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利用CRISPER/Cas9技术构建肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠 被引量：1
1
作者 张芙蓉 苟黎明 +5 位作者 李妍 王泽勇 杨斐 吴菁 覃健 薛斌 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第10期1366-1371,共6页
目的:通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术构建卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(lecithin⁃cholesterol acyltransferase,LCAT)基因敲入C57BL/6小鼠并与肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠配繁得到肝脏特异性敲入Lcat基因C57BL/6小鼠模型。为Lcat基因... 目的:通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术构建卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(lecithin⁃cholesterol acyltransferase,LCAT)基因敲入C57BL/6小鼠并与肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠配繁得到肝脏特异性敲入Lcat基因C57BL/6小鼠模型。为Lcat基因在肝脏相关代谢疾病发生机制的研究提供动物模型。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Lcat基因敲入小鼠;利用肝脏特异性表达Cre的转基因小鼠与Lcat基因敲入小鼠交配得到肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠;通过PCR法鉴定小鼠的基因型;利用实时荧光定量PCR(real⁃time quantitative PCR,qPCR)和Western blot技术验证Lcat基因的mRNA水平和蛋白水平。结果:PCR结果显示肝脏特异性敲入Lcat基因的小鼠模型构建成功;qPCR结果显示Lcat基因在肝脏中特异性高表达;WB结果显示,与对照组小鼠相比,LCAT蛋白在肝脏特异性敲入Lcat的小鼠肝脏中有明显更高的表达。结论:成功构建肝脏特异性敲入Lcat基因小鼠,为在动物水平探索Lcat基因在肝脏相关代谢疾病中的功能及相关发病机制提供研究平台。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 LCAT 肝脏特异性 基因敲入
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