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鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72基因克隆、蛋白原核表达和抗体制备
被引量：
4
1
作者
李双
向涛
+4 位作者
周海峰
吴霆
顾伟
王文
孟庆国
《江苏农业科学》
2019年第14期62-65,共4页
异育银鲫作为我国重要的淡水经济鱼类,其鳃出血病为主要病害,并造成重大经济损失,该病病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2).目前,研究主要在该病的检测和病理方面,对于免疫学检测方面研究较少.本研究根据CyHV-2ORF72...
异育银鲫作为我国重要的淡水经济鱼类,其鳃出血病为主要病害,并造成重大经济损失,该病病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2).目前,研究主要在该病的检测和病理方面,对于免疫学检测方面研究较少.本研究根据CyHV-2ORF72基因序列设计了1对特异性引物,利用患病异育银鲫肾脏DNA作为模板,通过PCR扩增得到CyHV-2ORF72基因全长,该基因序列全长为1113bp,可编码370个氨基酸的蛋白.该基因与pET-28a表达载体连接构建重组原核表达载体pET-ORF72转入大肠杆菌中,经IPTG诱导表达得到了分子量约为45ku的重组蛋白,与预测的蛋白大小基本一致.将纯化的重组蛋白皮下多点注射免疫新西兰大耳兔制备了ORF72的多克隆抗体,经Western Blotting检测抗体能与病毒粗提液有良好反应,特异性较好,本结果可为下一步建立疫苗和免疫检测方法奠定基础.
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关键词
异育银鲫
鲤疱疹病毒Ⅱ型
ORF72
多克隆抗体
WESTERN
BLOTTING
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职称材料
题名
鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72基因克隆、蛋白原核表达和抗体制备
被引量：
4
1
作者
李双
向涛
周海峰
吴霆
顾伟
王文
孟庆国
机构
南京师范大学生命科学学院/江苏省水生甲壳动物病害重点实验室
江苏省
宝应县
水生
动物
疫病预防控制中心
出处
《江苏农业科学》
2019年第14期62-65,共4页
基金
渔业重大技术集成与示范推广项目(编号:D2015-13-5)
文摘
异育银鲫作为我国重要的淡水经济鱼类,其鳃出血病为主要病害,并造成重大经济损失,该病病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2).目前,研究主要在该病的检测和病理方面,对于免疫学检测方面研究较少.本研究根据CyHV-2ORF72基因序列设计了1对特异性引物,利用患病异育银鲫肾脏DNA作为模板,通过PCR扩增得到CyHV-2ORF72基因全长,该基因序列全长为1113bp,可编码370个氨基酸的蛋白.该基因与pET-28a表达载体连接构建重组原核表达载体pET-ORF72转入大肠杆菌中,经IPTG诱导表达得到了分子量约为45ku的重组蛋白,与预测的蛋白大小基本一致.将纯化的重组蛋白皮下多点注射免疫新西兰大耳兔制备了ORF72的多克隆抗体,经Western Blotting检测抗体能与病毒粗提液有良好反应,特异性较好,本结果可为下一步建立疫苗和免疫检测方法奠定基础.
关键词
异育银鲫
鲤疱疹病毒Ⅱ型
ORF72
多克隆抗体
WESTERN
BLOTTING
分类号
S941.41 [农业科学—水产养殖]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72基因克隆、蛋白原核表达和抗体制备
李双
向涛
周海峰
吴霆
顾伟
王文
孟庆国
《江苏农业科学》
2019
4
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