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哈茨木霉菌活性物质harzianic acid的异源合成及其抑菌机制研究
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作者 李心芃 宋瑞轲 +2 位作者 高琦 沈标 张建 《南京农业大学学报》 北大核心 2025年第4期880-891,共12页
[目的]本文旨在分离、纯化、鉴定和异源合成harzianic acid,并研究其对病原真菌的抑制机制。[方法]插入突变获得产黄色物质突变株哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)NJAU 5688,结合液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)、核磁共振(NMR)等数... [目的]本文旨在分离、纯化、鉴定和异源合成harzianic acid,并研究其对病原真菌的抑制机制。[方法]插入突变获得产黄色物质突变株哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)NJAU 5688,结合液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)、核磁共振(NMR)等数据确定主要成分为harzianic acid;利用同源重组异源表达的方法提高harzianic acid的产量;利用平板试验研究harzianic acid抑制病原菌的能力;利用转录组研究harzianic acid对Fusarium oxysporum f.sp.cubense 4(Foc4)的拮抗机制,研究harzianic acid对Foc4细胞膜的影响。[结果]与野生型Trichoderma harzianum NJAU 4742相比,NJAU 5688的水溶代谢产物对病原真菌具有更强的抑制作用;HPLC-MS、NMR等数据分析确定该突变株的水溶代谢产物主要化合物为harzianic acid;在构巢曲霉(Aspergillus nidulans)A1145中同源重组,异源合成后harzianic acid产量可达19.66 mg·L^(-1)。平板试验表明,harzianic acid对病原真菌的抑制作用具有显著浓度依赖性。用harzianic acid处理后Foc4菌丝中关于质膜和相关成分富集的基因最为显著,用100 mg·L^(-1) harzianic acid处理Foc4胞外溶液的D 260值(0.443)约为对照组(0.232)的1.91倍,表明harzianic acid可能破坏了Foc4的细胞膜。[结论]鉴定突变子NJAU 5688合成了抑菌物质harzianic acid,在A1145中实现异源合成,产量达到19.66 mg·L^(-1);结合转录组和核酸检测,100 mg·L^(-1) harzianic acid破坏Foc4菌丝细胞膜,抑制Foc4生长。 展开更多
关键词 哈茨木霉 harzianic acid 异源合成 转录组分析 细胞膜
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