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肝细胞癌PD-1免疫治疗敏感性的靶基因分析
1
作者
史宇泽
丁可
孙倍成
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第8期1323-1329,1338,共8页
目的探究肝细胞癌(HCC)患者程序性死亡受体1(PD-1)免疫治疗敏感性的特征基因。方法通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)及差异性分析筛选与PD-1免疫治疗敏感性相关数据集GSE202069及ERP117672中共同差异基因,将上述共同差异基因通过Lass...
目的探究肝细胞癌(HCC)患者程序性死亡受体1(PD-1)免疫治疗敏感性的特征基因。方法通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)及差异性分析筛选与PD-1免疫治疗敏感性相关数据集GSE202069及ERP117672中共同差异基因,将上述共同差异基因通过Lasso回归筛选PD-1免疫治疗敏感性的特征基因;通过GEPIA及Ualcan数据库预测特征基因在HCC的表达水平,通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹(WB)及免疫组织化学染色(IHC)实验验证其表达。构建过表达3-羟基丁酸脱氢酶1(BDH1)细胞系,通过肿瘤功能学实验细胞计数试剂盒8(CCK-8)、平板克隆、EdU染色、细胞划痕、Transwell实验探究其对肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果通过WGCNA及差异性分析筛选出两项数据集共有118个共同差异基因,Lasso回归筛选出共同差异基因中与PD-1免疫治疗敏感性特征基因(含黄素二甲基苯胺单加氧酶3(FMO3),过氧化物酶体反式-2-烯酰辅酶A还原酶(PECR),BDH1,溶质载体家族7成员1(SLC7A1),细胞色素b5 A型(CYB5A)和磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1(PCK1));生存分析表明BDH1与HCC最为相关(总体生存率:P<0.001;复发:P=0.007)。GEPIA及Ualcan数据库分析显示BDH1在HCC组织中低表达,通过RT-qPCR、WB及IHC对本中心收集的HCC样本进一步证实BDH1在HCC中低表达。CCK-8、平板克隆、EdU染色、细胞划痕、Transwell实验结果显示,与Hep3B pCDH组相比,过表达BDH1使得HCC细胞吸光度降低(t=4.766,P<0.01),克隆形成数目减少(t=16.02,P<0.0001),增殖细胞比例下降(t=23.13,P<0.0001),细胞迁移率减慢(t=25.28,P<0.0001),穿过小室数目减少(t=10.78,P=0.004)。结论BDH1是观察HCC患者PD-1免疫治疗敏感性的特征基因;BDH1具有抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭的能力。
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关键词
肝细胞癌
PD-1免疫治疗
BDH1
肿瘤功能学实验
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职称材料
可调控胆管良性狭窄动物模型的实验研究
被引量:
1
2
作者
怀聪
潘军平
+1 位作者
朱新华
吴亚夫
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017年第7期740-745,共6页
目的目前对胆管良性狭窄动物模型的研究尚少。探讨建立可调控胆管良性狭窄动物模型的方法。方法小型猪按随机数字表法分为假手术组、传统手术组、小口径组、大口径组,每组6只。其中小口径组以外径3.0 mm导管置入胆总管后行部分缝扎;大...
目的目前对胆管良性狭窄动物模型的研究尚少。探讨建立可调控胆管良性狭窄动物模型的方法。方法小型猪按随机数字表法分为假手术组、传统手术组、小口径组、大口径组,每组6只。其中小口径组以外径3.0 mm导管置入胆总管后行部分缝扎;大口径组以外径6.0 mm导管置入胆总管后行部分缝扎。传统手术组用5-0可吸收线对胆管下段部分缝扎,大致目视下控制狭窄程度。假手术组仅暴露胆管,未行缝扎处理。术后观察4组动物的一般状况;术后1,3,7,14,21,28 d检测肝功能水平;术后30 d行经胆囊胆道造影;造影术后所有猪均处死,解剖观察肝及胆管组织学变化情况。结果假手术组肝功能水平于整个观察期内未见明显变化。术后第28天,与传统手术组比较,小口径组肝酶检测指标ALT、AST、γ-GT、ALP、胆红素水平升高(P<0.05);大口径组肝酶检测指标ALT、AST、γ-GT、胆红素水平升高(P<0.05),而大口径组较小口径组ALP水平降低(P<0.05)。胆管造影示:小口径组6只猪胆管内明显可见不同程度狭窄,平均直径2.7 mm(2~4 mm);大口径组有5只猪可见明显管腔狭窄,狭窄段胆管直径为平均5.5 mm(5~7 mm),传统手术组有3只猪未见明显管腔狭窄,假手术组6只猪均无胆管狭窄形成。根据设计的狭窄形成标准,小口径组、大口径组狭窄成功率均高于传统手术组(P<0.05)。术后30 d小口径组6只猪均出现腹腔粘连,肝肿大,肝内胆管明显扩张,胆囊扩张可达原来5~6倍。大口径组5只猪肝肿大,肝内胆管轻度扩张,胆囊扩张明显,胆总管水肿明显,缝扎部位组织增厚,胆管可见狭窄。HE染色见小口径组肝细胞点状变性坏死,肝内小胆管呈扩张淤胆状态,肝细胞肿胀,出现纤维隔;大口径组可见肝内小胆管呈轻度扩张状态,肝细胞排列基本正常。VG染色见小口径组胆管黏膜细胞外胶原纤维沉积过度,排列杂乱而较密,形状不规则。大口径组胆管黏膜下胶原纤维增多,排列致密呈条带状。结论此模型具有手术成功率高,并发症少等优点,是较为理想的胆管良性狭窄大动物模型。
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关键词
良性胆管狭窄
巴马小型猪
黄疽
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职称材料
新型携氧纳米粒人工灌注液用于猪心死亡后供肝常温灌注保存
被引量:
2
3
作者
陈鸣
陈显成
+5 位作者
王经琳
任昊桢
曹科
程旻桦
虞文魁
丁义涛
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期697-706,共10页
目的:探讨以全氟萘烷白蛋白纳米粒作为携氧物的人工灌注液用于猪心死亡后供肝常温机器灌注(NMP)保存的效果。方法:制备全氟萘烷白蛋白纳米粒,按照5%白蛋白(w/v)配成人工灌注液并测试其载氧能力。16只长白猪的肝脏在热缺血1h后取出,随后...
目的:探讨以全氟萘烷白蛋白纳米粒作为携氧物的人工灌注液用于猪心死亡后供肝常温机器灌注(NMP)保存的效果。方法:制备全氟萘烷白蛋白纳米粒,按照5%白蛋白(w/v)配成人工灌注液并测试其载氧能力。16只长白猪的肝脏在热缺血1h后取出,随后均分为四组,用不同的保存方法连续保存24h:UW液冷保存(静态冷保存组)及动物自体血(全血NMP组)、含5%白蛋白(w/v)的平衡盐液(非携氧纳米粒NMP组)和全氟萘烷白蛋白纳米粒灌注液(携氧纳米粒NMP组)保存。灌注开始后每4h监测血流动力学、代谢、灌注液和胆汁的生化指标。在保存前、保存12和24h后分别收集肝组织标本行苏木精-伊红染色和TUNEL检测观察。结果:每100mL人工灌注液中全氟萘烷白蛋白纳米粒的载氧能力为6.94μL/mmHg(1mmHg=0.133kPa)。灌注过程中携氧纳米粒NMP组和全血NMP组肝动脉和门静脉循环阻力保持稳定,且携氧纳米粒NMP组循环阻力低于全血NMP组;两组灌注液乳酸浓度均在8h内降至正常范围;灌注开始后各监测时间点携氧纳米粒NMP组和全血NMP组灌注液丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶水平和累计胆汁产量差异均无统计学意义(均P>0.05)。灌注24h后全血NMP组和携氧纳米粒NMP组的肝组织Suzuki评分均低于静态冷保存组和非携氧纳米粒NMP组(均P<0.05),灌注12、24h后全血NMP组和非携氧纳米粒NMP组TUNEL染色阳性细胞数明显高于携氧纳米粒NMP组和静态冷保存组(均P<0.05)。结论:含全氟萘烷白蛋白纳米粒的人工灌注液可以满足NMP保存时猪心死亡后供肝的氧耗需求,其保存效果与血液相当,在改善组织微循环和减轻缺血再灌注损伤方面可能更具优势。
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关键词
常温机器灌注
人工灌注液
携氧纳米粒
心死亡供肝
缺血再灌注损伤
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职称材料
嵌合抗原受体NK细胞治疗肝细胞癌的研究进展
被引量:
2
4
作者
刘思远
陈琳
+3 位作者
夏安亮
朱明明
孙美玲
孙倍成
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2023年第5期595-603,647,共10页
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌。在过去十年中,HCC治疗领域最令人瞩目的当属新型免疫疗法的蓬勃发展。自然杀伤(natural killer,NK)细胞是免疫系统的一员,在抗肿瘤免疫中发挥着至关重要的作用。嵌合抗原...
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌。在过去十年中,HCC治疗领域最令人瞩目的当属新型免疫疗法的蓬勃发展。自然杀伤(natural killer,NK)细胞是免疫系统的一员,在抗肿瘤免疫中发挥着至关重要的作用。嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-NK细胞疗法是一种新型的肿瘤免疫疗法,通过基因工程技术使NK细胞能够特异性识别肿瘤相关抗原,从而更精准高效地发挥抗肿瘤作用。本篇综述通过关注CAR-NK的靶点和相关免疫检查点,总结了CAR-NK在HCC治疗中面临的挑战及一些可能的解决方案,并讨论了提高CAR-NK疗效的潜在策略。
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关键词
嵌合抗原受体
自然杀伤细胞
肝细胞癌
免疫疗法
免疫检查点
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职称材料
题名
肝细胞癌PD-1免疫治疗敏感性的靶基因分析
1
作者
史宇泽
丁可
孙倍成
机构
南京
大学
医学院
附属
鼓楼
医院
肝胆
外科
安徽
医科大
学第一附属医院
肝胆
胰及移植
外科
南京医科大学鼓楼临床医学院肝胆外科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第8期1323-1329,1338,共8页
基金
国家自然科学基金(编号:81930086、82120108012)
安徽省高校科研项目(编号:2022AH010070)
安徽省临床医学研究转化专项(编号:202204295107020008)。
文摘
目的探究肝细胞癌(HCC)患者程序性死亡受体1(PD-1)免疫治疗敏感性的特征基因。方法通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)及差异性分析筛选与PD-1免疫治疗敏感性相关数据集GSE202069及ERP117672中共同差异基因,将上述共同差异基因通过Lasso回归筛选PD-1免疫治疗敏感性的特征基因;通过GEPIA及Ualcan数据库预测特征基因在HCC的表达水平,通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹(WB)及免疫组织化学染色(IHC)实验验证其表达。构建过表达3-羟基丁酸脱氢酶1(BDH1)细胞系,通过肿瘤功能学实验细胞计数试剂盒8(CCK-8)、平板克隆、EdU染色、细胞划痕、Transwell实验探究其对肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果通过WGCNA及差异性分析筛选出两项数据集共有118个共同差异基因,Lasso回归筛选出共同差异基因中与PD-1免疫治疗敏感性特征基因(含黄素二甲基苯胺单加氧酶3(FMO3),过氧化物酶体反式-2-烯酰辅酶A还原酶(PECR),BDH1,溶质载体家族7成员1(SLC7A1),细胞色素b5 A型(CYB5A)和磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1(PCK1));生存分析表明BDH1与HCC最为相关(总体生存率:P<0.001;复发:P=0.007)。GEPIA及Ualcan数据库分析显示BDH1在HCC组织中低表达,通过RT-qPCR、WB及IHC对本中心收集的HCC样本进一步证实BDH1在HCC中低表达。CCK-8、平板克隆、EdU染色、细胞划痕、Transwell实验结果显示,与Hep3B pCDH组相比,过表达BDH1使得HCC细胞吸光度降低(t=4.766,P<0.01),克隆形成数目减少(t=16.02,P<0.0001),增殖细胞比例下降(t=23.13,P<0.0001),细胞迁移率减慢(t=25.28,P<0.0001),穿过小室数目减少(t=10.78,P=0.004)。结论BDH1是观察HCC患者PD-1免疫治疗敏感性的特征基因;BDH1具有抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭的能力。
关键词
肝细胞癌
PD-1免疫治疗
BDH1
肿瘤功能学实验
Keywords
hepatocellular carcinoma
PD-1 immunotherapy
BDH1
tumor function experiment
分类号
R657.3 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
可调控胆管良性狭窄动物模型的实验研究
被引量:
1
2
作者
怀聪
潘军平
朱新华
吴亚夫
机构
南京医科大学鼓楼临床医学院肝胆外科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017年第7期740-745,共6页
文摘
目的目前对胆管良性狭窄动物模型的研究尚少。探讨建立可调控胆管良性狭窄动物模型的方法。方法小型猪按随机数字表法分为假手术组、传统手术组、小口径组、大口径组,每组6只。其中小口径组以外径3.0 mm导管置入胆总管后行部分缝扎;大口径组以外径6.0 mm导管置入胆总管后行部分缝扎。传统手术组用5-0可吸收线对胆管下段部分缝扎,大致目视下控制狭窄程度。假手术组仅暴露胆管,未行缝扎处理。术后观察4组动物的一般状况;术后1,3,7,14,21,28 d检测肝功能水平;术后30 d行经胆囊胆道造影;造影术后所有猪均处死,解剖观察肝及胆管组织学变化情况。结果假手术组肝功能水平于整个观察期内未见明显变化。术后第28天,与传统手术组比较,小口径组肝酶检测指标ALT、AST、γ-GT、ALP、胆红素水平升高(P<0.05);大口径组肝酶检测指标ALT、AST、γ-GT、胆红素水平升高(P<0.05),而大口径组较小口径组ALP水平降低(P<0.05)。胆管造影示:小口径组6只猪胆管内明显可见不同程度狭窄,平均直径2.7 mm(2~4 mm);大口径组有5只猪可见明显管腔狭窄,狭窄段胆管直径为平均5.5 mm(5~7 mm),传统手术组有3只猪未见明显管腔狭窄,假手术组6只猪均无胆管狭窄形成。根据设计的狭窄形成标准,小口径组、大口径组狭窄成功率均高于传统手术组(P<0.05)。术后30 d小口径组6只猪均出现腹腔粘连,肝肿大,肝内胆管明显扩张,胆囊扩张可达原来5~6倍。大口径组5只猪肝肿大,肝内胆管轻度扩张,胆囊扩张明显,胆总管水肿明显,缝扎部位组织增厚,胆管可见狭窄。HE染色见小口径组肝细胞点状变性坏死,肝内小胆管呈扩张淤胆状态,肝细胞肿胀,出现纤维隔;大口径组可见肝内小胆管呈轻度扩张状态,肝细胞排列基本正常。VG染色见小口径组胆管黏膜细胞外胶原纤维沉积过度,排列杂乱而较密,形状不规则。大口径组胆管黏膜下胶原纤维增多,排列致密呈条带状。结论此模型具有手术成功率高,并发症少等优点,是较为理想的胆管良性狭窄大动物模型。
关键词
良性胆管狭窄
巴马小型猪
黄疽
Keywords
Benign bile stricture
Ba-ma miniature pig
Jaundice
分类号
R657.46 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
新型携氧纳米粒人工灌注液用于猪心死亡后供肝常温灌注保存
被引量:
2
3
作者
陈鸣
陈显成
王经琳
任昊桢
曹科
程旻桦
虞文魁
丁义涛
机构
南京医科大学
鼓楼
临床
医学院
重症
医学
科
南京医科大学鼓楼临床医学院肝胆外科
出处
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期697-706,共10页
基金
国家重大科研仪器研制项目(81927808)
江苏省重点研究计划(BE2108700)。
文摘
目的:探讨以全氟萘烷白蛋白纳米粒作为携氧物的人工灌注液用于猪心死亡后供肝常温机器灌注(NMP)保存的效果。方法:制备全氟萘烷白蛋白纳米粒,按照5%白蛋白(w/v)配成人工灌注液并测试其载氧能力。16只长白猪的肝脏在热缺血1h后取出,随后均分为四组,用不同的保存方法连续保存24h:UW液冷保存(静态冷保存组)及动物自体血(全血NMP组)、含5%白蛋白(w/v)的平衡盐液(非携氧纳米粒NMP组)和全氟萘烷白蛋白纳米粒灌注液(携氧纳米粒NMP组)保存。灌注开始后每4h监测血流动力学、代谢、灌注液和胆汁的生化指标。在保存前、保存12和24h后分别收集肝组织标本行苏木精-伊红染色和TUNEL检测观察。结果:每100mL人工灌注液中全氟萘烷白蛋白纳米粒的载氧能力为6.94μL/mmHg(1mmHg=0.133kPa)。灌注过程中携氧纳米粒NMP组和全血NMP组肝动脉和门静脉循环阻力保持稳定,且携氧纳米粒NMP组循环阻力低于全血NMP组;两组灌注液乳酸浓度均在8h内降至正常范围;灌注开始后各监测时间点携氧纳米粒NMP组和全血NMP组灌注液丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶水平和累计胆汁产量差异均无统计学意义(均P>0.05)。灌注24h后全血NMP组和携氧纳米粒NMP组的肝组织Suzuki评分均低于静态冷保存组和非携氧纳米粒NMP组(均P<0.05),灌注12、24h后全血NMP组和非携氧纳米粒NMP组TUNEL染色阳性细胞数明显高于携氧纳米粒NMP组和静态冷保存组(均P<0.05)。结论:含全氟萘烷白蛋白纳米粒的人工灌注液可以满足NMP保存时猪心死亡后供肝的氧耗需求,其保存效果与血液相当,在改善组织微循环和减轻缺血再灌注损伤方面可能更具优势。
关键词
常温机器灌注
人工灌注液
携氧纳米粒
心死亡供肝
缺血再灌注损伤
Keywords
Normothermic machine perfusion
Artificial perfusate
Oxygen-carrying nanoparticles
Donor livers after cardiac death
Ischemia-reperfusion injury
分类号
R657.3 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
嵌合抗原受体NK细胞治疗肝细胞癌的研究进展
被引量:
2
4
作者
刘思远
陈琳
夏安亮
朱明明
孙美玲
孙倍成
机构
南京医科大学鼓楼临床医学院肝胆外科
出处
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2023年第5期595-603,647,共10页
基金
江苏省社会发展项目-临床前沿技术(BE2018603)。
文摘
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌。在过去十年中,HCC治疗领域最令人瞩目的当属新型免疫疗法的蓬勃发展。自然杀伤(natural killer,NK)细胞是免疫系统的一员,在抗肿瘤免疫中发挥着至关重要的作用。嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-NK细胞疗法是一种新型的肿瘤免疫疗法,通过基因工程技术使NK细胞能够特异性识别肿瘤相关抗原,从而更精准高效地发挥抗肿瘤作用。本篇综述通过关注CAR-NK的靶点和相关免疫检查点,总结了CAR-NK在HCC治疗中面临的挑战及一些可能的解决方案,并讨论了提高CAR-NK疗效的潜在策略。
关键词
嵌合抗原受体
自然杀伤细胞
肝细胞癌
免疫疗法
免疫检查点
Keywords
chimeric antigen receptor
natural killer cell
hepatocellular carcinoma
immunotherapy
immune checkpoint
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肝细胞癌PD-1免疫治疗敏感性的靶基因分析
史宇泽
丁可
孙倍成
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024
0
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职称材料
2
可调控胆管良性狭窄动物模型的实验研究
怀聪
潘军平
朱新华
吴亚夫
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2017
1
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职称材料
3
新型携氧纳米粒人工灌注液用于猪心死亡后供肝常温灌注保存
陈鸣
陈显成
王经琳
任昊桢
曹科
程旻桦
虞文魁
丁义涛
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
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职称材料
4
嵌合抗原受体NK细胞治疗肝细胞癌的研究进展
刘思远
陈琳
夏安亮
朱明明
孙美玲
孙倍成
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
北大核心
2023
2
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职称材料
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