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人血小板多态性抗原HPA-1a/HPA-1b在CHO细胞中的表达及功能研究
1
作者
陈平
杨文
+2 位作者
孙崇秀
秦朝平
Nelly Kieffer
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期559-565,共7页
为了在体外研究HPA-1抗原的多态性,同时建立一种更简便灵敏的检测抗HPA-1同种(异型)抗体的方法,将含有HPA-1a和HPA-1b的DNA质粒分别转染CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)并获得稳定表达β_3HPA-1a和β_3HPA-1b的细胞株。流式细胞分析结果表明,...
为了在体外研究HPA-1抗原的多态性,同时建立一种更简便灵敏的检测抗HPA-1同种(异型)抗体的方法,将含有HPA-1a和HPA-1b的DNA质粒分别转染CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)并获得稳定表达β_3HPA-1a和β_3HPA-1b的细胞株。流式细胞分析结果表明,CHO细胞结合抗HPAPA-1a同种(异型)抗体的能力与细胞表面β_3整合素表达量直接相关。同时,针对HPA-1a表位的单克隆抗体SZ21仅能抑制CHOβ_3HPA-1a细胞的粘附,对 CHOβ_3HPA-1b细胞却没有影响。抗HPA-1a参照血清能阻断CHOβ_3HPA-1a细胞的粘附,但对CHOβ_3HPA-1b细胞却影响甚微。结果表明,CHO细胞模型可以成功地用来表达并研究HPA-1a的多态性及其抗原特性,同时可以作为用于临床检测抗HPA-1a同种(异型)抗体的一种替代方法。
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关键词
人血小板抗原
HPA
整合素
同种(异型)抗体
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职称材料
CHO-HPA-1a细胞快速检测人血小板同种(异型)抗体方法的建立
被引量：
1
2
作者
陈平
孙崇秀
+2 位作者
杨文
秦朝平
Nelly Kieffer
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期585-591,共7页
应用蛋白印迹(WB)、悬浮细胞免疫荧光流式细胞分析(SIFT)、单抗分析血小板抗体检测(MAIPA)以及限制性内切酶片段长度分析对新生儿血小板减少患儿母体作基因分型和血清分型比较研究。从两例新生儿血小板减少症患儿母亲的血清中检测到了抗...
应用蛋白印迹(WB)、悬浮细胞免疫荧光流式细胞分析(SIFT)、单抗分析血小板抗体检测(MAIPA)以及限制性内切酶片段长度分析对新生儿血小板减少患儿母体作基因分型和血清分型比较研究。从两例新生儿血小板减少症患儿母亲的血清中检测到了抗β_3抗体。CHO-SIFT方法的敏感性和MAIPA分析相似。和间接免疫荧光或MAIPA分析相比,WB分析法敏感性稍低,可能是SDS使HPA-1a抗原决定簇发生了改变。以较温和条件对CHO细胞进行固定时,不但细胞表面的HPA-1a抗原表位未受影响,而且细胞的保存时间被大大的延长。这些结果表明,作为分型血小板的替代物,固定化的细胞可能更适合于一般妇幼保健门诊对大量血清样品进行筛查。研究结果表明,表达有重组β_3整合素的CHO细胞可以用来检测母体血清中的抗HPA-1a同种(异型)抗体。
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关键词
人血小板抗原
同种(异型)抗体
流式细胞分析
基因分型
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职称材料
题名
人血小板多态性抗原HPA-1a/HPA-1b在CHO细胞中的表达及功能研究
1
作者
陈平
杨文
孙崇秀
秦朝平
Nelly Kieffer
机构
南京大学分子医学研究所医药生物技术国家重点实验室
湛江海洋
大学
农学院
卢森堡
大学
生物
与生理
实验室
出处
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期559-565,共7页
基金
江苏省自然科学基金(BK2002080)
文摘
为了在体外研究HPA-1抗原的多态性,同时建立一种更简便灵敏的检测抗HPA-1同种(异型)抗体的方法,将含有HPA-1a和HPA-1b的DNA质粒分别转染CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)并获得稳定表达β_3HPA-1a和β_3HPA-1b的细胞株。流式细胞分析结果表明,CHO细胞结合抗HPAPA-1a同种(异型)抗体的能力与细胞表面β_3整合素表达量直接相关。同时,针对HPA-1a表位的单克隆抗体SZ21仅能抑制CHOβ_3HPA-1a细胞的粘附,对 CHOβ_3HPA-1b细胞却没有影响。抗HPA-1a参照血清能阻断CHOβ_3HPA-1a细胞的粘附,但对CHOβ_3HPA-1b细胞却影响甚微。结果表明,CHO细胞模型可以成功地用来表达并研究HPA-1a的多态性及其抗原特性,同时可以作为用于临床检测抗HPA-1a同种(异型)抗体的一种替代方法。
关键词
人血小板抗原
HPA
整合素
同种(异型)抗体
Keywords
human platelet antigen
integrin
alloantibody
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
CHO-HPA-1a细胞快速检测人血小板同种(异型)抗体方法的建立
被引量：
1
2
作者
陈平
孙崇秀
杨文
秦朝平
Nelly Kieffer
机构
南京大学分子医学研究所医药生物技术国家重点实验室
湛江海洋
大学
农学院
卢森堡
大学
生物
与生理
实验室
出处
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期585-591,共7页
基金
江苏省自然科学基金(BK2002080)
文摘
应用蛋白印迹(WB)、悬浮细胞免疫荧光流式细胞分析(SIFT)、单抗分析血小板抗体检测(MAIPA)以及限制性内切酶片段长度分析对新生儿血小板减少患儿母体作基因分型和血清分型比较研究。从两例新生儿血小板减少症患儿母亲的血清中检测到了抗β_3抗体。CHO-SIFT方法的敏感性和MAIPA分析相似。和间接免疫荧光或MAIPA分析相比,WB分析法敏感性稍低,可能是SDS使HPA-1a抗原决定簇发生了改变。以较温和条件对CHO细胞进行固定时,不但细胞表面的HPA-1a抗原表位未受影响,而且细胞的保存时间被大大的延长。这些结果表明,作为分型血小板的替代物,固定化的细胞可能更适合于一般妇幼保健门诊对大量血清样品进行筛查。研究结果表明,表达有重组β_3整合素的CHO细胞可以用来检测母体血清中的抗HPA-1a同种(异型)抗体。
关键词
人血小板抗原
同种(异型)抗体
流式细胞分析
基因分型
Keywords
human platelet antigen
alloantibody
flow cytometry
gene typing
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人血小板多态性抗原HPA-1a/HPA-1b在CHO细胞中的表达及功能研究
陈平
杨文
孙崇秀
秦朝平
Nelly Kieffer
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
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职称材料
2
CHO-HPA-1a细胞快速检测人血小板同种(异型)抗体方法的建立
陈平
孙崇秀
杨文
秦朝平
Nelly Kieffer
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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