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蛋白芯片技术对8种自身抗体的检测及其评价 被引量:5
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作者 史进方 顾国浩 +3 位作者 陈见奇 徐红星 杨达人 俞吉涛 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期57-60,67,共5页
目的 研究蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性及特异性,探讨其对自身免疫性疾病的鉴别诊断价值,并对其方法学进行评估。方法 用胶体金标法、间接免疫荧光法及蛋白芯片法检测抗 ds- DNA;用免疫印迹法、蛋白芯片法检测抗Sm 、抗u1RNP ... 目的 研究蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性及特异性,探讨其对自身免疫性疾病的鉴别诊断价值,并对其方法学进行评估。方法 用胶体金标法、间接免疫荧光法及蛋白芯片法检测抗 ds- DNA;用免疫印迹法、蛋白芯片法检测抗Sm 、抗u1RNP 、抗SSA、抗SSB 、抗Rib- P、抗 Jo -1及抗 Scl- 70 7 种自身抗体,对检测结果进行统计学分析。结果 抗dsDNA抗体检测,蛋白芯片法优于胶体金标法 (P<0.01);皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)组 Jo -1 抗体(P<0.01)、混合性结缔组织病(MCTD)组u1RNP抗体(P<0.01)、硬皮病(PSS)组 Scl- 70 抗体(P<0.05),蛋白芯片法与免疫印迹法检测结果存在显著性差异;在 DM/PM组、PSS组、MCTD组,蛋白芯片法与免疫印迹法对自身免疫性疾病的鉴别诊断有显著性差别(P<0.05)。4种方法的总体敏感性依次为蛋白芯片法、免疫印迹法、间接免疫荧光法、胶体金标法。结论 蛋白芯片法检测项目多、简便快速、敏感性好、特异性强、分析客观,值得推广使用。 展开更多
关键词 蛋白芯片 自身免疫性疾病 自身抗体 胶体金标法 间接免疫荧光法 免疫印迹法
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结核分枝杆菌CFP-10与Rv2626c蛋白的表达及血清学诊断研究 被引量:3
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作者 朱中元 张丹 +6 位作者 王海波 肖劲逐 邱一帆 颜磊 陈德 刘爱国 杨欣 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1212-1215,共4页
目的通过构建结核分枝杆菌(结核菌)CFP-10和Rv2626c蛋白表达载体,并在大肠杆菌表达,对其免疫反应性进行鉴定评价。方法用PCR法从结核菌H37Rv基因组DNA分别扩增出CFP-10、Rv2626c基因,连接到表达载体PET30a上,在大肠杆菌中表达;组氨酸标... 目的通过构建结核分枝杆菌(结核菌)CFP-10和Rv2626c蛋白表达载体,并在大肠杆菌表达,对其免疫反应性进行鉴定评价。方法用PCR法从结核菌H37Rv基因组DNA分别扩增出CFP-10、Rv2626c基因,连接到表达载体PET30a上,在大肠杆菌中表达;组氨酸标签(His-Tag)镍柱层析纯化重组蛋白;用ELISA方法进行检测。结果构建了含CFP-10、Rv2626c重组质粒的大肠杆菌工程菌,发现目的蛋白主要以可溶形式存在;用重组CFP-10、Rv2626c蛋白组成联合抗原,ELISA方法检测214份血清,阳性率达77.1%。结论目的基因克隆入宿主菌中并成功表达,重组的CFP-10、Rv2626c蛋白组成联合抗原可能成为结核病血清学诊断的组合抗原之一。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 CFP-10蛋白 Rv2626c蛋白 表达 ELISA
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TB16.3重组蛋白在结核感染中的诊断价值研究 被引量:3
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作者 朱中元 刘元 +6 位作者 王海波 肖劲逐 邱一帆 颜磊 陈德 刘爱国 杨欣 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期791-796,共6页
目的通过构建结核分枝杆菌蛋白TB16.3的原核表达载体并表达纯化,对其检测抗体的性能进行评价。方法用PCR法从结核菌H37Rv基因组DNA扩增TB16.3基因,连接到表达载体PET-30a上,在大肠杆菌中表达;组氨酸标签镍柱层析纯化重组蛋白。结果建立E... 目的通过构建结核分枝杆菌蛋白TB16.3的原核表达载体并表达纯化,对其检测抗体的性能进行评价。方法用PCR法从结核菌H37Rv基因组DNA扩增TB16.3基因,连接到表达载体PET-30a上,在大肠杆菌中表达;组氨酸标签镍柱层析纯化重组蛋白。结果建立ELISA方法检测116份TB患者和96份健康对照者血清中的抗结核菌TB16.3抗体。构建了表达TB16.3的大肠杆菌工程菌,发现目的蛋白主要以可溶形式存在。诱导剂IPTG浓度为1mmol/L,37℃培养5h可获得最大量表达。而在28℃时重组蛋白为可溶形式表达。用重组TB16.3蛋白,ELISA方法检测118份TB患者和96份健康者血清,敏感性、特异性和调整一致率分别为72.9%、86.5%和79.6%。抗TB15.3抗体的敏感性、特异性和调整一致率分别为46.6%、99.0%和76.0%。抗CFP-10的敏感性、特异性和调整一致率分别为75.4%、55.2%和65.7%。结核病患者抗Rv2626C抗体阳性率(44.1%)显著低于其在正常对照的阳性率(75.0%,χ2=20.8,P<0.01)。TB15.3和TB16.3等量包被检测,敏感性、特异性和一致率分别达69.4%、96.9%和83.7%,检测非TB肺部疾病患者,其抗体阳性率仅为9.6%,特异性为90.4%。TB15.3和TB16.3混合后同时包被检测,结合TB15.3单独检测的结果,则敏感性、特异性和一致率分别达82.2%、95.9%和88.9%,一致率为最高。结论目的基因克隆入宿主菌中并表达成功,获得制备上述4种蛋白的最适条件。获得的重组TB16.3、CFP-10和TB15.3蛋白可能成为结核病血清学诊断的抗原或者抗原组合。Rv2626C抗体可能被用于结核患者恢复期的评估。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 TB16 3蛋白 表达 血清学诊断
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超声波-双水相萃取印楝素工艺的研究 被引量:1
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作者 王佳静 王曼 +1 位作者 栾龙 孙润广 《声学技术》 CSCD 北大核心 2015年第1期43-46,共4页
采用超声波耦合乙醇-硫酸钠双水相提取印楝素,将超声功率密度,超声时间,超声辐射方式作为其影响因素,并分别进行单因素实验和正交实验对其进行研究,最终确定了超声波双水相提取印楝素的最佳工艺。最佳工艺条件为:功率密度为2.4 w/cm2,... 采用超声波耦合乙醇-硫酸钠双水相提取印楝素,将超声功率密度,超声时间,超声辐射方式作为其影响因素,并分别进行单因素实验和正交实验对其进行研究,最终确定了超声波双水相提取印楝素的最佳工艺。最佳工艺条件为:功率密度为2.4 w/cm2,时间为30 min,辐射方式为7s/10s。并且影响印楝素超声提取率的主次因素为功率密度>辐射方式>超声时间,最优条件下印楝素的提取率为0.3200%。 展开更多
关键词 超声波 印楝素 双水相
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