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酸性土壤中大豆优势根瘤菌的分离、鉴定及其生物学特性 被引量:7
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作者 李永春 孔令如 +5 位作者 王焱 孔文尧 杨统一 邹爱兰 戚金亮 杨永华 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期384-390,共7页
从两个酸性土壤生态实验点(江西鹰潭、浙江金华)种植的不同大豆品种根瘤中,分离纯化出29个分离物,并对其进行了分子鉴定和生物学特性分析。从其中16个分离物中扩增出nifH基因,测序结果表明,分离纯化出的菌株主要为慢生根瘤属(Bradyrhizo... 从两个酸性土壤生态实验点(江西鹰潭、浙江金华)种植的不同大豆品种根瘤中,分离纯化出29个分离物,并对其进行了分子鉴定和生物学特性分析。从其中16个分离物中扩增出nifH基因,测序结果表明,分离纯化出的菌株主要为慢生根瘤属(Bradyrhizobium)菌株。10个分离自浙江金华的菌株,在大豆品种之间的种属差异不大。在6个分离自江西鹰潭的菌株中,耐铝和敏感的大豆品种根瘤菌株存在明显的基因型差异。通过基于nifH基因的系统发育分析选取代表性菌株,进行16S rDNA序列测定和菌株回接结瘤实验,进一步明确和验证了其种属特性。同时,对经过初筛能结瘤的4株根瘤菌进行了生长曲线和生理生化特性的测定。本文结果表明在酸性土壤中,优势根瘤菌存在地域差异性。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 NIFH 16SrDNA 生物学特性 酸性土壤
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重组表达天冬氨酸-β-脱羧酶及其酶学性质 被引量:2
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作者 吴四平 陆阳 +3 位作者 张宏娟 刘茜 焦庆才 刘均忠 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期637-641,共5页
利用p ETDuet-1为载体在宿主细胞E.coli BL21(DE3)中重组表达了粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)来源的天冬氨酸-β-脱羧酶(Asd),研究了其酶学性质,考察了p H、p H稳定性、温度、热稳定性、底物浓度对酶活的影响。结果表明,天冬氨酸-β-... 利用p ETDuet-1为载体在宿主细胞E.coli BL21(DE3)中重组表达了粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)来源的天冬氨酸-β-脱羧酶(Asd),研究了其酶学性质,考察了p H、p H稳定性、温度、热稳定性、底物浓度对酶活的影响。结果表明,天冬氨酸-β-脱羧酶重组表达成功;最适反应温度和p H分别为45℃和6.0;动力学常数Km和Vmax分别为0.72 mmol/L和10.52 mol/(L·min·g)。0.1 g菌体细胞在10 m L 0.2 mol/L磷酸缓冲溶液中催化2.0 g L-天冬氨酸,40℃,p H=6.0反应15 h,L-天冬氨酸的摩尔转化率达到98.6%。 展开更多
关键词 天冬氨酸-β-脱羧酶 L-天冬氨酸 重组表达 粪产碱菌 L-丙氨酸 生物工程
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幽门螺杆菌黏附MKN45细胞模型的建立与应用 被引量:1
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作者 阮小明 李洪森 徐琛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期683-686,共4页
目的建立幽门螺杆菌(Hpylori,Hp)体外黏附MKN45细胞模型,为抗黏附药物的筛选和评价奠定基础。方法采用FITC荧光素标记Hp,以FITC-Hp菌液荧光密度为指标,分别评价FITC用量、FITC标记时间等关键因素,优化FITC标记Hp最佳条件;同时用细胞爬片... 目的建立幽门螺杆菌(Hpylori,Hp)体外黏附MKN45细胞模型,为抗黏附药物的筛选和评价奠定基础。方法采用FITC荧光素标记Hp,以FITC-Hp菌液荧光密度为指标,分别评价FITC用量、FITC标记时间等关键因素,优化FITC标记Hp最佳条件;同时用细胞爬片-革兰染色法确定Hp黏附细胞的最佳时间。结果终浓度为5mg·mL-1的FITC和Hp菌液(浓度为1×106cuf.ml-1)共同孵育1h,为FITC标记Hp的最适条件;Hp黏附MKN45细胞的最佳孵育时间为1h。通过该模型测定芦荟粗多糖抗黏附活性,显示芦荟粗多糖有效抑制Hp黏附MKN45细胞的浓度分别为1g.L-1(P<0.05)以及2g.L-1(P<0.01),并呈剂量依赖性。结论FITC荧光标记检测Hp黏附MKN45细胞模型建立并可用于检测化合物抗Hp黏附活性研究。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 黏附 MKN45细胞 多糖 荧光标记法 革兰染色法
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