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HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定被引量：4: 1; 作者楚鹰宫祥丹 +5 位作者高建伟苏艾荣陈德燕宋红勇吴喜林吴稚伟《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期540-545,共6页; 目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠... 展开更多; 关键词人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) gp120可变区1/2 单克隆抗体真核蛋白表达疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1膜蛋白GP120V1/V2区域的真核表达、纯化和鉴定被引量：3: 2; 作者宋红勇楚鹰吴稚伟《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期142-145,共4页; 目的:真核表达北美HIV-1分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2,并纯化、鉴定其生物活性,为血清学分析鉴别HIV-1感染病人抗体反应及性质提供实验基础。方法:本研究将HIV-1北美分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2基因序列定向... 展开更多; 关键词 HIV-1 V1V2 真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

mTSLP-V1/V2融合蛋白的真核表达与鉴定被引量：1: 3; 作者楚鹰王亭亭 +6 位作者芮昱文宋思维苏艾荣程林宋红勇郑大同吴稚伟《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期582-586,共5页; 目的:将鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(mouse thymic stromal lymphopoietin,mTSLP)与人免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)B亚型分离株BAL的gp120 V1/V2结构域在293F真核细胞表达体系中进行融合表达。方法:以真... 展开更多; 关键词人免疫缺陷病毒1型 gp120可变区1 2 鼠胸腺基质淋巴细胞生成素 293 F表达体系融合蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

稳定表达人CCR5基因CHO细胞系的建立及鉴定被引量：1: 4; 作者程林吴喜林 +1 位作者袁钟平吴稚伟《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期804-808,共5页; CC型趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1感染机体所需的最重要的辅助受体和潜在的抗病毒药物靶点之一.将含有人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5稳定转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后,在96孔板内通过有限稀释法培养细胞单克隆,最后得到22个细... 展开更多; 关键词 CC型趋化因子受体5 稳定转染细胞酶联免疫吸附实验人类免疫缺陷病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

羟丙基-β-环糊精包合物中尼非韦罗含量测定和稳定性考察被引量：1: 5; 作者郝彬彬王芹 +2 位作者任勇王勇吴稚伟《医学研究生学报》 CAS 2011年第6期565-568,共4页; 目的尼非韦罗是一种新型抗艾滋病药物,羟丙基-β-环糊精(hydroxypropyl-β-cyclodextrin,HP-β-CD)包合物增加尼非韦罗的水溶性和稳定性。文中采用反相高效液相色谱法测定环糊精包合物中尼非韦罗含量及考察其相关稳定性。方法采用GL Sci... 展开更多; 关键词高效液相色谱法羟丙基-Β-环糊精尼非韦罗含量稳定性; 在线阅读下载PDF 职称材料

sIgA在抗病毒治疗中的研究进展被引量：1: 6; 作者黄碧莲吴喜林吴稚伟《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1532-1537,共6页; 免疫球蛋白A(IgA)主要分为血清型和分泌型。分泌型IgA(sIgA)是机体黏膜防御系统的主要成分,防止病原体入侵机体的第一道防线。sIgA分子通过直接结合病原体抗原,中和或阻断一系列病毒的活性,并阻止它们附着在宿主细胞上。sIgA在抗病毒领... 展开更多; 关键词 IGA 抗病毒黏膜免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定被引量：4: 1; 作者楚鹰宫祥丹高建伟苏艾荣陈德燕宋红勇吴喜林吴稚伟; 机构江苏大学附属武进医院中心实验室南京大学医学院公共健康医学中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期540-545,共6页; 基金国家重点研发计划(2016YFC1201000) 国家科技重大专项(2016ZX10001005003) +4 种基金江苏省产学研项目(BY2015069-02) 2015年度江苏省"双创博士"计划常州市高层次卫生人才培养计划(2016CZBJ060); 文摘目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。; 关键词人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) gp120可变区1/2 单克隆抗体真核蛋白表达疫苗; Keywords human immunodeficiency virus type 1 （HIV-1） gpl20 variable region 1 and 2 domain monoclonal antibody eukaryotic protein expression system vaccine; 分类号 Q813.2 [生物学—生物工程] R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1膜蛋白GP120V1/V2区域的真核表达、纯化和鉴定被引量：3: 2; 作者宋红勇楚鹰吴稚伟; 机构南京大学医学院公共健康医学中心; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期142-145,共4页; 基金国家自然科学基金面上项目(No.30870124) 科技部国际合作项目(No.2009DFA31260); 文摘目的:真核表达北美HIV-1分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2,并纯化、鉴定其生物活性,为血清学分析鉴别HIV-1感染病人抗体反应及性质提供实验基础。方法:本研究将HIV-1北美分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2基因序列定向克隆到多系统表达载体pTriEx-3 Hygro vector(Merck&Co.,Inc.)中,构建了表达质粒,并将表达质粒瞬时转染293T细胞,144小时后收获上清液,经浓缩、纯化后,SDS-PAGE电泳,Western blot检测蛋白的表达,ELISA检测其与HIV-1阳性病人血清的反应性。结果:经SDS-PAGE电泳、Western blot、ELISA方法证实确实得到了有免疫反应活性的V1V2蛋白,从表观分子量判断,表达的V1V2蛋白被糖基化修饰。使用V1V2蛋白作为抗原,分析发现中国HIV-1阳性病人体内比较广泛的存在着V1V2的抗体,为血清学的分析奠定了实验基础。; 关键词 HIV-1 V1V2 真核表达; Keywords HIV-1 V1V2 Eukaryocyte expression; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名mTSLP-V1/V2融合蛋白的真核表达与鉴定被引量：1: 3; 作者楚鹰王亭亭芮昱文宋思维苏艾荣程林宋红勇郑大同吴稚伟; 机构南京大学医学院公共健康医学中心南京医科大学附属第二医院; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期582-586,共5页; 基金国家自然科学基金面上项目(No.30870124) 科技部国际合作项目(No.2009DFA31260)的资助; 文摘目的:将鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(mouse thymic stromal lymphopoietin,mTSLP)与人免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)B亚型分离株BAL的gp120 V1/V2结构域在293F真核细胞表达体系中进行融合表达。方法:以真核表达质粒pCEP-Pu为载体,构建mTSLP与gp120BALV1V2融合基因的重组蛋白表达质粒pCTV1V2BAL。限制性酶切电泳与测序验证质粒构建正确后,使用PEI瞬时转染293F悬浮细胞,表达产物以SDS-PAGE与Western blot进行分析,并对纯化后重组蛋白的V1/V2抗原表位进行了ELISA分析。结果:SDS-PAGE、Western blot分析显示,在表观分子量35 kD至55 kD的范围内存在一条不均一的糖蛋白条带,并且能与抗mTSLP多克隆抗体和抗His标签单克隆抗体发生反应。HIV-1阳性病人血清能够识别mTSLP-V1/V2BAL上的HIV-1V1/V2抗原表位。结论:在293F中成功表达了mTSLP-V1/V2BAL融合蛋白,该蛋白具有HIV-1gp120BALV1/V2区的抗原表位,能够用于HIV-1 gp120 V1/V2亚单位疫苗的研究。; 关键词人免疫缺陷病毒1型 gp120可变区1 2 鼠胸腺基质淋巴细胞生成素 293 F表达体系融合蛋白; Keywords HIV-1 gp120 V1/V2 TSLP 293F expression system Fusion protein; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名稳定表达人CCR5基因CHO细胞系的建立及鉴定被引量：1: 4; 作者程林吴喜林袁钟平吴稚伟; 机构南京大学医学院公共健康医学中心; 出处《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期804-808,共5页; 基金国家自然科学基金(30870124) 科技部国际合作项目(2009DFA31260); 文摘 CC型趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1感染机体所需的最重要的辅助受体和潜在的抗病毒药物靶点之一.将含有人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5稳定转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后,在96孔板内通过有限稀释法培养细胞单克隆,最后得到22个细胞克隆,用流式细胞术检测细胞表面CCR5蛋白,发现克隆10能够高表达人CCR5基因.使用RT-PCR鉴定克隆10CCR5基因转录情况,结果在预期的位置检测出目的条带.采用细胞ELISA的方法进一步鉴定克隆10细胞表面CCR5的表达,结果该克隆的405nm光密度值是对照组的13.6倍.结果表明,本研究建立的稳定转染人CCR5的CHO细胞系能够高效表达CCR5基因,为研究HIV-1共受体、筛选病毒中和抗体、以及抗病毒药物奠定了基础.; 关键词 CC型趋化因子受体5 稳定转染细胞酶联免疫吸附实验人类免疫缺陷病毒; Keywords CC chernokine receptor type 5, stably transfection,cellular ELISA,human immunodeficiency virus; 分类号 Q959.848 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名羟丙基-β-环糊精包合物中尼非韦罗含量测定和稳定性考察被引量：1: 5; 作者郝彬彬王芹任勇王勇吴稚伟; 机构南京大学医学院公共健康医学研究中心南京师范大学江苏省医药超分子材料及应用重点实验室; 出处《医学研究生学报》 CAS 2011年第6期565-568,共4页; 基金国家"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项"十一五"课题(2008ZX10001-015); 文摘目的尼非韦罗是一种新型抗艾滋病药物,羟丙基-β-环糊精(hydroxypropyl-β-cyclodextrin,HP-β-CD)包合物增加尼非韦罗的水溶性和稳定性。文中采用反相高效液相色谱法测定环糊精包合物中尼非韦罗含量及考察其相关稳定性。方法采用GL Sciences Inertsil ODS柱(4.60×250 mm,5μm),检测波长265 nm,柱温30℃。以甲醇(A相)-复方醋酸缓冲液(B相,pH4.5)(65∶35,v/v)为洗脱流动相,采用等速度洗脱,流速为1 ml/min,采用外标法定量。结果尼非韦罗与各有关物质分离良好。在20.10~180.90μg/ml的浓度范围内,尼非韦罗峰面积与浓度具有良好线性关系(r=0.9999);重复性好[相对标准差(relative standard deviation,RSD)<1.5%];稳定性好(RSD<1.5%);加样回收率为100.5%(n=9)。结论此方法检测包合物中尼非韦罗含量操作简便、准确、灵敏度高、可靠。尼非韦罗经HP-β-CD包合后相关稳定性有明显提高。; 关键词高效液相色谱法羟丙基-Β-环糊精尼非韦罗含量稳定性; Keywords High-performance liquid chromatography Hydroxypropyl-β-cyclodextrin Nifeviroc Content Stability; 分类号 R [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名sIgA在抗病毒治疗中的研究进展被引量：1: 6; 作者黄碧莲吴喜林吴稚伟; 机构南京大学医学院公共健康医学中心; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1532-1537,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31970149) 国家传染病重大专项(2018ZX10301406)资助。; 文摘免疫球蛋白A(IgA)主要分为血清型和分泌型。分泌型IgA(sIgA)是机体黏膜防御系统的主要成分,防止病原体入侵机体的第一道防线。sIgA分子通过直接结合病原体抗原,中和或阻断一系列病毒的活性,并阻止它们附着在宿主细胞上。sIgA在抗病毒领域的治疗潜力,使得sIgA在抗病毒领域备受关注,因此可能用于临床抗病毒治疗。本文重点对sIgA在抗病毒治疗中的应用现状及进展进行综述。; 关键词 IGA 抗病毒黏膜免疫; Keywords IgA Anti-virus Mucosal immune; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定	楚鹰宫祥丹高建伟苏艾荣陈德燕宋红勇吴喜林吴稚伟	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2017	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	HIV-1膜蛋白GP120V1/V2区域的真核表达、纯化和鉴定	宋红勇楚鹰吴稚伟	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	mTSLP-V1/V2融合蛋白的真核表达与鉴定	楚鹰王亭亭芮昱文宋思维苏艾荣程林宋红勇郑大同吴稚伟	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	稳定表达人CCR5基因CHO细胞系的建立及鉴定	程林吴喜林袁钟平吴稚伟	《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2012	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	羟丙基-β-环糊精包合物中尼非韦罗含量测定和稳定性考察	郝彬彬王芹任勇王勇吴稚伟	《医学研究生学报》 CAS	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	sIgA在抗病毒治疗中的研究进展	黄碧莲吴喜林吴稚伟	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料