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短小芽孢杆菌脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质研究
被引量：
4
1
作者
苏二正
吴向萍
+1 位作者
高蓓
魏东芝
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期132-138,共7页
从土壤样品中通过筛菌过程获得一株产脂肪酶的菌株,经16S rRNA鉴定属于短小芽孢杆菌,根据已报道的来源于芽孢杆菌的脂肪酶基因设计引物,克隆获得其全长基因,命名为lipS6,大小为648 bp,编码215个氨基酸,经比对其与已报道的脂肪酶基因B26...
从土壤样品中通过筛菌过程获得一株产脂肪酶的菌株,经16S rRNA鉴定属于短小芽孢杆菌,根据已报道的来源于芽孢杆菌的脂肪酶基因设计引物,克隆获得其全长基因,命名为lipS6,大小为648 bp,编码215个氨基酸,经比对其与已报道的脂肪酶基因B26有96%的同源性。构建重组表达质粒pET32a-lipS6,在大肠杆菌中实现了可溶表达,酶活达到2 000 U/mL。重组脂肪酶LipS6的最适温度为30℃,最适pH为9,低浓度的Ca2+与Mn2+对其有很明显的激活作用,疏水性有机溶剂对其毒害作用小,在正己烷体系中可以催化酯化反应,最适酯化底物酸为十四酸,底物醇为正丁醇。
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关键词
脂肪酶
短小芽孢杆菌
基因克隆
重组表达
性质
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职称材料
非水相体系中木瓜脂肪酶催化合成萜烯醇芳香酯的研究
被引量：
5
2
作者
苏二正
尤鹏永
魏东芝
《林产化学与工业》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期45-50,共6页
为建立经济、绿色、高效的萜烯醇芳香酯合成工艺,以木瓜蛋白酶粗品为原料制备获得了天然固定化木瓜脂肪酶(CPL),研究了CPL在非水相体系中催化合成萜烯醇芳香酯的效果,探讨了在有机溶剂体系中萜烯醇种类、有机溶剂种类以及初始水分活度...
为建立经济、绿色、高效的萜烯醇芳香酯合成工艺,以木瓜蛋白酶粗品为原料制备获得了天然固定化木瓜脂肪酶(CPL),研究了CPL在非水相体系中催化合成萜烯醇芳香酯的效果,探讨了在有机溶剂体系中萜烯醇种类、有机溶剂种类以及初始水分活度对反应的影响。结果表明:伯醇类萜烯醇(香茅醇和香叶醇)是较适宜的底物,中等极性的有机溶剂如正己烷为适宜的反应溶剂,0.328的初始水分活度有利于CPL发挥催化活性,此时转化率为95.2%,与商业脂肪酶催化效果相当。CPL在有机溶剂中重复使用性较差,考察了不同离子液体处理方法对CPL催化性能的影响,结果表明,使用微量离子液体对CPL进行包裹前处理可以显著地提高CPL的重复使用性,反应15次后,催化活性仍保留90%以上。
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关键词
非水相体系
木瓜脂肪酶
萜烯醇
芳香酯
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职称材料
天然固定化木瓜脂肪酶催化芳香仲醇动力学拆分
被引量：
1
3
作者
苏二正
尤鹏永
魏东芝
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期1075-1079,1168,共6页
将木瓜来源的廉价天然固定化脂肪酶CPL用于手性拆分芳香仲醇,以4-苯基-2-丁醇作为模式底物,考察了反应温度、反应溶剂、酰基供体以及底物摩尔比对CPL拆分能力的影响,结果表明,适宜的反应温度30～45℃,酰基供体为活性乙烯酯,正己烷或环...
将木瓜来源的廉价天然固定化脂肪酶CPL用于手性拆分芳香仲醇,以4-苯基-2-丁醇作为模式底物,考察了反应温度、反应溶剂、酰基供体以及底物摩尔比对CPL拆分能力的影响,结果表明,适宜的反应温度30～45℃,酰基供体为活性乙烯酯,正己烷或环己烷作为反应溶剂,底物/酰基供体摩尔比1∶2,在该条件下底物的转化率接近50%,e.es大于99%,反应的对映体比值E大于200。CPL对其他结构类似的芳香仲醇也具有很好的拆分能力。该研究为手性芳香仲醇的酶催化制备提供了新的催化剂选择。
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关键词
木瓜脂肪酶
酶催化
手性
芳香仲醇
动力学拆分
生物工程
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职称材料
题名
短小芽孢杆菌脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质研究
被引量：
4
1
作者
苏二正
吴向萍
高蓓
魏东芝
机构
南京林业大学轻工科学与工程学院酶与发酵工程实验室
华东理工
大学
生物反应器
工程
国家重点
实验室
鲁华生物技术研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期132-138,共7页
基金
国家高技术研究发展计划("863"计划)(2012AA020403)
国家自然科学基金项目(31201296/C200101)
+2 种基金
生物反应器工程国家重点实验室开放课题
南京林业大学引进高层次人才科研基金项目
江苏高校优势学科建设工程资助项目
文摘
从土壤样品中通过筛菌过程获得一株产脂肪酶的菌株,经16S rRNA鉴定属于短小芽孢杆菌,根据已报道的来源于芽孢杆菌的脂肪酶基因设计引物,克隆获得其全长基因,命名为lipS6,大小为648 bp,编码215个氨基酸,经比对其与已报道的脂肪酶基因B26有96%的同源性。构建重组表达质粒pET32a-lipS6,在大肠杆菌中实现了可溶表达,酶活达到2 000 U/mL。重组脂肪酶LipS6的最适温度为30℃,最适pH为9,低浓度的Ca2+与Mn2+对其有很明显的激活作用,疏水性有机溶剂对其毒害作用小,在正己烷体系中可以催化酯化反应,最适酯化底物酸为十四酸,底物醇为正丁醇。
关键词
脂肪酶
短小芽孢杆菌
基因克隆
重组表达
性质
Keywords
Lipase Bacillus pumilus
Gene cloning
Recombinant expression
Characterization
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
非水相体系中木瓜脂肪酶催化合成萜烯醇芳香酯的研究
被引量：
5
2
作者
苏二正
尤鹏永
魏东芝
机构
南京
林业大学
轻工
科学与
工程
学院
华东理工
大学
生物反应器
工程
国家重点
实验室
出处
《林产化学与工业》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期45-50,共6页
基金
南京林业大学引进高层次人才科研基金资助(G2014024)
南京林业大学'青年拔尖人才培养计划'专项经费资助(无编号)
江苏高校优势学科建设工程资助项目(无编号)
文摘
为建立经济、绿色、高效的萜烯醇芳香酯合成工艺,以木瓜蛋白酶粗品为原料制备获得了天然固定化木瓜脂肪酶(CPL),研究了CPL在非水相体系中催化合成萜烯醇芳香酯的效果,探讨了在有机溶剂体系中萜烯醇种类、有机溶剂种类以及初始水分活度对反应的影响。结果表明:伯醇类萜烯醇(香茅醇和香叶醇)是较适宜的底物,中等极性的有机溶剂如正己烷为适宜的反应溶剂,0.328的初始水分活度有利于CPL发挥催化活性,此时转化率为95.2%,与商业脂肪酶催化效果相当。CPL在有机溶剂中重复使用性较差,考察了不同离子液体处理方法对CPL催化性能的影响,结果表明,使用微量离子液体对CPL进行包裹前处理可以显著地提高CPL的重复使用性,反应15次后,催化活性仍保留90%以上。
关键词
非水相体系
木瓜脂肪酶
萜烯醇
芳香酯
Keywords
non-aqueous system
Carica papaya lipase
terpene alcohol
aromatic ester
分类号
TQ35 [化学工程]
Q939.9 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
天然固定化木瓜脂肪酶催化芳香仲醇动力学拆分
被引量：
1
3
作者
苏二正
尤鹏永
魏东芝
机构
南京林业大学轻工科学与工程学院酶与发酵工程实验室
华东理工
大学
生物反应器
工程
国家重点
实验室
出处
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期1075-1079,1168,共6页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)项目资助(2012AA022206B)
江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
+1 种基金
南京林业大学引进高层次人才科研基金资助
南京林业大学“青年拔尖人才培养计划”专项经费资助~~
文摘
将木瓜来源的廉价天然固定化脂肪酶CPL用于手性拆分芳香仲醇,以4-苯基-2-丁醇作为模式底物,考察了反应温度、反应溶剂、酰基供体以及底物摩尔比对CPL拆分能力的影响,结果表明,适宜的反应温度30～45℃,酰基供体为活性乙烯酯,正己烷或环己烷作为反应溶剂,底物/酰基供体摩尔比1∶2,在该条件下底物的转化率接近50%,e.es大于99%,反应的对映体比值E大于200。CPL对其他结构类似的芳香仲醇也具有很好的拆分能力。该研究为手性芳香仲醇的酶催化制备提供了新的催化剂选择。
关键词
木瓜脂肪酶
酶催化
手性
芳香仲醇
动力学拆分
生物工程
Keywords
Carica papaya lipase
enzymatic catalysis
chirality
aromatic secondary alcohol
kineticresolution
biological engineering
分类号
TQ35 [化学工程]
Q939.9 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
短小芽孢杆菌脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质研究
苏二正
吴向萍
高蓓
魏东芝
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
非水相体系中木瓜脂肪酶催化合成萜烯醇芳香酯的研究
苏二正
尤鹏永
魏东芝
《林产化学与工业》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
天然固定化木瓜脂肪酶催化芳香仲醇动力学拆分
苏二正
尤鹏永
魏东芝
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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职称材料
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