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利用酵母下脚料高效表达重组谷氨酰胺合成酶研究
被引量：
2
1
作者
张正平
徐健红
殷志敏
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第4期1360-1364,共5页
[目的]为了降低工业用谷氨酰胺合成酶的成本。[方法]利用酵母下脚料制得废酵母基来培养BL21(DE3)-pET28b-glnA,用乳糖诱导合成GS,并对诱导生长点、诱导浓度、诱导时间、添加碳源氮源以及所得GS的可溶性和酶活进行研究。[结果]酵母下脚...
[目的]为了降低工业用谷氨酰胺合成酶的成本。[方法]利用酵母下脚料制得废酵母基来培养BL21(DE3)-pET28b-glnA,用乳糖诱导合成GS,并对诱导生长点、诱导浓度、诱导时间、添加碳源氮源以及所得GS的可溶性和酶活进行研究。[结果]酵母下脚料可以替代LB培养基诱导产生重组GS,其最佳诱导条件为:OD600=0.5,乳糖1 g/L诱导12 h;并不需要补加其他碳氮源,GS可溶性90%以上,催化Glu转化为Gln的转化率为94.5%。[结论]生产用高活性干酵母经过短期发酵后,酵母下脚料中的营养活性物质依然很丰富,可以用来培养大肠杆菌诱导目的蛋白表达,从而降低工业用谷氨酰胺合成酶的成本。
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关键词
谷氨酰胺合成酶
酵母下脚料
乳糖
谷氨酰胺
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职称材料
酵母能量偶联酶法合成Gln体系的建立及条件优化研究
被引量：
1
2
作者
贲培玲
郝佳瑛
+1 位作者
张正平
殷志敏
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第10期4424-4426,共3页
[目的]建立酵母能量偶联体系合成谷氨酰胺并优化体系反应条件。[方法]利用酵母下脚料培养工程菌乳糖诱导所得的谷氨酰胺合成酶,与酵母糖酵解产生的ATP能量偶联,酶法合成谷氨酰胺,并优化反应体系中各组分,提高谷氨酰胺产量。[结果]2%甲...
[目的]建立酵母能量偶联体系合成谷氨酰胺并优化体系反应条件。[方法]利用酵母下脚料培养工程菌乳糖诱导所得的谷氨酰胺合成酶,与酵母糖酵解产生的ATP能量偶联,酶法合成谷氨酰胺,并优化反应体系中各组分,提高谷氨酰胺产量。[结果]2%甲苯预处理干酵母;反应体系各组分的终浓度分别是NH4+100 mmol/L,Glu200 mmol/L,磷酸盐100 mmol/L,Mn2+10 mmol/L,Mg2+不另加;谷氨酸转化率达94.5%,谷氨酰胺产量为27.6 g/L。[结论]成功建立酵母能量偶联酶法合成谷氨酰胺体系,并对反应体系进行放大和初步优化,为酶法合成谷氨酰胺的工业化进程奠定了基础。
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关键词
谷氨酰胺合成酶
反应体系
建立
优化
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职称材料
题名
利用酵母下脚料高效表达重组谷氨酰胺合成酶研究
被引量：
2
1
作者
张正平
徐健红
殷志敏
机构
南京师范大学生命科学学院细胞信号转导实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第4期1360-1364,共5页
文摘
[目的]为了降低工业用谷氨酰胺合成酶的成本。[方法]利用酵母下脚料制得废酵母基来培养BL21(DE3)-pET28b-glnA,用乳糖诱导合成GS,并对诱导生长点、诱导浓度、诱导时间、添加碳源氮源以及所得GS的可溶性和酶活进行研究。[结果]酵母下脚料可以替代LB培养基诱导产生重组GS,其最佳诱导条件为:OD600=0.5,乳糖1 g/L诱导12 h;并不需要补加其他碳氮源,GS可溶性90%以上,催化Glu转化为Gln的转化率为94.5%。[结论]生产用高活性干酵母经过短期发酵后,酵母下脚料中的营养活性物质依然很丰富,可以用来培养大肠杆菌诱导目的蛋白表达,从而降低工业用谷氨酰胺合成酶的成本。
关键词
谷氨酰胺合成酶
酵母下脚料
乳糖
谷氨酰胺
Keywords
Glutamine synthetase
Yeast waste
Lactose
Glutamine
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
酵母能量偶联酶法合成Gln体系的建立及条件优化研究
被引量：
1
2
作者
贲培玲
郝佳瑛
张正平
殷志敏
机构
南京师范大学生命科学学院细胞信号转导实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第10期4424-4426,共3页
文摘
[目的]建立酵母能量偶联体系合成谷氨酰胺并优化体系反应条件。[方法]利用酵母下脚料培养工程菌乳糖诱导所得的谷氨酰胺合成酶,与酵母糖酵解产生的ATP能量偶联,酶法合成谷氨酰胺,并优化反应体系中各组分,提高谷氨酰胺产量。[结果]2%甲苯预处理干酵母;反应体系各组分的终浓度分别是NH4+100 mmol/L,Glu200 mmol/L,磷酸盐100 mmol/L,Mn2+10 mmol/L,Mg2+不另加;谷氨酸转化率达94.5%,谷氨酰胺产量为27.6 g/L。[结论]成功建立酵母能量偶联酶法合成谷氨酰胺体系,并对反应体系进行放大和初步优化,为酶法合成谷氨酰胺的工业化进程奠定了基础。
关键词
谷氨酰胺合成酶
反应体系
建立
优化
Keywords
Glutamine synthetase
Reaction system
Establishment
Optimization
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
作者
出处
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被引量
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1
利用酵母下脚料高效表达重组谷氨酰胺合成酶研究
张正平
徐健红
殷志敏
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008
2
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职称材料
2
酵母能量偶联酶法合成Gln体系的建立及条件优化研究
贲培玲
郝佳瑛
张正平
殷志敏
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009
1
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职称材料
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