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荧光表达载体Podocin过表达对HEK293细胞中CD2AP分布的影响
被引量：
1
1
作者
沙玉根
黄松明
+2 位作者
张爱华
赵非
陈荣华
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期527-529,533,F0002,共5页
目的:构建podocin荧光表达载体,并观察其转染HEK293后对CD2AP细胞内分布的影响。方法:PCR扩增NPHS2cDNA全长,通过T/A克隆连接至pGEMT-easy载体,应用XhoⅠ和BamHⅠ双酶切后,再将NPHS2全长亚克隆入pEGFP-C2。将构建好的荧光表达载体pEGFP-...
目的:构建podocin荧光表达载体,并观察其转染HEK293后对CD2AP细胞内分布的影响。方法:PCR扩增NPHS2cDNA全长,通过T/A克隆连接至pGEMT-easy载体,应用XhoⅠ和BamHⅠ双酶切后,再将NPHS2全长亚克隆入pEGFP-C2。将构建好的荧光表达载体pEGFP-NPHS2转染HEK293细胞,通过免疫荧光的方法观察转染前后CD2AP细胞内的分布情况。结果:①成功构建pEGFP-NPHS2荧光表达载体;②Podocin表达载体转染HEK293细胞后,CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布。结论:Podocin转染HEK293细胞可使CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布。
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关键词
PODOCIN
表达载体
CD2AP
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职称材料
重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体的构建及其在人胚胎肾293细胞中的表达
2
作者
沙玉根
赵非
+1 位作者
张爱华
黄松明
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011年第6期939-941,共3页
目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达。方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显...
目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达。方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin。结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒,HEK293细胞不表达NPHS2基因,转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin。结论:成功构建重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,有助于进一步研究podocin在足细胞疾病中的作用。
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关键词
足细胞
HEK293细胞
NPHS2
表达载体
基因重组
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职称材料
题名
荧光表达载体Podocin过表达对HEK293细胞中CD2AP分布的影响
被引量：
1
1
作者
沙玉根
黄松明
张爱华
赵非
陈荣华
机构
南京医科大学附属南京市儿童医院肾脏科
南京医科大学
儿科研究所
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期527-529,533,F0002,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30100081)
南京市卫生局资助项目(ZKM06043)
文摘
目的:构建podocin荧光表达载体,并观察其转染HEK293后对CD2AP细胞内分布的影响。方法:PCR扩增NPHS2cDNA全长,通过T/A克隆连接至pGEMT-easy载体,应用XhoⅠ和BamHⅠ双酶切后,再将NPHS2全长亚克隆入pEGFP-C2。将构建好的荧光表达载体pEGFP-NPHS2转染HEK293细胞,通过免疫荧光的方法观察转染前后CD2AP细胞内的分布情况。结果:①成功构建pEGFP-NPHS2荧光表达载体;②Podocin表达载体转染HEK293细胞后,CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布。结论:Podocin转染HEK293细胞可使CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布。
关键词
PODOCIN
表达载体
CD2AP
Keywords
podocin
expression vector
CD2AP
分类号
Q74 [生物学—分子生物学]
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体的构建及其在人胚胎肾293细胞中的表达
2
作者
沙玉根
赵非
张爱华
黄松明
机构
南京医科大学附属南京市儿童医院肾脏科
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011年第6期939-941,共3页
基金
国家自然科学基金资助(编号:30100081)
南京市卫生局资助项目(编号:ZKM06043)
文摘
目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达。方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin。结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒,HEK293细胞不表达NPHS2基因,转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin。结论:成功构建重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,有助于进一步研究podocin在足细胞疾病中的作用。
关键词
足细胞
HEK293细胞
NPHS2
表达载体
基因重组
Keywords
Podocytes
HEK293 cell
NPHS2
Expression vector
Gene recombination
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
荧光表达载体Podocin过表达对HEK293细胞中CD2AP分布的影响
沙玉根
黄松明
张爱华
赵非
陈荣华
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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职称材料
2
重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体的构建及其在人胚胎肾293细胞中的表达
沙玉根
赵非
张爱华
黄松明
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011
0
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