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题名腺病毒对原代枯否细胞转染效率及增殖活性的影响
被引量：1
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作者
朱彤
涂文娟
谈志丽
刘亮明
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机构
南京医科大学附属上海松江中心医院感染科
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出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2016年第6期879-882,共4页
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基金
国家自然科学基金项目(编号:81070357
30660066)
上海市松江区科学技术攻关项目(编号:14SJGGYY22)
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文摘
目的:研究腺病毒对原代肝枯否细胞(Kupffer cell,KC)的转染效率和增殖活性影响。方法:分离纯化大鼠肝KC,并以携带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因的腺病毒以不同的感染复数(multiplicity of infection,MOI)转染KC;24 h后,采用荧光显微镜和流式细胞术评估腺病毒的转染效率,以CCK-8比色法检测腺病毒对KC增殖活性的影响。结果 :经统计学处理,当病毒MOI值分别为0、100、300、500、700、900时,荧光显微镜以及流式细胞术测得不同组间GFP表达阳性细胞率均存在明显的差异(均P<0.05)。经CCK8比色法发现,当MOI为300、500、700、900时各组间细胞增殖活性存在明显差异(均P<0.05),而当MOI为0、100、300时各组间细胞增殖活性无明显差异(均P>0.05)。结论 :腺病毒能够有效转染大鼠肝脏KC细胞并表达绿色荧光蛋白。且随着病毒MOI值的增加,腺病毒转染效率逐渐增加。大剂量的病毒对KC增殖活性存在不良影响。
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关键词
原代枯否细胞
腺病毒
转染
绿色荧光蛋白
细胞增殖活性
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Keywords
Primary kupffer cells
Adenovirus
transfection
Green fluorescent protein
Cell proliferation
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分类号
R373
[医药卫生—病原生物学]
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题名LPS刺激诱导大鼠原代枯否细胞基因表达谱变化分析
被引量：4
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作者
谈志丽
朱彤
涂文娟
刘亮明(指导)
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机构
南京医科大学附属上海松江中心医院感染科
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1734-1740,共7页
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基金
国家自然科学基金项目(81070357)
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文摘
目的:研究脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激原代大鼠枯否细胞(Kupffer cell,KC)基因表达谱的变化情况。方法:胶原酶灌注消化和不连续密度梯度离心分离培养大鼠原代肝脏KC,采用LPS刺激细胞。One Array基因表达谱芯片检测LPS刺激后,细胞内基因表达谱的变化。采用实时荧光定量PCR法对表达上调最显著的基因进行验证。结果:基因芯片结果显示LPS刺激后,原代KC内基因表达谱发生了明显变化。与正常对照组相比,LPS刺激组基因表达上调27个(包括Ces1f、Slc17a3、Slc21a4、Hsd17b2、Sorbs2、Ccdc116、Mgam、Myo5b、Etl4、Fabp1、Kif4b、Fosl1、Cyp4a1、Penk、Tmem221、Rpl5、Nr2f1、Hoxb1、Gpr165、Fam90a13p、Kpna6、Irak1bp1、Kcnh1和4个尚未命名基因),表达下调4个(包括Oc90、Tagln、Arxes2和Olr830)。其中Ces1f为上调最显著的基因。实时荧光定量PCR验证结果显示,LPS刺激诱导KC对Ces1f基因表达水平上调达23.88倍。结论:LPS刺激可诱导大鼠原代KC基因表达谱发生变化。其中,Ces1f基因的上调表达最为显著。
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关键词
原代枯否细胞
脂多糖
基因表达谱
芯片分析
大鼠
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Keywords
Primary Kupffer cells
LPS
Gene expression profile
Microarray analysis
Rat
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分类号
R575.3
[医药卫生—消化系统]
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