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GST-UCP2-N和GST-UCP2-C原核表达载体的构建表达及多克隆抗体的制备
1
作者
白蕊
郭亚楠
+2 位作者
卞桢
刘丹青
曾科
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期192-196,共5页
以pMD18-T-hucp2为模板,用设计的两对特异性的引物PCR得到hucp2cDNA N端和C端的两断基因片段,然后将其插入到pGEX-5X-1表达载体上,重组质粒在PCR、双酶切、测序鉴定后,经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21表达大量融合蛋白GST-UCP2-N(C),经GST亲...
以pMD18-T-hucp2为模板,用设计的两对特异性的引物PCR得到hucp2cDNA N端和C端的两断基因片段,然后将其插入到pGEX-5X-1表达载体上,重组质粒在PCR、双酶切、测序鉴定后,经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21表达大量融合蛋白GST-UCP2-N(C),经GST亲和层析纯化蛋白.以该蛋白为抗原免疫ucp2基因敲除小鼠,western blot鉴定血清中抗体的反应性.实验证明成功构建了构建pGEX-5X-1-UCP-N(C)重组质粒,表达出了融合蛋白.并获得了抗血清.为进一步获得灵敏性更高,特异性更强的UCP2的抗体打下了基础.
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关键词
解偶联蛋白2(UCP2)
表达
多克隆抗体
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职称材料
题名
GST-UCP2-N和GST-UCP2-C原核表达载体的构建表达及多克隆抗体的制备
1
作者
白蕊
郭亚楠
卞桢
刘丹青
曾科
机构
南京大学生物化学与分子生物学系
出处
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期192-196,共5页
基金
国家自然科学基金(30871019)
文摘
以pMD18-T-hucp2为模板,用设计的两对特异性的引物PCR得到hucp2cDNA N端和C端的两断基因片段,然后将其插入到pGEX-5X-1表达载体上,重组质粒在PCR、双酶切、测序鉴定后,经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21表达大量融合蛋白GST-UCP2-N(C),经GST亲和层析纯化蛋白.以该蛋白为抗原免疫ucp2基因敲除小鼠,western blot鉴定血清中抗体的反应性.实验证明成功构建了构建pGEX-5X-1-UCP-N(C)重组质粒,表达出了融合蛋白.并获得了抗血清.为进一步获得灵敏性更高,特异性更强的UCP2的抗体打下了基础.
关键词
解偶联蛋白2(UCP2)
表达
多克隆抗体
Keywords
uncoupling protein 2 （UCP2）, expression, polyclonal antibody
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GST-UCP2-N和GST-UCP2-C原核表达载体的构建表达及多克隆抗体的制备
白蕊
郭亚楠
卞桢
刘丹青
曾科
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
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