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简并寡核苷酸引物PCR扩增单细胞基因组的影响因素研究
被引量：
1
1
作者
王晶
乔龙
+3 位作者
孙海翔
胡娅莉
李洁
李朝军
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第16期6675-6677,共3页
[目的]研究影响简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)扩增单细胞全基因组的因素。[方法]以单个人外周血淋巴细胞为材料,进行DOP-PCR,研究新鲜细胞与冷藏细胞及采用新鲜和冻存的细胞裂解物为模...
[目的]研究影响简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)扩增单细胞全基因组的因素。[方法]以单个人外周血淋巴细胞为材料,进行DOP-PCR,研究新鲜细胞与冷藏细胞及采用新鲜和冻存的细胞裂解物为模板对扩增产物的均匀性及特异性的影响。[结果]以新鲜的淋巴细胞为模板与以冷藏的淋巴细胞为模板相比,扩增产物的均匀性相当,特异性上新鲜细胞较好。细胞裂解后立即进行扩增的效果在产物的均匀性及特异性方面均明显优于冻存的细胞裂解物。[结论]对单细胞应用DOP-PCR方法进行全基因组扩增时,应尽量选取新鲜细胞进行裂解,裂解后避免冻存以保证扩增的均匀性及特异性。
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关键词
单细胞
简并寡核苷酸引物PCR
基因扩增
全基因组
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职称材料
题名
简并寡核苷酸引物PCR扩增单细胞基因组的影响因素研究
被引量：
1
1
作者
王晶
乔龙
孙海翔
胡娅莉
李洁
李朝军
机构
南京
师范大学生命科学院
南京市
鼓楼
医院
生殖中心
南京市
鼓楼
医院
妇产科
南京市鼓楼医院遗传室
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第16期6675-6677,共3页
基金
南京市科技局社会发展重大项目(200504025)
文摘
[目的]研究影响简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)扩增单细胞全基因组的因素。[方法]以单个人外周血淋巴细胞为材料,进行DOP-PCR,研究新鲜细胞与冷藏细胞及采用新鲜和冻存的细胞裂解物为模板对扩增产物的均匀性及特异性的影响。[结果]以新鲜的淋巴细胞为模板与以冷藏的淋巴细胞为模板相比,扩增产物的均匀性相当,特异性上新鲜细胞较好。细胞裂解后立即进行扩增的效果在产物的均匀性及特异性方面均明显优于冻存的细胞裂解物。[结论]对单细胞应用DOP-PCR方法进行全基因组扩增时,应尽量选取新鲜细胞进行裂解,裂解后避免冻存以保证扩增的均匀性及特异性。
关键词
单细胞
简并寡核苷酸引物PCR
基因扩增
全基因组
Keywords
Single cell
Degenerate oligonucleotide primered PCR
Gene amplification
Whole genome
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
简并寡核苷酸引物PCR扩增单细胞基因组的影响因素研究
王晶
乔龙
孙海翔
胡娅莉
李洁
李朝军
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008
1
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