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蛋白酶体抑制剂MG132诱导HepG2细胞凋亡及其机制研究被引量：4: 1; 作者何慧郭芳 +3 位作者屈顺林任重刘俊文杨向东《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期795-798,共4页; 目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对人肝癌细胞HepG2的致凋亡作用,并从泛素蛋白酶体途径(UPP)相关基因E1、E2和E3及天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)表达初步探讨MG132的致细胞凋亡机制。方法采用多个浓度(2、5、10μmol·L-1)... 展开更多; 关键词泛素-蛋白酶体途径蛋白酶体抑制剂肝癌细胞凋亡 CASPASE-3; 在线阅读下载PDF 职称材料

新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位分析及抗体制备被引量：2: 2; 作者王仁杨向东 +4 位作者屈顺林刘俊文闾宏伟姬志娟盛树力《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期531-534,共4页; 目的:分析一个新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位并制备其多克隆抗体。方法:从人胎肝文库PCR扩增获得FRG4基因全长cDNA序列;通过生物信息学分析,预测FRG4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对;采用固... 展开更多; 关键词巨噬细胞动脉粥样硬化突触相关蛋白多肽合成抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

人NKG2D真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的瞬时表达被引量：3: 3; 作者刘映霞胡国龄 +3 位作者刘敏谭德明沙新平何淑雅《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期579-582,共4页; 目的 :构建人NKG2D重组真核表达载体 ,并研究其在COS 7细胞中的表达。方法 :应用RT PCR ,自健康人外周血单个核细胞 (PBMC)中获取NKG2DcDNA ,应用基因重组技术构建含目的基因的T载体克隆后 ,构建含目的基因的真核细胞表达质粒 ,并经酶... 展开更多; 关键词基因克隆 COS-7细胞基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白酶体抑制剂MG132诱导人血管平滑肌细胞凋亡及其机制研究: 4; 作者郭芳屈顺林 +2 位作者孙文清何慧杨向东《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第5期487-492,共6页; 目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对人脐静脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)表达的影响。方法:采用多个浓度(2.5、5、10μmol/L)的蛋白酶体抑制... 展开更多; 关键词人脐静脉血管平滑肌细胞泛素-蛋白酶体通路抑制剂凋亡天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白酶体抑制剂MG132诱导HepG2细胞凋亡及其机制研究被引量：4: 1; 作者何慧郭芳屈顺林任重刘俊文杨向东; 机构南华大学分子生物中心; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期795-798,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No39770863) 湖南省教育厅基金资助项目(No03C378); 文摘目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对人肝癌细胞HepG2的致凋亡作用,并从泛素蛋白酶体途径(UPP)相关基因E1、E2和E3及天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)表达初步探讨MG132的致细胞凋亡机制。方法采用多个浓度(2、5、10μmol·L-1)的蛋白酶体抑制剂MG132处理HepG2细胞;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测UPP相关基因E1、E2、E3和凋亡相关基因Caspase3的转录水平;免疫细胞化学检测Caspase3蛋白表达。结果对照组HepG2细胞凋亡率低于5%,在2、5和10μmol·L-1MG132作用下,细胞凋亡率分别为42.9%、66.1%、72.8%,MG132诱导HepG2细胞凋亡具有量效关系;RTPCR检测发现细胞内UPP相关基因E1、E2、E3mRNA表达下降,而凋亡相关基因Caspase3mRNA表达上调;免疫组化检测Caspase3蛋白表达水平升高。结论蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制UPP活性,使细胞内Caspase3蛋白降解减少,同时上调Caspase3基因转录,促进细胞凋亡。; 关键词泛素-蛋白酶体途径蛋白酶体抑制剂肝癌细胞凋亡 CASPASE-3; Keywords ubiquitin-proteasome pathway proteasome inhibitor HepG2 cell apoptosis Caspase-3; 分类号 R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位分析及抗体制备被引量：2: 2; 作者王仁杨向东屈顺林刘俊文闾宏伟姬志娟盛树力; 机构南华大学分子生物中心首都医科大学北京宣武医院多肽合成室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期531-534,共4页; 基金国家自然科学基金(30200103) 湖南省自然科学基金(02JJY4011)资助; 文摘目的:分析一个新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位并制备其多克隆抗体。方法:从人胎肝文库PCR扩增获得FRG4基因全长cDNA序列;通过生物信息学分析,预测FRG4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域,并进行了多序列比对;采用固相多肽合成法合成了FRG4抗原多肽,并免疫家兔;用免疫组化检测蛋白在人肝癌细胞HepG2细胞中的表达。结果:通过生物信息学分析选取抗原13肽PKLVKEEVFWRNY,制备兔抗人FRG4多克隆抗体。高效液相色谱检测显示抗体纯度达82.79%,抗体滴度为1∶16000,Westernblot证实该抗体具有较好的反应性和特异性,免疫组化证实其主要在HepG2细胞胞浆中表达。结论:成功制备了新的人突触相关蛋白(FRG4)多克隆抗体。; 关键词巨噬细胞动脉粥样硬化突触相关蛋白多肽合成抗体; Keywords Macrophages Atherosclerosis Synapse associated protein Peptide synthesis Antibody; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人NKG2D真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的瞬时表达被引量：3: 3; 作者刘映霞胡国龄刘敏谭德明沙新平何淑雅; 机构中南大学湘雅医院传染病研究所南华大学附一医院神经外科南华大学分子生物中心; 出处《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期579-582,共4页; 基金湖南省自然科学基金 ( 0 2JJY2 0 2 7) 湖南省卫生厅基金 (Y0 2 0 73 ); 文摘目的 :构建人NKG2D重组真核表达载体 ,并研究其在COS 7细胞中的表达。方法 :应用RT PCR ,自健康人外周血单个核细胞 (PBMC)中获取NKG2DcDNA ,应用基因重组技术构建含目的基因的T载体克隆后 ,构建含目的基因的真核细胞表达质粒 ,并经酶切和测序证实。然后应用脂质体介导将重组真核表达质粒转染COS 7细胞 ,用RT PCR和流式细胞术 (FCM)检测转染细胞NKG2D表达。结果 :重组真核表达载体中插入片段序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。NKG2D在COS 7细胞中获得表达。结论 :成功地构建了重组表达载体pcD NA3.1 NKG2D ,并实现了在COS 7细胞中的瞬时表达 ,为研究NKG2D的生物学活性奠定了基础。; 关键词基因克隆 COS-7细胞基因表达; Keywords gene clone gene expression COS-7 cell; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白酶体抑制剂MG132诱导人血管平滑肌细胞凋亡及其机制研究: 4; 作者郭芳屈顺林孙文清何慧杨向东; 机构南华大学病理生理学教研室湖南省动脉硬化重点实验室南华大学分子生物中心; 出处《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第5期487-492,共6页; 基金湖南省科技厅基金(06FJ3098) 湖南省卫生厅基金(C2006-024)资助; 文摘目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对人脐静脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)表达的影响。方法:采用多个浓度(2.5、5、10μmol/L)的蛋白酶体抑制剂MG132处理人脐静脉VSMC 24 h和48 h;流式细胞术分析细胞凋亡率;RT-PCR检测泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)相关基因泛素、泛素活化酶(E1)、泛素缀合酶(E2)、泛素连接酶(E3)、26S蛋白酶体和caspase3基因转录水平;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达。结果:蛋白酶体抑制剂MG132处理48 h后细胞凋亡率增加;细胞内UPP相关的基因mRNA表达降低,而caspase 3 mRNA表达增高;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达水平升高。结论:蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导人脐静脉VSMC凋亡,其作用呈量-效关系;MG132诱导VSMC凋亡与下调UPP相关基因和上调caspase3基因及蛋白的表达有关。; 关键词人脐静脉血管平滑肌细胞泛素-蛋白酶体通路抑制剂凋亡天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3; Keywords human umbilical vascular smooth muscle cells ubiquitin-proteasome pathway inhibitor apoptosis caspase 3; 分类号 R965.2 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	蛋白酶体抑制剂MG132诱导HepG2细胞凋亡及其机制研究	何慧郭芳屈顺林任重刘俊文杨向东	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	新的人突触相关蛋白(FRG4)抗原表位分析及抗体制备	王仁杨向东屈顺林刘俊文闾宏伟姬志娟盛树力	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人NKG2D真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的瞬时表达	刘映霞胡国龄刘敏谭德明沙新平何淑雅	《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心	2003	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蛋白酶体抑制剂MG132诱导人血管平滑肌细胞凋亡及其机制研究	郭芳屈顺林孙文清何慧杨向东	《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料