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STAT3基因沉默抑制人白血病细胞体外生长的实验研究 被引量:1
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作者 马玲娣 周民 +3 位作者 蒋丽佳 岑玲 范静 夏蕾 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期149-155,共7页
目的:构建人STAT3 shRNA(short hairpin RNA)慢病毒载体,研究慢病毒介导的STAT3 SiRNA(small interferenceRNA)对人慢性粒细胞白血病K562细胞体外生长特性的影响。方法:针对STAT3基因RNAi有效靶点构建STAT3 shRNA慢病毒载体,293T细胞内... 目的:构建人STAT3 shRNA(short hairpin RNA)慢病毒载体,研究慢病毒介导的STAT3 SiRNA(small interferenceRNA)对人慢性粒细胞白血病K562细胞体外生长特性的影响。方法:针对STAT3基因RNAi有效靶点构建STAT3 shRNA慢病毒载体,293T细胞内包装产生STAT3 SiRNA慢病毒,感染K562细胞后RT-PCR和Western-blot方法验证STAT3基因的敲减效率;细胞生长曲线和MTT法观察STAT3敲减后K562细胞体外生长和增殖情况;流式细胞术和Annexin V-FITC/PI法检测细胞周期改变和早期凋亡。结果:成功得到STAT3 SiRNA慢病毒,RT-PCR和Western-blot实验证实,针对其中两个靶点的STAT3 SiRNA对STAT3基因的敲减效率均在70%以上(P<0.05)。STAT3敲减后,K562细胞生长变慢,细胞增殖活性降低40%(P<0.05);细胞阻滞于G1→S期,并出现早期凋亡。结论:STAT3 SiRNA慢病毒可有效抑制K562细胞内STAT3基因表达,使细胞生长增殖受抑,细胞周期阻滞,细胞出现早期凋亡。 展开更多
关键词 STAT3基因 RNA干扰 慢病毒 K562细胞 凋亡
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苦参碱抗肿瘤作用及其机制的初步研究 被引量:27
2
作者 马玲娣 张彦 +4 位作者 文世宏 何於娟 刘小珊 康格非 蒋纪恺 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期434-437,共4页
目的:研究中药苦参碱(Matrine)的抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法:MTT比色法检测肿瘤细胞的生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期的改变。建立荷瘤小鼠模型,观察小鼠肿瘤的生长情况,计算肿瘤生长抑制率;MTT法测定苦参碱对荷瘤小鼠PBMC体... 目的:研究中药苦参碱(Matrine)的抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法:MTT比色法检测肿瘤细胞的生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期的改变。建立荷瘤小鼠模型,观察小鼠肿瘤的生长情况,计算肿瘤生长抑制率;MTT法测定苦参碱对荷瘤小鼠PBMC体外增殖作用的影响;ELISA法检测苦参碱治疗后小鼠血清中IL-2和IL-12的活性。结果:苦参碱可显著抑制小鼠肿瘤细胞的体外分裂和增殖,且抑制作用呈浓度和时间依赖性,使G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞增殖指数降低。苦参碱对小鼠实体瘤生长具有显著抑制作用,抑瘤率高达60.7%以上;明显抑制小鼠静止PBMC的体外增殖作用;不能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和IL-12的含量。结论:苦参碱具有较强的抗肿瘤作用,体内体外却表现出一定的免疫抑制作用,提高机体的免疫功能不是苦参碱发挥抗癌活性的主要机制。 展开更多
关键词 苦参碱 肿瘤 免疫调节
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慢性阻塞性肺疾病患者血清白三烯和α_1-抗胰蛋白酶的变化 被引量:24
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作者 俞小卫 韦国桢 +2 位作者 林亚媛 吴秀梅 周仪顺 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期182-184,共3页
关键词 阻塞性肺疾病 白三烯 Α1-抗胰蛋白酶
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支原体快速培养诊断儿童肺炎支原体感染的临床研究 被引量:4
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作者 董燕芬 范静 +2 位作者 刘乾 夏蕾 马玲娣 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1481-1484,1490,共5页
目的:探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)快速培养法在诊断儿童MP感染中的临床价值,并分析其影响因素。方法:MP快速培养鉴定患儿咽试子标本,被动凝集法检测血清MP抗体(MP-Ab),分析MP感染的相关临床因素。结果:MP快速培养与MP-Ab... 目的:探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)快速培养法在诊断儿童MP感染中的临床价值,并分析其影响因素。方法:MP快速培养鉴定患儿咽试子标本,被动凝集法检测血清MP抗体(MP-Ab),分析MP感染的相关临床因素。结果:MP快速培养与MP-Ab检测诊断MP感染的阳性率基本一致,差异无统计学意义(P=0.556)。女性儿童MP培养的阳性率(46.26%)略高于男性(42.16%)。3~5岁幼儿的MP培养阳性率(54.05%)明显高于其他各组(P<0.001)。冬、春季MP培养阳性率分别为48.05%和49.03%,显著高于夏秋两季(26.26%和36.97%,P<0.001)。MP感染患儿体温增高、咳嗽、咳痰等症状与MP培养结果无明显相关性,血液常规分析中性粒细胞比值显著上升,与其他呼吸道感染相似,尚不能作为诊断MP感染的独立指证。结论:MP感染冬春易发,儿童易感。MP感染缺乏特异的临床症状和体征,MP快速培养对早期快速诊断儿童MP感染具有重要临床价值和意义。 展开更多
关键词 肺炎支原体 快速液体培养 早期诊断 抗体检测
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小鼠TIM2基因真核表达载体的构建及鉴定 被引量:2
5
作者 马玲娣 张彦 +4 位作者 文世宏 何於娟 刘小珊 康格非 蒋纪恺 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期713-715,共3页
目的:构建真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠肝癌细胞系H22中进行表达。方法:用RT-PCR法扩增得到TIM2基因,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并进行BamHI及BglⅡ双酶切鉴定和测序。通过脂质体法转染H22细胞,用RT-PCR法检测H2... 目的:构建真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠肝癌细胞系H22中进行表达。方法:用RT-PCR法扩增得到TIM2基因,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并进行BamHI及BglⅡ双酶切鉴定和测序。通过脂质体法转染H22细胞,用RT-PCR法检测H22细胞中TIM2mRNA的表达。结果:构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,用脂质体法转染H22细胞后,用荧光显微镜观察和RT-PCR法检测,可见细胞内有EGFP及TIM2mRNA的表达。结论:成功地构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠H22细胞中表达,为进一步研究TIM2在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 T细胞免疫球蛋白和黏蚩白结构域分子2 增强型绿色荧光蛋白 真核表达载体 小鼠H22肝癌细胞
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急性心肌梗死患者血管紧张素Ⅱ水平对外周血内皮祖细胞的影响 被引量:2
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作者 朱傲霜 丁志坚 +2 位作者 卢绪章 夏蕾 李海燕 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1565-1569,共5页
目的:急性心肌梗死(acute myocardial infraction,AMI)患者外周血中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,Ang-Ⅱ)水平对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的数目变化的影响。方法:入选的28例AMI患者(实验组)和30例冠状动脉造影阴... 目的:急性心肌梗死(acute myocardial infraction,AMI)患者外周血中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,Ang-Ⅱ)水平对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的数目变化的影响。方法:入选的28例AMI患者(实验组)和30例冠状动脉造影阴性患者(对照组),用ELISA法检测AMI患者急性期、恢复期以及对照组血清中Ang-Ⅱ、基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)的水平,同时用密度梯度离心法获得单个核细胞,用CD34、VEGF和CD133抗体标定EPCs,用流式细胞仪检测外周血中EPCs占单个核细胞的比率。结果:AMI患者急性期Ang-Ⅱ水平(90.40±6.39)pg/ml明显高于恢复期(72.57±2.42)pg/ml和对照组(69.14±3.73)pg/ml(P=0.002 4),同时AMI患者急性期EPCs占外周血单个核细胞的比率为为(0.043±0.004)%,明显高于恢复期(0.024±0.010)%和对照组(0.012±0.001)%(P<0.000 1),但AMI患者急性期SDF-1α的水平(171.1±35.81)pg/ml同恢复期(130.30±28.84)pg/ml及对照组(116.50±29.19)pg/ml之间无明显差异(P=0.370 3)。在AMI患者急性期外周血中EPCs和Ang-Ⅱ水平呈负相关,而与SDF-1α水平无明显相关性。结论:AMI患者急性期循环中的Ang-Ⅱ水平及EPCs数量均升高,但是Ang-Ⅱ抑制了EPCs的数量。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 血管紧张素Ⅱ 内皮祖细胞
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TRAIL分子靶点在肺癌治疗中的研究及应用 被引量:3
7
作者 刘乾 马玲娣 王勇 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第3期252-255,共4页
目前肺癌的发病率在全球范围内呈持续上升的趋势。在中国,肺癌的发病率和死亡率在所有肿瘤中是最高的。肺癌患者中,只有30%的非小细胞肺癌可以通过外科手术切除,但手术后5年存活率很低,生活质量也不高,晚期不能手术的患者通常只... 目前肺癌的发病率在全球范围内呈持续上升的趋势。在中国,肺癌的发病率和死亡率在所有肿瘤中是最高的。肺癌患者中,只有30%的非小细胞肺癌可以通过外科手术切除,但手术后5年存活率很低,生活质量也不高,晚期不能手术的患者通常只能采用常规化疗或放疗,毒副作用大,疗效不理想。因此,寻找新的肺癌治疗手段是目前亟待解决的难题。 展开更多
关键词 肺癌患者 TRAIL 分子靶点 治疗 外科手术切除 非小细胞肺癌 5年存活率 生活质量
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内皮一氧化氮合酶基因多态性与先天性心脏病易感性的研究 被引量:1
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作者 黄伟聪 顾海勇 +3 位作者 旷文安 张辉 刘瑞平 孙成超 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第5期745-747,共3页
目的:研究中国汉族人群中内皮一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)rs1799983G>T基因多态性与先天性心脏病易感性的关系。方法:采用以医院为基础的病例-对照研究,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assi... 目的:研究中国汉族人群中内皮一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)rs1799983G>T基因多态性与先天性心脏病易感性的关系。方法:采用以医院为基础的病例-对照研究,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOFMS)技术分析120例法洛四联症(tetralogy of fallot,TOF)患者(TOF组)、124例大动脉转位(transposition of the great arteries,TGA)患者(TGA组)和136例非先天性疾病患者(对照组)eNOSrs1799983G>T基因多态性,计算各种基因型的先天性心脏病发生风险及其95%可信区间。结果:eNOSrs1799983G>T基因多态三种基因型GG、GT、TT在TOF组、TGA组和对照组的频率分别为77.1%(GG)、21.2%(GT)、1.7%(TT),80.5%(GG)、19.5%(GT)、0%(TT)和82.2%(GG)、17.8%(GT)、0%(TT),Logistic回归分析发现与携带eNOSrs1799983GG基因型的个体相比较,携带eNOSrs1799983GT等位基因型与TOF和TGA的发病风险无明显相关[(OR=1.27,95%CI=0.68~2.37)和(OR=1.12,95%CI=0.60~2.10)]。结论:eNOSrs1799983G>T基因多态性可能不是先天性心脏病发生的危险因素,需要进一步研究证实。 展开更多
关键词 心脏缺损 先天性 ENOS 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 单核苷酸多态性
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柯萨奇和腺病毒受体在非小细胞肺癌组织中的表达及意义
9
作者 王仕忠 马玲娣 +3 位作者 关乃富 鲍永仪 倪诚 王勇 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期481-484,共4页
目的研究柯萨奇和腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)在非小细胞肺癌组织中的表达及意义。方法用特异性CAR72抗体通过免疫组化EnVision法在存档石蜡样本中研究CAR在非小细胞肺癌组织中的表达。结果14例非肿瘤肺组织... 目的研究柯萨奇和腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)在非小细胞肺癌组织中的表达及意义。方法用特异性CAR72抗体通过免疫组化EnVision法在存档石蜡样本中研究CAR在非小细胞肺癌组织中的表达。结果14例非肿瘤肺组织全部无CAR表达,51例鳞癌中42例有CAR表达,不同病理分级肺癌细胞中(5例穿刺标本未作病理分级),CAR表达分别为分化好(Ⅰ-Ⅱ级)有20例(20/26)表达,分化差(Ⅲ-Ⅳ级)有17例(17/20)表达。在41例肺腺癌中仅有15例有CAR表达,不同病理分级肺癌细胞中(3例穿刺标本未作病理分级),CAR表达分别为分化好(Ⅰ-Ⅱ级)有8例(8/21)表达,分化差(Ⅲ-Ⅳ级)有6例(6/17)表达。结论CAR表达与非小细胞肺癌发生的组织类型相关而与细胞分化程度无关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 CAR非小细胞肺癌 分化 组织学类型
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基于生物3D打印技术的芍药苷-海藻酸钠-明胶皮肤支架体外生物相容性研究 被引量:5
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作者 余海洋 游德淑 +6 位作者 顾晓诚 梅峻豪 秦立昊 王凯 刘纯 王云 贾中芝 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第6期582-586,共5页
目的 探讨采用生物3D打印技术制备的芍药苷-海藻酸钠(SA)-明胶皮肤支架的体外生物相容性.方法 通过生物3D打印技术制备质量百分比分别为0、1、3、5、10%的芍药苷-SA-明胶皮肤支架.采用扫描电子显微镜(SEM)观察其表面形态结构,高效液相... 目的 探讨采用生物3D打印技术制备的芍药苷-海藻酸钠(SA)-明胶皮肤支架的体外生物相容性.方法 通过生物3D打印技术制备质量百分比分别为0、1、3、5、10%的芍药苷-SA-明胶皮肤支架.采用扫描电子显微镜(SEM)观察其表面形态结构,高效液相色谱仪检测芍药苷累积释放浓度.将大鼠皮肤成纤维细胞与其共培养3 d,行Live/Dead染色,观察支架表面细胞存活和生长状态,检测1、2、3 d时细胞增殖、羟脯氨酸和白细胞介素(IL)-6表达水平.结果 SEM显示5组皮肤支架均呈多孔网状立体结构,孔隙均匀.3%组皮肤支架表面较其他4组光滑.药物累积释放量随着时间延长逐渐增加,10%皮肤支架组在各时点的释放均高于其他4组.Live/Dead染色显示细胞在5组皮肤支架表面均能较好地黏附,生长良好,SEM显示3%组皮肤支架活细胞数多于其他4组.3%组皮肤支架的细胞增殖率、羟脯氨酸分泌水平显著高于其他4组(均P<0.05),IL-6表达水平显著低于0和1%组(P<0.01),但高于10%组(P<0.01).结论 3%芍药苷-SA-明胶皮肤支架实现了生物效应与细胞毒性的平衡,具有良好的生物相容性和胶原蛋白分泌效应,可有效抑制炎症反应发生,有望为糖尿病足溃疡创面修复提供一种可降解的生物皮肤支架. 展开更多
关键词 生物3D打印 皮肤支架 芍药苷 海藻酸钠 明胶 生物相容性 体外
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