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大鼠原发性脑干损伤延脑淀粉样β蛋白及其蛋白前体的表达 被引量：3
1
作者 杨树东 孙荣超 +3 位作者 梁加贝 周志毅 穆会君 芮俊 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期411-414,共4页
目的探讨早期诊断原发性脑干损伤（PBSI）中弥散性轴索损伤（DAI）的敏感标记。方法应用免疫组织化学SP法及RT—PCR技术研究在大鼠原发性脑干损伤模型中，延脑DAI与淀粉样β蛋白（Aβ蛋白）的表达及淀粉样β前体蛋白（β—APP）mRNA的... 目的探讨早期诊断原发性脑干损伤（PBSI）中弥散性轴索损伤（DAI）的敏感标记。方法应用免疫组织化学SP法及RT—PCR技术研究在大鼠原发性脑干损伤模型中，延脑DAI与淀粉样β蛋白（Aβ蛋白）的表达及淀粉样β前体蛋白（β—APP）mRNA的半定量分析，以此来评估进行DAI早期诊断的有效性。结果免疫组化Aβ染色神经轴突测量3～24h损伤组，轴突明显增粗，并且稳步增加，与对照组相比差异均有统计学意义，并且与时间呈正相关，β—APP mRNA表达增加最早从1h损伤组开始，并于3h达到高峰。结论β—APP是DAI的敏感性和特异性标记，RT—PCR技术是一种快速的和敏感的方法，再结合免疫组化技术检测Aβ蛋白，可能对早期诊断DAI是非常有效的。 展开更多
关键词 轴索损伤 淀粉样Β蛋白 淀粉样β前体蛋白 逆转录-多聚酶链反应 免疫组织化学
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与胶原纤维的作用是Mller细胞黏附于玻璃体的主要机制 被引量：2
2
作者 陆融 姚勇 +1 位作者 乔伟振 赵伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期58-60,75,共4页
目的:观察Mller细胞在玻璃体凝胶上的黏附并分析其机制。方法:猪视网膜Mller细胞提取培养并以酸性纤维蛋白、波形蛋白和谷氨酰胺合成酶免疫荧光染色确认,分别与抗细胞表面胶原受体整联蛋白α2β1抗体、抗透明质酸受体CD44抗体培养后... 目的:观察Mller细胞在玻璃体凝胶上的黏附并分析其机制。方法:猪视网膜Mller细胞提取培养并以酸性纤维蛋白、波形蛋白和谷氨酰胺合成酶免疫荧光染色确认,分别与抗细胞表面胶原受体整联蛋白α2β1抗体、抗透明质酸受体CD44抗体培养后,播于新鲜玻璃体上培养2 h,以PBS冲洗3次后计数剩余细胞数目,并与未用抗体培养的对照组相比较。结果:所提取细胞97.7%胶质纤维酸性蛋白染色阳性,94.6%波形蛋白染色阳性,86.0%谷氨酰胺合成酶染色阳性。细胞在玻璃体上培养2 h后开始附着于玻璃体,培养72 h以后细胞增殖形成网状结构并进入玻璃体凝胶中;抗整联蛋白α2β1抗体可使剩余细胞较对照组显著减少,抗CD44抗体不产生明显差异。结论:Mller细胞可黏附于玻璃体上,增殖并进入玻璃体凝胶,其表面胶原受体与玻璃体Ⅱ型胶原纤维的作用是其附着于玻璃体的主要机制。 展开更多
关键词 MÜLLER细胞 玻璃体 整联蛋白α2β1 CD44
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尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染3年分析 被引量：2
3
作者 浦洁 杨挺 张滨 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1305-1307,共3页
目的:对本院2010-2012年尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)感染现状进行分析,探讨HPV亚型的分布特点。方法:采用基因芯片检测法,对尖锐湿疣的皮损组织进行HPV检测和分型。结果:773例标本检出率为95.1%,依次为低危型HPV6、11、43、42和高危... 目的:对本院2010-2012年尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)感染现状进行分析,探讨HPV亚型的分布特点。方法:采用基因芯片检测法,对尖锐湿疣的皮损组织进行HPV检测和分型。结果:773例标本检出率为95.1%,依次为低危型HPV6、11、43、42和高危型HPV16、18、52、66、33。各年度HPV亚型分布变化不大。高危型占24.0%,混合感染占37.8%。30岁以内的患者发生高危型、混合感染显著增加。女性患者发生高危型HPV16、66高于男性。结论:HPV6、11、16型感染是尖锐湿疣发病的主要基因型,高危型感染和混合感染趋于年轻化。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒 基因型 基因芯片
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HCV不同编码区重组基因的蛋白表达丰度分析 被引量：1
4
作者 乔伟振 孟继鸿 +3 位作者 董晨 谢平 杨燕 李小雯 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期722-725,766,共5页
目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)不同基因片段重组载体在pET大肠杆菌系统中的蛋白表达情况。方法:分别将构建好的含有HCVC、NS3、NS5片段基因的pET重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,通过卡那霉素抗性筛选转化子。经过IPTG诱导表达相应的... 目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)不同基因片段重组载体在pET大肠杆菌系统中的蛋白表达情况。方法:分别将构建好的含有HCVC、NS3、NS5片段基因的pET重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,通过卡那霉素抗性筛选转化子。经过IPTG诱导表达相应的重组蛋白,通过Ni-NTA凝胶亲和层析纯化各目标蛋白,并分别计算各重组蛋白的浓度。结果:分别诱导表达含有HCVC、NS3、NS5片段基因的重组蛋白,各蛋白的浓度分别为:3.557(1型NS3)、4.238(6型NS3)、2.087(NS5)、1.490g/L(C)。结论:在相同条件下,诱导表达含有HCV不同基因片段的重组载体,所得到的蛋白丰度存在差异。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 pET系统 大肠杆菌 蛋白表达
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肾透明细胞癌中转化生长因子-β1、基质金属蛋白酶2表达及其临床意义的相关性研究 被引量：1
5
作者 杨树东 孙荣超 +7 位作者 穆会君 徐卓群 范钦和 张丽华 吴光斌 梁加贝 陈瑛 芮俊 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1037-1042,1060,共7页
目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP2)在肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma,RCCC)中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法测定80例RCCC及30例癌周组织中TGF-β1与MMP... 目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP2)在肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma,RCCC)中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法测定80例RCCC及30例癌周组织中TGF-β1与MMP2的表达,同时采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)测定43例RCCC及43例癌周组织中TGF-β1与MMP2基因的表达。结果:RCCC中TGF-β1、MMP2表达强度均明显高于癌周组织,TGF-β1、MMP2表达与RCCC病理分级、临床分期相关;RCCC中TGF-β1与MMP2表达强度具有相关性;单因素生存分析显示TGF-β1、MMP2高表达与患者预后不良有关(P均<0.05)。结论:TGF-β1、MMP2基因的表达参与了RCCC的发展,并且二者之间具有一定的相关性,提示可以作为判断RCCC预后的二个有效的联合分子指标。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 转化生长因子-Β1 基质金属蛋白酶-2 逆转录-多聚酶链反应 免疫组织化学
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视网膜Müller细胞透明质酸酶功能分析 被引量：1
6
作者 陆融 乔伟振 赵伟 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第6期538-540,共3页
目的分析离体培养的视网膜Müller细胞对透明质酸的降解功能。方法提取的Mller细胞来自酶降解的猪后极部视网膜,并以3种不同细胞标记:胶质纤维酸性蛋白、波形蛋白、谷氨酰胺合成酶进行免疫荧光确认。细胞分为4组,其中1组培养液中... 目的分析离体培养的视网膜Müller细胞对透明质酸的降解功能。方法提取的Mller细胞来自酶降解的猪后极部视网膜,并以3种不同细胞标记:胶质纤维酸性蛋白、波形蛋白、谷氨酰胺合成酶进行免疫荧光确认。细胞分为4组,其中1组培养液中加入透明质酸,2组培养液中加入透明质酸和抗integrinα2β1抗体,3组培养液中加入透明质酸和抗CD44抗体,4组培养液中未加入其他试剂。细胞预培养后,收集上清液。按配置聚丙烯酰胺凝胶的方法 ,加入透明质酸,不加入十二烷基硫酸钠制作底物胶。样品在底物胶电泳后,凝胶在酶降解缓冲液中培养24h,淋洗后以5g.L-1亮蓝染色、体积分数7%醋酸脱色,观察有无透明质酸降解后形成的脱色条带。结果 93.8%细胞胶质纤维酸性蛋白抗体染色阳性,94.6%细胞波形蛋白抗体染色阳性,88.6%细胞谷氨酰胺合成酶抗体染色阳性。培养的Mller细胞有降解透明质酸的功能,(4组)表现为蓝色背景(透明质酸染色)下的淡白色双条带(透明质酸降解后脱色);将细胞和透明质酸预培养可使脱色条带明显增厚,表现为明亮的白色条块(1组),同时加入透明质酸和integrinα2β1抗体产生相似的白色条块(2组),同时加入透明质酸和CD44抗体使脱色恢复为淡白色双条带(3组)。结论培养的Mller细胞有降解透明质酸的功能,细胞与透明质酸的相互作用明显加强细胞降解透明质酸的功能,CD44抗体可能减弱这种加强作用,integrinα2β1抗体无明显作用。 展开更多
关键词 MÜLLER细胞 透明质酸酶 底物胶
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Maspin基因在乳腺癌骨髓和外周血微小转移检测中的应用价值
7
作者 刘晓 郭榆江 +3 位作者 唐建英 张滨 谢平 黄燮民 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期488-491,共4页
目的:研究Maspin基因在乳腺癌患者骨髓和外周血微小转移检测中的应用价值以及骨髓和外周血Maspin mRNA表达与乳腺癌临床病理因素之间的相关性。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链反应检测10例良性乳腺疾病患者和41例乳腺癌患者骨髓及外周血... 目的:研究Maspin基因在乳腺癌患者骨髓和外周血微小转移检测中的应用价值以及骨髓和外周血Maspin mRNA表达与乳腺癌临床病理因素之间的相关性。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链反应检测10例良性乳腺疾病患者和41例乳腺癌患者骨髓及外周血中Maspin mRNA的表达。结果:在10例对照组骨髓和外周血中均未检测出Maspin mRNA,而在乳腺癌患者骨髓和外周血中分别有15例(36.6%)和16例(39%)检测到Maspin mRNA。骨髓和外周血中Maspin mRNA检测结果的符合率为87.8%,检测结果有相关性(χ2=22.563,P=0.000,R=0.742)。乳腺癌患者骨髓和外周血中Maspin mRNA表达率随病理分期升高、淋巴结转移、临床分期进展而升高,但均无显著性差异。如将患者按复发风险分组,高危组患者骨髓和外周血中Maspin mRNA表达率明显升高,但仅在骨髓中显示有显著性差异(χ2=6.621,P=0.037),而在外周血中无显著性差异(χ2=5.904,P=0.052)。结论:Maspin基因用于乳腺癌患者骨髓和外周血微小转移的检测具有很高的特异性,乳腺癌患者骨髓和外周血中Maspin mRNA表达可能与高危复发风险相关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 MASPIN基因 骨髓 外周血 微小转移 逆转录-聚合酶链反应
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乳腺癌组织中microRNA-145表达情况及预后价值
8
作者 刘晓 秦安 +2 位作者 储春强 张广林 穆会君 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期239-241,246,共4页
目的:探讨microRNA-145(miR-145)在乳腺癌组织中表达的预后价值。方法:采用定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测60例乳腺癌患者癌组织和邻近正常组织中miR-145、胰岛... 目的:探讨microRNA-145(miR-145)在乳腺癌组织中表达的预后价值。方法:采用定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测60例乳腺癌患者癌组织和邻近正常组织中miR-145、胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF1R)m RNA、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)mRNA水平。采用Spearman等级相关分析法检验miR-145与患者临床病理特征之间相关性,采用Kaplan-Meier曲线法分析乳腺癌患者无病生存期(disease-free survival,DFS),并用Log-rank法和Cox回归分析法进行检验。结果:乳腺癌组织中miR-145水平为4.15±1.37,低于邻近正常组织(5.66±1.59,P<0.001)。乳腺癌组织中miR-145水平与患者临床病理特征之间无相关性(P>0.05)。乳腺癌组织中miR-145水平与IGF1R m RNA(r=-0.455,P=0.003)、IRS-1 mRNA(r=-0.357,P=0.005)水平呈负相关。Kaplan-Meier曲线显示miR-145低表达组患者DFS低于高表达组患者(P=0.011)。单变量、多变量Cox回归分析显示肿瘤大小(P=0.015)、肿瘤分期(P=0.001)、人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)(P=0.050)、miR-145(P=0.001)是独立预后因素。结论:乳腺癌组织中miR-145水平下调,且是乳腺癌独立的正性预后因子。 展开更多
关键词 乳腺癌 MICRORNA 145 预后因子
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Vinculin和α-平滑肌肌动蛋白在视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞中的表达
9
作者 陆融 乔伟振 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第12期1130-1132,共3页
目的分析vinculin和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞中的表达。方法手术中取得视网膜前膜共17例,选取倒置相差显微镜下易于展开和辨别细胞形态的组织5例,清洗展开固定后,以单克隆抗v... 目的分析vinculin和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞中的表达。方法手术中取得视网膜前膜共17例,选取倒置相差显微镜下易于展开和辨别细胞形态的组织5例,清洗展开固定后,以单克隆抗vin-于明胶涂层的盖玻片上培养,将迁出的细胞培养传代,免疫荧光染色后在荧光显微镜下观察。结果术中取得的视网膜前膜细胞抗vinculin和α-SMA抗体染色阳性。12例视网膜前膜组织中,7例培养24h后细胞从组织迁移至明胶涂层的盖玻片上并增殖,其中4例可培养至第2代,4例中2例可培养至第3代,这些细胞抗vinculin和抗α-SMA抗体染色均呈阳性。结论术中剥离的视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞均表达vinculin和α-SMA,提示这些细胞具有较强且较恒定的收缩能力。 展开更多
关键词 VINCULIN Α-平滑肌肌动蛋白 视网膜前膜
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糖尿病与肝外胆管癌发病关系的Meta分析 被引量：3
10
作者 刘春兴 邹健 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期834-837,共4页
目的:用Meta分析法探讨糖尿病是否增加肝外胆管癌发病风险。方法:利用中国学术期刊全文数据库、万方全文数据库及Medline,EMBASE数据库检索国内外公开发表的从建库至2010年9月的所有关于糖尿病与肝外胆管癌发病关系的中英文文献;利用随... 目的:用Meta分析法探讨糖尿病是否增加肝外胆管癌发病风险。方法:利用中国学术期刊全文数据库、万方全文数据库及Medline,EMBASE数据库检索国内外公开发表的从建库至2010年9月的所有关于糖尿病与肝外胆管癌发病关系的中英文文献;利用随机效应模型计算纳入文献的合并RR值及其95%CI值;进行亚组分析以探究异质性来源并分析出版偏倚。结果:纳入分析的文献共7篇(病例对照研究4篇,队列研究3篇)。经Meta分析,与未患糖尿病者相比,糖尿病患者肝外胆管癌发病的风险增加,相对风险值分别为OR=1.62(95%C1=1.05～2.49)(病例对照研究);RR=1.54(95%C1=1.06～2.23)(队列研究);亚组资料分析显示研究有显著异质性,但无明显发表偏倚(Egger检验,P=0.798;Begg检验,P=0.548)。结论:本研究提示糖尿病可能是肝外胆管癌的致病危险因素。 展开更多
关键词 糖尿病 肝外胆管癌 病例对照研究 队列研究 META分析
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