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下调hENT1可抑制胰腺癌细胞株Sw1990对吉西他滨的跨膜转运
被引量：
2
1
作者
张红刚
徐建敏
+2 位作者
费晓庆
鞠煌先
刘胜利
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期457-462,共6页
目的:明确下调hENT1后对胰腺癌细胞株Sw1990跨膜转运吉西他滨的影响。方法:将能特异性下调hENT1的pSilence-hENT14.1-CMV neo的重组质粒以及对照质粒转染至胰腺癌Sw1990细胞内。采用G418筛选阳性克隆细胞,RT-PCR检测hENT1mRNA表达情况...
目的:明确下调hENT1后对胰腺癌细胞株Sw1990跨膜转运吉西他滨的影响。方法:将能特异性下调hENT1的pSilence-hENT14.1-CMV neo的重组质粒以及对照质粒转染至胰腺癌Sw1990细胞内。采用G418筛选阳性克隆细胞,RT-PCR检测hENT1mRNA表达情况。培养Sw1990细胞、pSilence-hENT1Si-Sw1990、pSilence-Control-Sw1990细胞,3组细胞培养基中吉西他滨质量浓度均为100μg/mL,温育0,15,30min,1,2,4h后收集细胞。取等量细胞悬液两份各100μL,一份作为检测样本用毛细管区带电泳测定吉西他滨总量,另一份用作平行样本测定总蛋白含量。根据蛋白-细胞数量标准曲线来确定平行样本中细胞数,再用血细胞分析仪确定细胞体积,最后,计算单细胞内药物总量及浓度。结果:pSilence-hENT1Si-Sw1990细胞的hENT1mRNA表达水平下调50。Sw1990组用含吉西他滨(100μg/mL)的DMEM培养基温育后,细胞内药物质量浓度在30min达(55.1±10.4)μg/mL,60min达(70.2±7.8)μg/mL,120min后处于平台期(90.1±6.0)μg/mL。相比之下,pSilence-hENT1Si-Sw1990组细胞内质量药物浓度30min达(41.3±4.9)μg/mL,60min达平台期(51.3±11.8)μg/mL,与对照组相比,细胞内浓度处于较低水平(P<0.05)。pSilence-hENT1control-Sw1990组与Sw1990组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:下调hENT1可以抑制胰腺癌细胞株Sw1990对吉西他滨的摄取,hENT1是吉西他滨跨膜转运的重要通道。
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关键词
RNA干扰
核苷载体
吉西他滨
毛细管区带电泳
胰腺癌细胞株
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题名
下调hENT1可抑制胰腺癌细胞株Sw1990对吉西他滨的跨膜转运
被引量：
2
1
作者
张红刚
徐建敏
费晓庆
鞠煌先
刘胜利
机构
东南
大学
医学院附属中大医院普通外科
南京大学分析化学系
出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期457-462,共6页
基金
东南大学913/事业基金资助项目(No.9290001327)~~
文摘
目的:明确下调hENT1后对胰腺癌细胞株Sw1990跨膜转运吉西他滨的影响。方法:将能特异性下调hENT1的pSilence-hENT14.1-CMV neo的重组质粒以及对照质粒转染至胰腺癌Sw1990细胞内。采用G418筛选阳性克隆细胞,RT-PCR检测hENT1mRNA表达情况。培养Sw1990细胞、pSilence-hENT1Si-Sw1990、pSilence-Control-Sw1990细胞,3组细胞培养基中吉西他滨质量浓度均为100μg/mL,温育0,15,30min,1,2,4h后收集细胞。取等量细胞悬液两份各100μL,一份作为检测样本用毛细管区带电泳测定吉西他滨总量,另一份用作平行样本测定总蛋白含量。根据蛋白-细胞数量标准曲线来确定平行样本中细胞数,再用血细胞分析仪确定细胞体积,最后,计算单细胞内药物总量及浓度。结果:pSilence-hENT1Si-Sw1990细胞的hENT1mRNA表达水平下调50。Sw1990组用含吉西他滨(100μg/mL)的DMEM培养基温育后,细胞内药物质量浓度在30min达(55.1±10.4)μg/mL,60min达(70.2±7.8)μg/mL,120min后处于平台期(90.1±6.0)μg/mL。相比之下,pSilence-hENT1Si-Sw1990组细胞内质量药物浓度30min达(41.3±4.9)μg/mL,60min达平台期(51.3±11.8)μg/mL,与对照组相比,细胞内浓度处于较低水平(P<0.05)。pSilence-hENT1control-Sw1990组与Sw1990组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:下调hENT1可以抑制胰腺癌细胞株Sw1990对吉西他滨的摄取,hENT1是吉西他滨跨膜转运的重要通道。
关键词
RNA干扰
核苷载体
吉西他滨
毛细管区带电泳
胰腺癌细胞株
Keywords
RNAi
nucleoside transporter
gemcitabine
capillary zone electrophoresis
pancreatic cancer cell line
分类号
R735.9 [医药卫生—肿瘤]
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下调hENT1可抑制胰腺癌细胞株Sw1990对吉西他滨的跨膜转运
张红刚
徐建敏
费晓庆
鞠煌先
刘胜利
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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