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高盐胁迫渗透对SBD2重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的影响
1
作者
季勤
张云峰
+2 位作者
罗玉明
徐春
黄翠香
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期70-75,共6页
在基因工程的操作中,包涵体的形成是人们利用大肠杆菌表达外源蛋白质的一大难点.本研究将环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)环状糊精糖基转移酶(CGTase)的淀粉粒结合域(SBD)基因编码序列的两个拷贝通过一连接肽连接(SBD2)后,克隆到大肠...
在基因工程的操作中,包涵体的形成是人们利用大肠杆菌表达外源蛋白质的一大难点.本研究将环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)环状糊精糖基转移酶(CGTase)的淀粉粒结合域(SBD)基因编码序列的两个拷贝通过一连接肽连接(SBD2)后,克隆到大肠杆菌表达载体pTrcHis B上,得到的pTrcHis B/SBD2质粒转化大肠杆菌Top10,研究了不同培养基、不同诱导温度和时间对SBD2蛋白表达的影响.结果表明,利用相容性溶质山梨醇和甜菜碱等,在高盐胁迫下,实现了SBD2重组蛋白质在大肠杆菌中的可溶性表达,这一结果为在体外研究SBD2蛋白的功能奠定了基础.
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关键词
SBD重组蛋白
相容性溶质
高渗胁迫
可溶性表达
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职称材料
禽流感病毒H5HA基因在马铃薯中的表达
被引量：
2
2
作者
谭甜
季勤
+2 位作者
窦秉德
王登瞻
顾科
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期104-108,共5页
将编码禽流感病毒H5N1亚型HA基因(H5HA)的cDNA片段与CaMV35S启动子融合,通过农杆菌介导法转化马铃薯.分别用PCR,RT-PCR和Western斑点杂交方法对重组H5HA基因在马铃薯植株中的表达情况进行分析.实验结果表明,获得的12株转基因植株中,11...
将编码禽流感病毒H5N1亚型HA基因(H5HA)的cDNA片段与CaMV35S启动子融合,通过农杆菌介导法转化马铃薯.分别用PCR,RT-PCR和Western斑点杂交方法对重组H5HA基因在马铃薯植株中的表达情况进行分析.实验结果表明,获得的12株转基因植株中,11株为阳性.Western斑点杂交检测表明H5HA重组蛋白已在马铃薯体内表达.这一结果将为利用马铃薯作为生物反应器生产禽流感口服疫苗提供理论依据.
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关键词
H5HA基因
血凝素
转基因马铃薯
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职称材料
不同启动子对禽流感病毒H5HA基因在马铃薯体中表达的影响
被引量：
1
3
作者
黄翠香
季勤
+2 位作者
张云峰
徐春
窦秉德
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期75-79,83,共6页
将编码禽流感病毒H5N1亚型的血凝素基因H5HA的cDNA片段分别与马铃薯GBSS I和甘薯SpoA基因启动子序列融合,通过农杆菌介导法将重组基因转入马铃薯,分别用PCR、Western(印迹杂交和斑点杂交)方法对重组基因在马铃薯中的表达情况进行了分析...
将编码禽流感病毒H5N1亚型的血凝素基因H5HA的cDNA片段分别与马铃薯GBSS I和甘薯SpoA基因启动子序列融合,通过农杆菌介导法将重组基因转入马铃薯,分别用PCR、Western(印迹杂交和斑点杂交)方法对重组基因在马铃薯中的表达情况进行了分析.并将其结果与融合CaMV35S启动子的H5HA重组基因在马铃薯体内的表达情况进行比较.分析结果表明,3个重组的H5HA基因在马铃薯薯块中均获得了表达,其表达量最高的是融合GBSS I启动子的H5HA重组基因,最低的是融合SpoA启动子的H5HA重组基因.
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关键词
H5HA基因
转基因马铃薯
启动子
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职称材料
题名
高盐胁迫渗透对SBD2重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的影响
1
作者
季勤
张云峰
罗玉明
徐春
黄翠香
机构
淮阴
师范
学院
生命科学
学院
南京师范大学
生命科学
学院
出处
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期70-75,共6页
基金
国家自然科学基金(30771367)
江苏省高校高新技术产业发展基金(JHB04-043)
+1 种基金
淮阴师范学院教授基金(06HSJS025)
“青蓝工程”
文摘
在基因工程的操作中,包涵体的形成是人们利用大肠杆菌表达外源蛋白质的一大难点.本研究将环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)环状糊精糖基转移酶(CGTase)的淀粉粒结合域(SBD)基因编码序列的两个拷贝通过一连接肽连接(SBD2)后,克隆到大肠杆菌表达载体pTrcHis B上,得到的pTrcHis B/SBD2质粒转化大肠杆菌Top10,研究了不同培养基、不同诱导温度和时间对SBD2蛋白表达的影响.结果表明,利用相容性溶质山梨醇和甜菜碱等,在高盐胁迫下,实现了SBD2重组蛋白质在大肠杆菌中的可溶性表达,这一结果为在体外研究SBD2蛋白的功能奠定了基础.
关键词
SBD重组蛋白
相容性溶质
高渗胁迫
可溶性表达
Keywords
SBD2 protein
compatible solute
hyperosmotic stress
soluble expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
禽流感病毒H5HA基因在马铃薯中的表达
被引量：
2
2
作者
谭甜
季勤
窦秉德
王登瞻
顾科
机构
淮阴
师范
学院
生物
系
南京师范大学
生命科学
学院
出处
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期104-108,共5页
基金
生物多样性与生物技术江苏省重点实验室开放基金
淮阴师范学院教授基金(06HSJS025)
"青蓝工程"资助
文摘
将编码禽流感病毒H5N1亚型HA基因(H5HA)的cDNA片段与CaMV35S启动子融合,通过农杆菌介导法转化马铃薯.分别用PCR,RT-PCR和Western斑点杂交方法对重组H5HA基因在马铃薯植株中的表达情况进行分析.实验结果表明,获得的12株转基因植株中,11株为阳性.Western斑点杂交检测表明H5HA重组蛋白已在马铃薯体内表达.这一结果将为利用马铃薯作为生物反应器生产禽流感口服疫苗提供理论依据.
关键词
H5HA基因
血凝素
转基因马铃薯
Keywords
H5HA gene
hemagglutinin
transgenic potato
分类号
Q939.44 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
不同启动子对禽流感病毒H5HA基因在马铃薯体中表达的影响
被引量：
1
3
作者
黄翠香
季勤
张云峰
徐春
窦秉德
机构
南京师范大学生命科学学院生物多样性与生物技术江苏省重点实验室
淮阴
师范
学院
生命科学
学院
江苏省
环洪泽湖生态农业
生物技术
重点
实验室
出处
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期75-79,83,共6页
基金
淮阴师范学院教授基金(06HSJS025)
江苏省"青蓝工程"
文摘
将编码禽流感病毒H5N1亚型的血凝素基因H5HA的cDNA片段分别与马铃薯GBSS I和甘薯SpoA基因启动子序列融合,通过农杆菌介导法将重组基因转入马铃薯,分别用PCR、Western(印迹杂交和斑点杂交)方法对重组基因在马铃薯中的表达情况进行了分析.并将其结果与融合CaMV35S启动子的H5HA重组基因在马铃薯体内的表达情况进行比较.分析结果表明,3个重组的H5HA基因在马铃薯薯块中均获得了表达,其表达量最高的是融合GBSS I启动子的H5HA重组基因,最低的是融合SpoA启动子的H5HA重组基因.
关键词
H5HA基因
转基因马铃薯
启动子
Keywords
H5HA gene
transgenic potato
promoter
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高盐胁迫渗透对SBD2重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的影响
季勤
张云峰
罗玉明
徐春
黄翠香
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
在线阅读
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职称材料
2
禽流感病毒H5HA基因在马铃薯中的表达
谭甜
季勤
窦秉德
王登瞻
顾科
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
不同启动子对禽流感病毒H5HA基因在马铃薯体中表达的影响
黄翠香
季勤
张云峰
徐春
窦秉德
《南京师大学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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职称材料
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