可能性功能位点,运用Stratagene定点突变技术,对STGC3基因656C、725C、913T位点分别进行单碱基定点突变,使656C突变为G,725C突变为T,913T突变为G,构建突变表达质粒,同时构建野生型质粒为对照。质粒经转化、抽提、酶切及测序鉴定。将重组真核表达质粒,用脂质体转染至鼻咽癌CNE2细胞系,经G418筛选,得到稳定表达STGC3基因3种突变型CNE2细胞系。实验设6组,即空白对照组(Negative control)、空载体组(Vector)、野生型组(His-STGC3)和3个STGC3基因突变型组(His-STGC3-C656G、His-STGC3-C725T、His-STGC3-T913G)。运用RT-PCR、免疫印迹及免疫细胞化学,观察重组质粒突变型STGC3基因是否正常表达。结果:突变质粒经酶切和测序鉴定,酶切结果显示目的片段大小一致,测序结果显示突变序列正确,成功构建带His标签的3个突变型(His-STGC3-C656G、His-STGC3-C725T、His-STGC3-T913G)重组真核表达质粒。RT-PCR、免疫印迹和免疫细胞化学结果显示,突变质粒均正常表达His-tag-STGC3基因及融合蛋白质,融合蛋白定位于细胞质和细胞核。结论:成功构建STGC3基因单碱基位点突变质粒,并在CNE2细胞中表达STGC3融合蛋白。 展开更多
关键词 STGC3基因 质粒 突变
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HIF-1α、VEGF-C及D2-40在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 被引量:1
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作者 吴勇军 唐仪 +5 位作者 李振丰 张漾 伍镇江 李筝 赵毅 苏琦 《中国医学工程》 2011年第6期11-14,共4页
目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)HIF-1α、VEGF-C、D2-40表达及其相关性与临床病理意义。方法应用免疫组化SP法检测62例PTC组织中HIF-1α、VEGF-C、D2-40的表达,计数淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)... 目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)HIF-1α、VEGF-C、D2-40表达及其相关性与临床病理意义。方法应用免疫组化SP法检测62例PTC组织中HIF-1α、VEGF-C、D2-40的表达,计数淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD),结合临床资料进行分析。结果 PTC组织内存在HIF-1α、VEGF-C的表达,与癌旁组织及腺瘤比较有显著性差异(P<0.05),淋巴结转移组表达率高于无淋巴结转移组,高分期组(Ⅲ期/Ⅳ期)瘤内HIF-1α、VEGF-C较低分期组(Ⅰ期/Ⅱ期)为高,两组比较有统计学差异(P<0.05)。HIF-1α表达与VEGF-C表达呈正相关(r=0.555,P<0.05)。PTC瘤周LVD较瘤内为高;瘤周LVD与临床病理特征有关,高分期组(Ⅲ期/Ⅳ期)的瘤周LVD较低分期组(Ⅰ期/Ⅱ期)为高,淋巴结转移组较无转移组为高,两组比较有统计学差异(P<0.05)。HIF-1α、VEGF-C表达与LVD成正相关(P<0.05)。结论 HIF-1α、VEGF-C在PTC癌组织中表达上调,二者表达呈正相关,与LVD也呈正相关,其异常表达参与了PTC的发生、发展,联合检测上述指标可能为甲状腺癌诊断、治疗、预后判断提供有力的临床指导。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 HIF-1Α 血管内皮生长因子C 淋巴管密度 免疫组织化学
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转染miR-101类似物后卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性的变化及其机制
12
作者 胡可可 刘小敏 +1 位作者 宋泓 于渊毅 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第35期13-16,共4页
目的观察转染miR-101类似物后卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性变化,并探讨其机制。方法培养卵巢癌SKOV3细胞,将SKOV3细胞分为观察组、对照组、单药组,三组均经0、6.25、25、100、400、1 600 ng/m L紫杉醇处理,观察组转染miR-101类似物,对照... 目的观察转染miR-101类似物后卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性变化,并探讨其机制。方法培养卵巢癌SKOV3细胞,将SKOV3细胞分为观察组、对照组、单药组,三组均经0、6.25、25、100、400、1 600 ng/m L紫杉醇处理,观察组转染miR-101类似物,对照组转染无关序列,单药组不转染任何序列,MTT法观察各组细胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI法测算各组细胞凋亡率。采用Western blotting法检测25 ng/m L紫杉醇注射液作用的观察组、对照组、单药组细胞DNMT3A蛋白。结果 0、6.25、25、100、400、1 600 ng/m L紫杉醇注射液作用的观察组细胞OD值分别为0.632±0.014、0.554±0.012、0.503±0.015、0.428±0.011、0.346±0.006、0.301±0.007,单药组分别为0.718±0.013、0.687±0.015、0.619±0.011、0.554±0.009、0.473±0.008、0.420±0.011,对照组分别为0.713±0.016、0.671±0.011、0.626±0.010、0.549±0.008、0.467±0.010、0.412±0.008,观察组与对照组相比,P均<0.05。0、6.25、25、100、400、1 600 ng/m L紫杉醇注射液作用的观察组细胞凋亡率分别为9.63%±0.38%、14.71%±0.64%、21.27%±0.79%、27.05%±0.92%、31.82%±1.07%、35.51%±1.63%,单药组分别为3.61%±0.24%、6.18%±0.48%、9.57%±0.42%、15.64%±0.75%、18.79%±1.12%、22.05%±1.34%,对照组分别为3.74%±0.29%、6.02%±0.35%、10.63%±0.58%、15.21%±0.84%、19.37%±1.26%、23.30%±1.18%,观察组与对照组相比,P均<0.05。观察组、对照组、单药组细胞中DNMT3A蛋白相对表达量分别为0.427±0.068、0.961±0.107,0.947±0.113,三组比较,P<0.05。结论转染miR-101类似物后卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性增强,miR-101可能通过靶向调控DNMT3A诱导卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 微小RNA-101类似物 卵巢癌细胞 甲基化转移酶3A 紫杉醇 药物敏感性
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EGCG诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡及钙稳态失衡对其的影响
13
作者 邹少娜 林敏 +2 位作者 陈波 伍石华 罗招阳 《山东医药》 CAS 2012年第7期4-6,9,共4页
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胃癌BGC-823细胞的促凋亡作用及钙稳态失衡对该作用的影响。方法对体外培养的BGC-823细胞采用EGCG干预。采用MTT比色法检测细胞活性;光镜、倒置显微镜观察细胞形态变化;DNA琼脂糖凝胶电泳检... 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胃癌BGC-823细胞的促凋亡作用及钙稳态失衡对该作用的影响。方法对体外培养的BGC-823细胞采用EGCG干预。采用MTT比色法检测细胞活性;光镜、倒置显微镜观察细胞形态变化;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况;流式细胞光度仪分析细胞内游离钙水平。结果 EGCG作用后BGC-823细胞核染色质固缩,核碎裂,凋亡细胞率明显升高,呈时间和剂量依赖性。EGCG作用24 h后BGC-823细胞DNA凝胶电泳出现典型梯形条带;细胞内游离钙水平呈浓度依赖性上升。用细胞内游离钙特异性阻断剂BAPT A-AM预处理细胞后,细胞内游离钙水平不再升高,且EGCG诱导的凋亡明显受抑。结论EGCG能诱导胃癌BGC-823细胞凋亡;钙稳态失衡可抑制EGCG诱导的胃癌BGC-823细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 胃癌 表没食子儿茶素没食子酸酯 细胞凋亡 游离钙
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巨噬细胞促进MGC803细胞小鼠肾包膜下移植瘤的生长
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作者 肖胜军 朱建思 +1 位作者 周建国 董琳 《华夏医学》 2005年第6期912-913,共2页
目的:观察同种同基因小鼠单核巨噬细胞对胃癌M GC 803细胞肾包膜下移植瘤生长的影响。方法:分离小鼠脾单核巨噬细胞,并制备其条件培养基,建立M GC 803细胞肾包膜下移植瘤模型;于术后第1天两处理组小鼠分别腹腔注射同种同基因小鼠脾脏单... 目的:观察同种同基因小鼠单核巨噬细胞对胃癌M GC 803细胞肾包膜下移植瘤生长的影响。方法:分离小鼠脾单核巨噬细胞,并制备其条件培养基,建立M GC 803细胞肾包膜下移植瘤模型;于术后第1天两处理组小鼠分别腹腔注射同种同基因小鼠脾脏单核巨噬细胞(CELL组)和同种同基因小鼠脾脏单核巨噬细胞的24h条件培养基(CM组),术后第6天处死小鼠,解剖显微镜下检测小鼠处理前后瘤体积的变化。结果:处理组瘤体体积增长较快,其中以CELL组体积增加最快,CM组、CELL组与对照组比较有显著意义;CM组与CELL组体积差别无显著性意义。结论:同种同基因小鼠脾脏单核巨噬细胞条件培养基及小鼠脾脏单核巨噬细胞腹腔注射能促进M GC 803细胞昆明小鼠肾包膜下移植瘤的生长。 展开更多
关键词 移植瘤 巨噬细胞 MGC803细胞
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RNA干扰Cofilin-1基因沉默对人肝癌细胞株Huh-7侵袭和转移能力的影响 被引量:4
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作者 曹建平 龙晓兰 +2 位作者 龚勇 李晓杰 谢海龙 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第5期465-469,共5页
目的 Cofilin-1参与多种肿瘤的发病过程,但该基因在肝细胞肝癌中表达和作用不明确。文中拟观察Cofilin-1基因在人肝癌组织中的表达情况,探讨下调Cofilin-1表达对肝癌细胞株Huh-7侵袭和转移能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测Cofil... 目的 Cofilin-1参与多种肿瘤的发病过程,但该基因在肝细胞肝癌中表达和作用不明确。文中拟观察Cofilin-1基因在人肝癌组织中的表达情况,探讨下调Cofilin-1表达对肝癌细胞株Huh-7侵袭和转移能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测Cofilin-1基因在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况;体外合成Cofilin-1序列特异性小干扰RNA,应用脂质体转染Huh-7肝癌细胞株,实验分Cofilin-1-siRNA组(Cofilin-1-siRNA转染Huh-7细胞)、非特异性-RNA组(Ctrl-siRNA组,非特异性siRNA转染Huh-7细胞)、未转染组(未转染Huh-7细胞),每组设2个平行孔。Western blot鉴定Cofilin-1蛋白水平变化。细胞迁移及体外侵袭实验观察转染后细胞的侵袭能力的影响。结果与癌旁组织相比,肝癌组织中Cofilin-1基因表达明显增强[(0.698±0.156)vs(3.523±0.412),P<0.05];Cofilin-1-siRNA组Cofilin-1的蛋白量为0.558±0.033,明显低于Ctrl-siRNA组(0.933±0.015)和未转染组(0.961±0.020),差异有统计学意义(P<0.05);体外细胞迁移和侵袭实验结果均显示:与Ctrl-siRNA组迁移及侵袭细胞数量[(79.00±1.33)个]和未转染组[(74.50±1.35)个]比较,Cofilin-1-siRNA组[(58.50±1.78)个]明显降低(P<0.05);Cofilin-1-siRNA组穿膜Huh-7细胞数[(36.50±0.83)个]明显低于Ctrl-siRNA组[(60.20±1.60)个]与未转染组[(51.50±1.14)个],差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Cofilin-1在肝癌组织中高表达,下调Cofilin-1基因的表达能抑制肝癌细胞株Hu H-7的侵袭和转移能力。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 Cofilin-1 基因
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miR-200c对人胃癌细胞增殖能力的影响及其机制探讨 被引量:2
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作者 伍菲菲 谭志琴 +2 位作者 唐云云 谢黎明 张志伟 《山东医药》 CAS 2013年第32期1-3,共3页
目的观察miR-200c对人胃癌细胞增殖能力的影响,并探讨其是否通过靶向调控DNA甲基化转移酶(DNMT3B)表达发挥作用。方法采用MTT法检测miR-200c对人胃癌MGC-803细胞生长增殖能力的影响;构建DNMT3B 3'UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素... 目的观察miR-200c对人胃癌细胞增殖能力的影响,并探讨其是否通过靶向调控DNA甲基化转移酶(DNMT3B)表达发挥作用。方法采用MTT法检测miR-200c对人胃癌MGC-803细胞生长增殖能力的影响;构建DNMT3B 3'UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告载体系统观察miR-200c对DNMT3B 3'UTR-荧光素酶活性的影响;将miR-200c mimics转染胃癌细胞MGC-803,采用Western blot检测DNMT3B表达水平。结果 MTT结果显示,在转染miR-200c mimics 24、48、72 h后,细胞增殖活性OD值分别为0.31±0.01、0.47±0.01、0.53±0.02,与对照组的0.44±0.03、0.62±0.01、0.87±0.01比较,P均<0.05;荧光素报告载体系统证实,DNMT3B是miR-200c直接调控的靶基因。Western blot结果显示,miR-200c可抑制DNMT3B蛋白的表达。结论 miR-200c通过靶向调控DNMT3B的表达而抑制胃癌细胞生长增殖能力。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA MIR-200C 细胞增殖 DNA甲基化转移酶
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二烯丙基二硫对人小细胞肺癌NCI-H446细胞裸鼠移植瘤生长的影响 被引量:1
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作者 刘德勇 张庆丽 +2 位作者 赵其辉 彭和人 谢海龙 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第8期802-805,共4页
目的二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)在多种肿瘤治疗研究中取得了显著的成果。文中探讨DADS对人小细胞肺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并研究其作用机制。方法取裸鼠25只,建立NCI-H446细胞裸鼠移植瘤模型。成瘤裸鼠按随机列表法分... 目的二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)在多种肿瘤治疗研究中取得了显著的成果。文中探讨DADS对人小细胞肺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并研究其作用机制。方法取裸鼠25只,建立NCI-H446细胞裸鼠移植瘤模型。成瘤裸鼠按随机列表法分为阳性对照组、阴性对照组、DADS 20mg/kg组、DADS 60mg/kg组、DADS 180mg/kg组,顺铂(DDP)浓度66mg/kg为阳性对照组,等渗盐水作阴性对照。定期观察浓度不同的DADS对肿瘤生长的影响;HE染色,利用光学显微镜观察移植瘤的形态特征;通过流式细胞术实验,验证DADS对瘤组织细胞周期分布及凋亡的影响。结果 DADS 20mg/kg组、60mg/kg组、180mg/kg组抑瘤率(40.6%、53.1%、66.4%)较阴性对照组明显升高(0),差异有统计学意义(P<0.05);与DADS 20 mg/kg组比较,DADS 60 mg/kg组、DADS 180 mg/kg组抑瘤率差异有统计学意义(P<0.05);HE染色后,阴性对照组瘤细胞密度大,瘤细胞排列紊乱,细胞核异型性大,染色深,核分裂像增多,可见明显的细胞坏死。而DADS处理组,细胞密度较小,瘤细胞排列较规则,核异型性小,呈圆形淡染,核分裂像减少。流式细胞术检测显示,DADS 180 mg/kg组、DADS 60mg/kg组处于G2/M期的细胞数(33.1个、24.8个)较阴性对照组(8.5个)明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DADS能抑制人小细胞肺癌裸鼠移植瘤生长,并对细胞周期产生阻滞,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 小细胞肺癌 裸鼠移植瘤 细胞周期
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Destrin在胃癌中表达的临床病理意义 被引量:2
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作者 吴勇军 唐仪 +4 位作者 李筝 张漾 赵毅 伍镇江 苏琦 《中国医学工程》 2011年第7期6-8,11,共4页
目的本文从临床样本检测胃癌组织中Destrin蛋白的表达水平,探讨Destrin蛋白在胃癌发生、发展中的作用。方法应用组织芯片与免疫组织化SP法检测Destrin在正常胃黏膜、不典型增生和胃癌组织中的表达。结果 Destrin在正常组织、不典型增生... 目的本文从临床样本检测胃癌组织中Destrin蛋白的表达水平,探讨Destrin蛋白在胃癌发生、发展中的作用。方法应用组织芯片与免疫组织化SP法检测Destrin在正常胃黏膜、不典型增生和胃癌组织中的表达。结果 Destrin在正常组织、不典型增生与胃癌中表达呈递增趋势(P<0.05);弥漫型胃癌阳性率显著高于肠型胃癌(P<0.05)。瘤体积≤3.0cm的胃癌中Destrin的表达明显低于>3.0cm的(P<0.01)。淋巴结转移组表达明显高于未转移组(P<0.01)。TNM分期Ⅲ、Ⅳ期表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.01)。Destrin表达与患者性别、年龄差异无显著性(P>0.05)。结论 Destrin与胃癌肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、临床分期密切相关,且与胃癌进展及预后密切相关,可能是侵袭转移重要生物标记。 展开更多
关键词 胃癌 组织芯片 Destrin 免疫组织化学
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手术治疗成人先天性巨结肠一例报道
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作者 梁长健 姚敦武 +2 位作者 宋明照 杨森婷 张翔 《浙江临床医学》 2012年第7期862-863,共2页
先天性巨结肠是由于大肠远端肠壁肌层和黏膜下神经节细胞先天缺如所致的一种肠道发育畸形,其病变段肠管持续痉挛,导致排便困难,造成功能性肠梗阻及近端正常肠管代偿性扩张与肥厚。本病多见于儿童,成人先天性巨结肠较罕见,本校附属... 先天性巨结肠是由于大肠远端肠壁肌层和黏膜下神经节细胞先天缺如所致的一种肠道发育畸形,其病变段肠管持续痉挛,导致排便困难,造成功能性肠梗阻及近端正常肠管代偿性扩张与肥厚。本病多见于儿童,成人先天性巨结肠较罕见,本校附属医院于2010年8月收治了一例成人先天性巨结肠,现报告如下。 展开更多
关键词 先天性巨结肠 成人 手术治疗 肠道发育畸形 功能性肠梗阻 神经节细胞 代偿性扩张 排便困难
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