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携带TIMP-1基因逆转录病毒载体的构建及其实验研究 被引量:1
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作者 龚涌灵 陈龙邦 黄伟达 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第2期174-179,共6页
构建携带组织金属蛋白酶抑制物TIMP-1基因的逆转录病毒载体,并用于感染胰腺癌SW1990细胞系,观察其侵袭、转移能力的变化.利用常规分子克隆技术,通过对逆转录病毒表达载体PMNSM(F6)质粒的去磷酸化、粘端连接,... 构建携带组织金属蛋白酶抑制物TIMP-1基因的逆转录病毒载体,并用于感染胰腺癌SW1990细胞系,观察其侵袭、转移能力的变化.利用常规分子克隆技术,通过对逆转录病毒表达载体PMNSM(F6)质粒的去磷酸化、粘端连接,构建TIMP-1基因逆转录病毒表达载体PMNSM/hTIMP;经限制性内切酶酶切、电泳鉴定其结构正确后,用电穿孔法对体外培养的PA137包装细胞进行基因转移,G418筛选阳性克隆,收集上清,并用于感染胰腺癌SW1990细胞系的研究.构建获得TIMP-1基因逆转录病毒表达载体PMNSM/hTIMP,有效滴度为104CFU/mL~106CFU/mL.本研究构建获得的TIMP-1基因逆转录病毒表达载体,在感染胰腺癌SW1990细胞系,观察其侵袭。 展开更多
关键词 逆转录病毒 载体构建 转染 胰腺癌 TIMP-1基因
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