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高效电转化率条件的探索 被引量:12
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作者 张建琼 张雪萍 +2 位作者 谢维 单祥年 林陵 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2000年第2期72-75,共4页
对影响 DNA电转化效率的主要因素进行探索 .结果表明 :在相同的电场强度、电阻和电容条件下 ,电脉冲时间的长短对电转化效率有较大影响 ,电脉冲时间太长或太短均使转化效率降低 ;用对数生长早中期的细菌制备感受态细胞 ,经液氮速冻后储... 对影响 DNA电转化效率的主要因素进行探索 .结果表明 :在相同的电场强度、电阻和电容条件下 ,电脉冲时间的长短对电转化效率有较大影响 ,电脉冲时间太长或太短均使转化效率降低 ;用对数生长早中期的细菌制备感受态细胞 ,经液氮速冻后储存于 - 70℃ ,能获得高转化效率 . 展开更多
关键词 大肠杆菌 电转化 转化效率 噬菌体抗体库 DNA
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PCR扩增人外周血淋巴细胞抗体基因的探讨 被引量:1
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作者 张建琼 单祥年 +2 位作者 张雪萍 林陵 谢维 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第1期73-76,共4页
采用RT-PCR法,以一组人抗体重链和轻链简并引物,直接从人外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Fd和κ轻链基因.结果提示:用Trizol试剂提取细胞总RNA,以Olig(dT)引导合成cDNA第一链,再经PCR扩增的... 采用RT-PCR法,以一组人抗体重链和轻链简并引物,直接从人外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Fd和κ轻链基因.结果提示:用Trizol试剂提取细胞总RNA,以Olig(dT)引导合成cDNA第一链,再经PCR扩增的方法,是值得优先采用的方法.细胞总RNA的提取不必追求高纯度,少量外周血即足以满足构建抗体库所需,简并引物可获得良好的扩增效果。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 抗体基因 外周血 淋巴细胞 PCR
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