邻苯二甲酸酯类的雄性生殖毒性研究进展 被引量：6

1

作者 秦晓东 袁欣然 +1 位作者 李冬梅 韩晓冬 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第5期531-535,共5页

邻苯二甲酸酯类化合物(phthalate acid esters,PAEs)是一类重要的环境内分泌干扰物,在人群中广泛、持续暴露,对雄性动物的胚胎和生殖系统发育以及生殖功能等具有潜在的生殖毒性。文中就PAEs的雄性生殖毒性研究进展及相关热点问题进行综述。

关键词 邻苯二甲酸酯 雄性生殖毒性 风险评价

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睾丸支持细胞免疫豁免作用机制及研究进展 被引量：5

2

作者 沈洁 韩晓冬 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期666-670,共5页

关键词 睾丸支持细胞 免疫豁免 组织器官移植 免疫学家 大鼠睾丸 科学家

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水源水中有机提取物生殖毒性评价和敏感检测指标的筛选 被引量：2

3

作者 王晓祎 胡冠九 +4 位作者 吴江 邬旸 史薇 韩晓冬 于红霞 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2009年第5期661-668,共8页

以原代培养的大鼠睾丸细胞为体外毒性试验靶细胞,采用支持细胞、生精细胞、间质细胞的形态、细胞活力、胞外乳酸脱氢酶(LDH)活力、细胞早期凋亡坏死率和间质细胞睾酮分泌量5种检测指标评价了X市和L市水源水中有机提取物的生殖毒性,并筛... 以原代培养的大鼠睾丸细胞为体外毒性试验靶细胞,采用支持细胞、生精细胞、间质细胞的形态、细胞活力、胞外乳酸脱氢酶(LDH)活力、细胞早期凋亡坏死率和间质细胞睾酮分泌量5种检测指标评价了X市和L市水源水中有机提取物的生殖毒性,并筛选了对痕量有机污染物敏感的生殖毒性指标.研究结果表明,两市水源水中有机提取物皆可引起支持细胞、间质细胞和生精细胞形态的变化,相比较而言,对生精细胞的影响更严重.X市水源水有机提取物对3种生殖细胞胞外LDH活力没有显著影响(p>0.05);而在L市水源水中有机提取物的暴露下,支持细胞和间质细胞胞外LDH活力显著增强(p<0.01).X市水源水中有机提取物可使间质细胞睾酮分泌量显著减少(p<0.01);而L市水源水有机提取物对间质细胞睾酮分泌量无明显影响(p>0.05).两市水源水有机提取物均能不同程度地诱发大鼠睾丸细胞损伤,生精细胞对环境毒物是比较敏感的细胞,细胞形态、活力、LDH活力、凋亡坏死率、睾酮分泌量等生殖毒理学检测指标可用于饮用水源地水质的评价. 展开更多

关键词 水源水 有机提取物 生殖毒性 敏感指标

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饲喂两种中药配方对异育银鲫巨噬细胞免疫机能的影响 被引量：2

4

作者 袁春涛 孙方方 +4 位作者 李冬梅 龚昳 吴光红 沈美芳 韩晓冬 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期152-156,共5页

配制3种分别含0.03%强普素、0.5%中药组方和1%中药组方的饲料,投喂异育银鲫30d后分离纯化头肾巨噬细胞,用于测定巨噬细胞吞噬力和巨噬细胞呼吸氧爆发.结果显示,0.5%中药组异育银鲫头肾巨噬细胞吞噬力和呼吸氧爆发最强,其次为1%中药组,... 配制3种分别含0.03%强普素、0.5%中药组方和1%中药组方的饲料,投喂异育银鲫30d后分离纯化头肾巨噬细胞,用于测定巨噬细胞吞噬力和巨噬细胞呼吸氧爆发.结果显示,0.5%中药组异育银鲫头肾巨噬细胞吞噬力和呼吸氧爆发最强,其次为1%中药组,与对照组相比差异显著(P<0.05),而强普素组巨噬细胞吞噬力和呼吸氧爆发与对照组比无显著差异(P>0.05).研究表明,0.5%和1%中药组方能够显著增强异育银鲫头肾巨噬细胞的吞噬力和呼吸氧爆发强度.对提高异育银鲫的免疫机能有显著作用. 展开更多

关键词 中药组方 强普素 异育银鲫 巨噬细胞吞噬力 呼吸氧爆发

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云芝子实体提取物的抗肿瘤作用研究 被引量：15

5

作者 刘瑞 侯亚义 +1 位作者 张伟云 韩晓冬 《医学研究生学报》 CAS 2004年第5期413-415,419,共4页

目的 :研究云芝子实体多糖提取物 (CVE)的抗肿瘤作用。　方法 :将肝癌HepA细胞接种于小鼠皮下 ,给予不同剂量CVE ,计算抑瘤率 ;ELISA检测血清中IgG的含量 ;MTT法检测胸腺T淋巴细胞增生能力 ;免疫组化方法检测肝内P5 3、血管内皮生长因子... 目的 :研究云芝子实体多糖提取物 (CVE)的抗肿瘤作用。　方法 :将肝癌HepA细胞接种于小鼠皮下 ,给予不同剂量CVE ,计算抑瘤率 ;ELISA检测血清中IgG的含量 ;MTT法检测胸腺T淋巴细胞增生能力 ;免疫组化方法检测肝内P5 3、血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白的表达。　结果 :CVE显著抑制皮下接种的鼠肝癌HepA细胞的生长 ,提高血清中IgG的含量 ,显著促进胸腺T淋巴细胞转化增生 ,抑制小鼠肝内P5 3、VEGF的表达。　结论 :CVE在体内有显著的肿瘤抑制作用 ,其机制可能与免疫调节、抑制肿瘤转移等作用有关。 展开更多

关键词 云芝子实体多糖提取物 抗肿瘤 免疫球蛋白G 淋巴细胞增生 P53蛋白 血管内皮生长因子

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灵芝孢子油对人肺腺癌细胞LTEP-a-2的抑制作用 被引量：5

6

作者 刘贤钦 窦环 +2 位作者 宋玉仙 公伟 侯亚义 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期146-147,共2页

灵芝（Ganoderma lucidum）是中药宝库中的珍品。近年来对其化学成分及作用机制进行了大量的研究,发现它具有调节和增强人体免疫力及对肿瘤等有良好的协同治疗作用。灵芝孢子油是灵芝孢子粉中的脂溶性物质,主要包含三萜类、多糖类及核... 灵芝（Ganoderma lucidum）是中药宝库中的珍品。近年来对其化学成分及作用机制进行了大量的研究,发现它具有调节和增强人体免疫力及对肿瘤等有良好的协同治疗作用。灵芝孢子油是灵芝孢子粉中的脂溶性物质,主要包含三萜类、多糖类及核苷类等有效成分。 展开更多

关键词 灵芝孢子油 LTEP-a-2细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移 CCK-8 流式细胞术

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子痫前期小鼠动物模型的NK细胞和细胞因子的变化 被引量：7

7

作者 郝莎 李鹏飞 +4 位作者 李若天 梁志锋 赵俊丽 胡娅莉 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期708-712,共5页

目的:探讨磷脂酰丝氨酸(PS)/磷脂酰胆碱(PC)诱导的先兆子痫模型小鼠中自然杀伤(NK)细胞在外周血、脾脏及子宫的数量及其表面受体的变化,同时了解外周血中的细胞因子(TGF-β、TNF-α和IFN-γ)的水平。方法:用磷脂酰丝氨酸(PS)/磷脂酰胆碱... 目的:探讨磷脂酰丝氨酸(PS)/磷脂酰胆碱(PC)诱导的先兆子痫模型小鼠中自然杀伤(NK)细胞在外周血、脾脏及子宫的数量及其表面受体的变化,同时了解外周血中的细胞因子(TGF-β、TNF-α和IFN-γ)的水平。方法:用磷脂酰丝氨酸(PS)/磷脂酰胆碱(PC)诱导小鼠出现先兆子痫(PE)样症状,流式细胞仪检测自然杀伤(NK)细胞在外周血、脾脏及子宫的数量和表面受体,酶联免疫法检测外周血中TGF-β、TNF-α和IFN-γ。结果:我们建立的PE样小鼠模型是成功的;与对照组相比,gd17.5时PS/PC组外周血和脾脏中NK细胞数目增加。gd11.5时子宫中NK细胞数目突然增加,随后逐渐降低,且在gd14.5和gd17.5时PS/PC组比对照组NK细胞数目明显减少。PS/PC组脾脏中表面受体CD122表达显著降低,而CD244、CD94及NKG2D均显著增加;子宫中所有表面受体显著降低。在gd11.5、gd14.5及gd17.5时,与对照组相比,PS/PC组外周血中TGF-β的表达水平显著增加;而TNF-α和IFN-γ表达的水平大多不发生明显变化。结论:PE可能与母胎界面处NK细胞的数量及表面受体改变有关。外周血中TGF-β的增加可能抑制子宫处NKG2D等NK细胞表面受体的表达。关于TNF-α和IFN-γ在PE样小鼠模型中的作用还需进一步研究。 展开更多

关键词 子痫前期 NK细胞 细胞因子

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CYP19A1基因多态性与多囊卵巢综合征的相关性研究 被引量：10

8

作者 甄鑫 颜桂军 +2 位作者 孙海翔 乔迪 王勇 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第6期596-599,共4页

目的 CYP19基因编码产物芳香化酶在雄激素代谢中发挥重要作用。文中探讨CYP19A1基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)发病及性激素的相关性。方法采用病例-对... 目的 CYP19基因编码产物芳香化酶在雄激素代谢中发挥重要作用。文中探讨CYP19A1基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)发病及性激素的相关性。方法采用病例-对照的研究方法,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法对373例PCOS者(PCOS组)和313例正常对照者(对照组)中CYP19A1基因多态性位点rs2899470进行基因分型,分析2组基因型频率及等位基因频率,并比较不同基因型与年龄、初潮年龄、体重指数(body mass index,BMI)及血清多种性激素水平的关系。结果对照组与PCOS组在年龄、BMI、激素水平差异有统计学意义(P<0.01),在AAM方面差异无统计学意义(P>0.01)。rs2899470基因型频率在PCOS组(GG:44.5%;TG:49.6%;TT:5.9%)和对照组(GG:39.3%;TG:48.6%;TT:12.1%)的分布差异有统计学意义(P=0.013),PCOS组等位基因G的频率明显高于对照组(69.3%vs 63.6%,P=0.025)。PCOS组雌激素/睾酮值与rs2899470基因型有关,PCOS组GG、TG、TT基因型差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CYP19A1基因多态位点rs2899470与PCOS发病有相关性。PCOS患者的rs2899470基因型与血清雌激素/睾酮水平有关。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 CYP19 单核苷酸多态性

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6-HO-BDE-137对大鼠睾丸支持细胞的毒性 被引量：5

9

作者 胡伟 李冬梅 +2 位作者 韩晓冬 刘红玲 于红霞 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2009年第2期224-230,共7页

以原代培养的大鼠睾丸支持细胞为研究对象,选取环境及生物体中均有检出的一种典型的羟基化PBDE——6-HO-BDE-137作为目标化合物,设置0、0.1、1、10μmol·L-14个浓度梯度,应用噻唑蓝(MTT)试验、荧光显微镜观察和AnnexinV-FITC/PI双... 以原代培养的大鼠睾丸支持细胞为研究对象,选取环境及生物体中均有检出的一种典型的羟基化PBDE——6-HO-BDE-137作为目标化合物,设置0、0.1、1、10μmol·L-14个浓度梯度,应用噻唑蓝(MTT)试验、荧光显微镜观察和AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术,通过检测大鼠睾丸支持细胞增殖活性、细胞形态和细胞凋亡坏死率的变化,探讨其对支持细胞的损伤情况.研究发现,6-HO-BDE-137显著影响支持细胞的增殖活力,暴露24h,10μmol·L-1浓度组细胞与对照组相比显著增殖(p<0.05),随暴露时间的延长(至48h),10μmol·L-1组转为增殖抑制;支持细胞形态也表现出不同程度的改变,10μmol·L-1浓度组变化最为明显,有大量的细胞变圆飘起;随6-HO-BDE-137暴露浓度的升高,支持细胞死亡率增加,凋亡是支持细胞死亡的主要方式.研究结果提示:6-HO-BDE-137具有生殖毒性. 展开更多

关键词 多溴联苯醚 6-HO-BDE-137 大鼠 睾丸支持细胞

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灵芝孢子油对人肺腺癌LTEP-a2细胞凋亡的影响 被引量：5

10

作者 王亚平 赵光锋 +2 位作者 刘柳 李鹏飞 侯亚义 《医药导报》 CAS 2011年第5期570-573,共4页

目的观察灵芝孢子油对人肺腺癌细胞LTEP-a2增殖、凋亡与miR-16及其靶基因表达的影响,从miRNA角度揭示灵芝孢子油的抗肿瘤机制。方法灵芝孢子油处理人肺腺癌细胞LTEP-a2 24和48 h后,采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观... 目的观察灵芝孢子油对人肺腺癌细胞LTEP-a2增殖、凋亡与miR-16及其靶基因表达的影响,从miRNA角度揭示灵芝孢子油的抗肿瘤机制。方法灵芝孢子油处理人肺腺癌细胞LTEP-a2 24和48 h后,采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况,real-time PCR检测miR-16及其靶基因bcl2和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果灵芝孢子油呈剂量、时间性地抑制人肺腺癌LTEP-a2细胞的增殖;当灵芝孢子油浓度达到2μL.mL-1,细胞形态发生明显变化;Annexin-V/PI双染检测提示,灵芝孢子油在低浓度下就可促进细胞凋亡;灵芝孢子油可显著上调LTEP-a2细胞中miR-16的表达并相应下调bcl2和VEGF基因的表达。结论灵芝孢子油能显著抑制人肺腺癌细胞LTEP-a2细胞增殖,引起细胞形态学改变。其作用机制之一是上调miR-16的表达、下调Bcl2和VEGF的表达,从而促进肺癌细胞凋亡,达到抗肿瘤的效果。 展开更多

关键词 LTEP-a2 灵芝孢子油 细胞凋亡 miR-16

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雌激素通过调节MSC分泌细胞因子影响其对DC成熟与功能的抑制 被引量：5

11

作者 赵叶琳 赵晓寅 +1 位作者 孙凌云 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期41-45,50,共6页

目的:本研究试图检测不同浓度17β-雌二醇(E2)存在的情况下人胎肺间充质干细胞(MSC)增殖和表型的变化,并分析这种状态的MSC对树突状细胞(DC)成熟和功能影响及其可能的机制。方法:分离培养人胎肺MSC,加入不同浓度E2,在24小时后对MSC进行... 目的:本研究试图检测不同浓度17β-雌二醇(E2)存在的情况下人胎肺间充质干细胞(MSC)增殖和表型的变化,并分析这种状态的MSC对树突状细胞(DC)成熟和功能影响及其可能的机制。方法:分离培养人胎肺MSC,加入不同浓度E2,在24小时后对MSC进行细胞计数、测定其增殖和贴壁能力,并用流式细胞仪分析MSC表面标志,RT-PCR测定MSC中细胞因子(IL-6、TGF-β和VEGF)mRNA的表达情况。进一步探讨了E2处理24小时后的MSC对DC成熟和功能的影响。结果:分离得到的MSC纯度达到95%以上;E2影响MSC的增殖和贴壁能力,但不影响MSC表面标记的表达;MSC与DC共培养后DC表面CD86、MHCⅡ和CD80的表达均有所降低,而当DC与经E2预处理过的MSC共培后,DC表面MHCⅡ、CD80和CD86的表达回升;高浓度E2作用MSC24小时后,MSC表达的TGF-β与对照组相比减少,而IL-6和VEGF与对照组相比增加。结论:E2可能通过调节MSC分泌细胞因子的水平,改变MSC对DC的免疫抑制作用。 展开更多

关键词 雌激素 间充质干细胞 树突状细胞 系统性红斑狼疮

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新化合物D261抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖及其作用机制 被引量：3

12

作者 王萍 宋玉仙 +1 位作者 窦静杰 侯亚义 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期442-443,共2页

肺癌是当今恶性肿瘤死亡率最高的癌症。早期肺癌主要以手术治疗为主,并辅以放疗化疗。但是化疗药物毒副作用大,且抗药性在一些肿瘤靶向性药物中逐渐显现。因此,亟需新的抗肿瘤药物。天然产物是小分子新药的主要来源。我们在对天然小分... 肺癌是当今恶性肿瘤死亡率最高的癌症。早期肺癌主要以手术治疗为主,并辅以放疗化疗。但是化疗药物毒副作用大,且抗药性在一些肿瘤靶向性药物中逐渐显现。因此,亟需新的抗肿瘤药物。天然产物是小分子新药的主要来源。我们在对天然小分子化合物的筛选过程中发现D261（从固体发酵物中提取,纯度大于95%）具有潜在的抗肿瘤活性,且对非小细胞肺癌的抑制作用最显著。因此,本文对D261影响非小细胞肺癌NCI-H460及其相关机制作了初步探讨。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 NCI-H460细胞 细胞增殖 凋亡 细胞周期 周期蛋白

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17β-雌二醇通过microRNA-29b调节NK细胞干扰素γ的分泌 被引量：2

13

作者 李鹏飞 郭葳 +3 位作者 赵俊丽 王亚平 胡娅莉 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期418-423,共6页

目的:研究17β-雌二醇(E2)对人自然杀伤细胞株NK92中干扰素γ(IFN-γ)分泌的影响及其可能的机制。方法:用E2和poly I:C处理NK92细胞,分别在4、8、12和24小时后用实时定量PCR、酶联免疫吸附法和流式细胞术测定NK92细胞中IFN-γ的表达情况... 目的:研究17β-雌二醇(E2)对人自然杀伤细胞株NK92中干扰素γ(IFN-γ)分泌的影响及其可能的机制。方法:用E2和poly I:C处理NK92细胞,分别在4、8、12和24小时后用实时定量PCR、酶联免疫吸附法和流式细胞术测定NK92细胞中IFN-γ的表达情况,用实时定量PCR检测microRNA-29b(miR-29b)的变化。进一步,构建含有IFN-γ3'UTR的pEGFP-C1质粒,并转染pre-29b和pEGFP-IFN-γ3'UTR质粒至HEK293A细胞中,用流式细胞术检测绿色荧光蛋白(GFP)的变化。结果:E2抑制NK92细胞的IFN-γ分泌和上调miR-29b的表达;miR-29b能够直接靶向调节IFN-γ3'UTR mRNA。结论:E2可能通过调节NK92的miR-29b而影响IFN-γ的分泌水平,进而影响其免疫功能。 展开更多

关键词 17Β-雌二醇 NK92 miR-29b IFN-Γ

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解脲脲原体与不育症的研究进展 被引量：6

14

作者 王勇 韩晓冬 《动物医学进展》 CSCD 2005年第1期25-28,共4页

生殖道解脲脲原体 (Ureaplasmaurealyticum ,UU)感染影响了精子各项指标 ,降低精液整体质量。UU对精子活力影响最大 ,其次是精子数、成活率、顶体完整率、血清抗精子抗体。UU感染致使精子活力逐渐下降 ,最终导致精子死亡 ,从而降低精子... 生殖道解脲脲原体 (Ureaplasmaurealyticum ,UU)感染影响了精子各项指标 ,降低精液整体质量。UU对精子活力影响最大 ,其次是精子数、成活率、顶体完整率、血清抗精子抗体。UU感染致使精子活力逐渐下降 ,最终导致精子死亡 ,从而降低精子成活率。UU感染引起血清IL 6升高 ,但并不能引起精浆IL 6升高。UU感染能降低精浆中Zn和Se的含量 ,从而也影响精液质量。动物模型中UU感染使精子头尾卷曲 ,尾部断裂、肿胀 ;影响细胞因子的分泌 ,使血清中细胞因子IL 6、IL 8含量有明显升高 ,但不能使TNF α、IFN α明显变化 ;对于睾丸、输精管、前列腺的形态组织结构尚未有明显的影响 ;UU感染导致泌尿生殖道中结石形成。总之 ,UU感染是引起男性不育的因素之一 。 展开更多

关键词 解脲脲原体 精液质量 细胞因子 结石 不育

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不同烷基酚诱导大鼠支持细胞膜通透性和细胞外基质分泌的对比研究(英文) 被引量：1

15

作者 龚昳 袁春涛 +2 位作者 吴江 屠志刚 韩晓冬 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期529-536,共8页

烷基酚作为一类重要的环境污染物已经对男性生殖产生很大的负面影响.本文的主要目的是对比研究不同烷基酚对雄性大鼠睾丸支持细胞的影响.各种烷基酚,包括甲基酚,丁基酚和壬基酚处理支持细胞后,对比研究它们对支持细胞膜通透性和细胞外... 烷基酚作为一类重要的环境污染物已经对男性生殖产生很大的负面影响.本文的主要目的是对比研究不同烷基酚对雄性大鼠睾丸支持细胞的影响.各种烷基酚,包括甲基酚,丁基酚和壬基酚处理支持细胞后,对比研究它们对支持细胞膜通透性和细胞外基质产生的影响.实验结果表明各类烷基酚在处理12 h内均能诱导细胞膜通透性(以lactate dehydrogenase(LDH)泄漏率表示)增加,并具有一定的剂量依赖效应,其中丁基酚和壬基酚的作用强于甲基酚;当处理时间增加至24 h时,各组LDH的泄漏率均在较低浓度即达到最大(丁基酚和壬基酚5×10-8mol/L,甲基酚10-7mol/L)并不再随浓度增加而增大.此外,各种烷基酚处理均能增加支持细胞层粘连蛋白产生量,并具有一定剂量依赖性,其中丁基酚的刺激作用强于甲基酚和壬基酚. 展开更多

关键词 烷基酚 对比 LACTATE dehydrogenase泄漏 层粘连蛋白 支持细胞

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柱前衍生化-气相色谱/质谱法测定细胞中的对-正壬基酚 被引量：1

16

作者 高子燊 鲜啟鸣 +3 位作者 韩晓冬 潘旭萍 冯建昉 于红霞 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期819-822,共4页

采用柱前衍生化-气相色谱/质谱法测定染毒细胞以及细胞质中对-正壬基酚(4-n-NP)的含量,并初步探讨了4-n-NP在细胞中的分布.在不同介质中加标回收率在76.5%—98.9%之间.利用本方法测定实际样品发现:在浓度为10μmol·l-1和20μmol.l-... 采用柱前衍生化-气相色谱/质谱法测定染毒细胞以及细胞质中对-正壬基酚(4-n-NP)的含量,并初步探讨了4-n-NP在细胞中的分布.在不同介质中加标回收率在76.5%—98.9%之间.利用本方法测定实际样品发现:在浓度为10μmol·l-1和20μmol.l-1的4-n-NP溶液中暴露12h,105个细胞中4-n-NP的含量分别为21.0ng和43.0ng,而相应的细胞质中4-n-NP的含量分别为14.2ng和28.4ng,显示有67.6%和66.0%的4-n-NP分布在细胞质中. 展开更多

关键词 对-正壬基酚 衍生化 气相色谱/质谱 细胞 细胞质

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Cyr61对外周血NK细胞的增殖和活性调节 被引量：1

17

作者 赵俊丽 李鹏飞 +3 位作者 郭葳 郝莎 胡雅莉 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期997-1002,共6页

目的:体外实验探讨Cyr61对外周血NK(pNK)细胞的增殖和活性的影响。方法:磁珠分选得到纯化的pNK细胞;流式细胞术检测pNK细胞的抑制性和活化性受体、细胞因子IFN-γ的生成和细胞毒性。结果:Cyr61促进外周血淋巴细胞中pNK细胞的增殖,降低C... 目的:体外实验探讨Cyr61对外周血NK(pNK)细胞的增殖和活性的影响。方法:磁珠分选得到纯化的pNK细胞;流式细胞术检测pNK细胞的抑制性和活化性受体、细胞因子IFN-γ的生成和细胞毒性。结果:Cyr61促进外周血淋巴细胞中pNK细胞的增殖,降低CD16的表达;降低淋巴细胞中pNK细胞的活化性受体NKG2D、NKp30和CD244的表达,提高抑制性受体KIR3DL1的表达;能够促进纯化pNK细胞的KIR2DL1表达,降低纯化pNK细胞的胞内IFN-γ生成和细胞毒性。结论:Cyr61对pNK细胞活化的抑制作用,支持了其他学者关于Cyr61在正常妊娠和子痫前期的发病方面可能发挥重要作用的研究结果。 展开更多

关键词 CYR61 自然杀伤细胞 细胞增殖 细胞活性

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Poly(I:C)影响间充质干细胞的成骨分化及其对树突状细胞的作用 被引量：1

18

作者 赵晓寅 刘丹 +1 位作者 刘柳 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期14-19,24,共7页

目的:间充质干细胞(MSC)能够表达Toll样受体(TLR),但TLR配体刺激对MSC的影响依然存在争议。本研究分析了TLR3配体刺激对脐带MSC表型、细胞增殖、凋亡、成骨分化和功能的影响。方法:用混合酶法分离培养了人脐带来源的MSC;用流式细胞仪分... 目的:间充质干细胞(MSC)能够表达Toll样受体(TLR),但TLR配体刺激对MSC的影响依然存在争议。本研究分析了TLR3配体刺激对脐带MSC表型、细胞增殖、凋亡、成骨分化和功能的影响。方法:用混合酶法分离培养了人脐带来源的MSC;用流式细胞仪分析了TLR3配体——Poly(I:C)刺激后MSC表面标志CD29、CD44、CD105、CD31、CD117和CD45表达的变化;用CCK-8和Annexin-V/PI法分别检测了不同浓度Poly(I:C)刺激24及48小时后MSC的增殖和凋亡情况;进一步分析了Poly(I:C)对MSC成骨分化的影响。此外在Poly(I:C)和MSC存在时,流式检测了DC成熟表面标志CD40、CD86、MHCⅡ的表达,DC对右旋糖酐的吞噬,混合淋巴实验检测了DC的抗原递呈能力。结果:Poly(I:C)的刺激不影响MSC的表型和增殖;只有高浓度组的Poly(I:C)刺激引起MSC的凋亡;Poly(I:C)抑制成骨相关基因RUNX2、ALP和OC的表达,抑制MSC的成骨分化;Poly(I:C)存在的情况下,MSC下调DC成熟表面标志CD40、CD86和MHCⅡ的表达,增强DC对右旋糖酐的吞噬能力,并抑制DC对T的活化作用。结论:Poly(I:C)能够影响MSC的成骨分化及免疫调节功能,提示TLR3信号的活化可能在成骨分化中发挥作用。 展开更多

关键词 Poly(I C) 间充质干细胞 成骨分化 树突状细胞

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原癌基因Zbtb7A的POZ区在大肠杆菌中的表达及其多抗制备 被引量：2

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作者 季玉连 赵树立 +2 位作者 黄亚红 赵光锋 侯亚义 《医学研究生学报》 CAS 2009年第7期687-691,共5页

目的:原癌基因Zbtb7A在肿瘤的发生发展过程中起"分子开关"的作用。本研究制备Zbtb7A蛋白POZ功能区重组蛋白及相应的多克隆抗体。方法:根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化其编码序列,用2步法PCR合成目的片断,并将其构建入原核表... 目的:原癌基因Zbtb7A在肿瘤的发生发展过程中起"分子开关"的作用。本研究制备Zbtb7A蛋白POZ功能区重组蛋白及相应的多克隆抗体。方法:根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化其编码序列,用2步法PCR合成目的片断,并将其构建入原核表达载体pET-26b(+)中。重组表达质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),用0.5 mmolIPTG诱导重组蛋白表达。所获重组表达蛋白经15%SDS-PAGE分离,切胶回收目的蛋白,研磨后免疫家兔制备抗血清。收集的抗血清经饱和硫酸铵沉淀和G蛋白柱联合纯化,用Western blot证实对纯化的抗血清进行鉴定。结果:获得了密码子优化后的Zbtb7APOZ区的编码序列,并成功地获得了其重组蛋白,制备了高纯度的抗POZ区多克隆抗体。结论:所获得的重组POZ区蛋白及其多克隆抗体可应用于对Zbtb7A的进一步研究。 展开更多

关键词 原癌基因Zbtb7A POZ区 pET-26b(+) 原核表达 多克隆抗体

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MSCs上清可减轻雷公藤甲素对KGN细胞的损伤作用 被引量：2

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作者 周雪 赵光锋 +1 位作者 陈士雯 侯亚义 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1641-1646,共6页

目的:探讨MSCs上清对雷公藤甲素损害卵巢颗粒细胞的缓解作用及机制。方法:用CCK-8法分析了雷公藤甲素对KGN活力的影响;用混合酶消化法分离脐带来源的MSCs,并用流式细胞术对其表型进行了鉴定;收集MSCs上清,用CCK-8法及PI法检测MSCs上清... 目的:探讨MSCs上清对雷公藤甲素损害卵巢颗粒细胞的缓解作用及机制。方法:用CCK-8法分析了雷公藤甲素对KGN活力的影响;用混合酶消化法分离脐带来源的MSCs,并用流式细胞术对其表型进行了鉴定;收集MSCs上清,用CCK-8法及PI法检测MSCs上清对雷公藤甲素损伤的KGN活力及周期的影响;用Real-time PCR法对周期调节相关基因CDKN1A的表达进行检测。结果:雷公藤甲素能够通过抑制KGN活力及阻滞KGN在S期抑制其生长;MSCs上清不影响正常KGN的增殖和周期,但可提高雷公藤甲素损伤的KGN细胞的活力,缓解雷公藤甲素引起的S期阻滞,抑制雷公藤甲素对KGN的CDKN1A表达的异常上调。结论:MSCs上清可能减轻雷公藤甲素对KGN细胞的损伤作用。 展开更多

关键词 间充质干细胞 卵巢颗粒细胞 雷公藤甲素 CDKN1A

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