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LncRNA PICSAR敲低对卵巢癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制
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作者 唐雪俊 窦晓卫 应小燕 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第9期1509-1516,共8页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PICSAR在卵巢癌中的表达,探究LncRNA PICSAR对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响以及其可能的作用机制。方法使用荧光定量PCR法检测卵巢癌组织和细胞系A2780、OVCAR-3、HO-8910以及正常卵巢组织和... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PICSAR在卵巢癌中的表达,探究LncRNA PICSAR对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响以及其可能的作用机制。方法使用荧光定量PCR法检测卵巢癌组织和细胞系A2780、OVCAR-3、HO-8910以及正常卵巢组织和细胞系IOSE386中LncRNA PICSAR的表达水平。将LncRNA PICSAR表达最高的卵巢癌细胞系分为对照组和实验组,通过脂质体转染技术分别转染阴性对照小干扰RNA(siRNA-NC)或PICSAR小干扰RNA(siRNA-PICSAR)。细胞计数实验(CCK-8)、克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验以及流式细胞术分别分析LncRNA PICSAR敲低对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。Western blot法测定各组细胞的凋亡蛋白Bcl-2、Bax和自噬蛋白LC3B、ATG7、Beclin-1的表达水平。使用雷帕霉素和羟氯喹分别作为自噬激活剂和抑制剂处理卵巢癌细胞,并通过Western blot实验检测细胞凋亡水平。结果与正常卵巢组织相比,卵巢癌组织中LncRNA PICSAR表达水平升高。与IOSE386细胞系比较,卵巢癌细胞系A2780、OVCAR-3、HO-8910中LncRNA PICSAR表达水平均升高。与si-NC组比较,si-PICSAR组卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力均降低,细胞凋亡率增高。si-PICSAR组卵巢癌细胞的自噬水平较si-NC组降低,siRNA-PICSAR转染后,用雷帕霉素激活自噬降低了细胞凋亡水平,而用羟氯喹抑制自噬促进了细胞凋亡。结论LncRNA PICSAR在卵巢癌组织和细胞系中高表达,LncRNA PICSAR敲低能够抑制卵巢癌细胞的恶性生物学行为。敲低LncRNA PICSAR可能是通过调节自噬促进卵巢癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 卵巢癌 长链非编码RNA PICSAR 增殖 凋亡 自噬
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经阴道双通道治疗内镜输卵管切除术治疗输卵管妊娠2例报告 被引量:4
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作者 王翔 张发明 +3 位作者 林洁 吴萍 范志宁 应晓燕 《中国微创外科杂志》 CSCD 2010年第1期33-33,43,共2页
目的探讨经阴道内镜下输卵管切除术治疗输卵管妊娠的可行性。方法2009年5月采用经阴道双通道治疗内镜下行输卵管切除术治疗2例输卵管妊娠,经阴道后穹隆置入双通道治疗内镜(OlympusSD-210U-15),内镜下应用尼龙圈套扎及圈套器电凝电切输... 目的探讨经阴道内镜下输卵管切除术治疗输卵管妊娠的可行性。方法2009年5月采用经阴道双通道治疗内镜下行输卵管切除术治疗2例输卵管妊娠,经阴道后穹隆置入双通道治疗内镜(OlympusSD-210U-15),内镜下应用尼龙圈套扎及圈套器电凝电切输卵管及其孕囊。结果2例手术均顺利完成,手术时间51min、62min。住院时间3d、2d。无腹腔感染、出血等并发症发生,血β-hCG分别于术后7d、10d恢复正常,妇检阴道伤口于术后7天愈合。2例均随访90天,复查B超、妇检无异常。结论经阴道内镜下输卵管切除术治疗对无合并症的输卵管妊娠是可行的。 展开更多
关键词 异位妊娠 阴道 输卵管切除术 经自然腔道内镜手术
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荧光染色技术检测宫颈沙眼衣原体 被引量:3
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作者 吴瑞娟 葛百明 +9 位作者 周亚东 朱启锭 徐昌芬 周金童 陈定王 张义文 乐海燕 黄卫娟 叶谷风 应小燕 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1994年第4期535-537,共3页
采用荧光染色技术对192例临床患有宫颈炎的病例进行宫颈涂片检查,检出宫颈上皮细胞内和中性粒细胞内衣原体包涵体32例(阳性率为16.6%),这些阳性标本分别进一步用姬姆萨和苏木精-伊红(HE)染色进行研究。结果表明,衣... 采用荧光染色技术对192例临床患有宫颈炎的病例进行宫颈涂片检查,检出宫颈上皮细胞内和中性粒细胞内衣原体包涵体32例(阳性率为16.6%),这些阳性标本分别进一步用姬姆萨和苏木精-伊红(HE)染色进行研究。结果表明,衣原体包涵体在姬姆萨染色的标本上得到证实;在HB染色的涂片上则不易发现;然而,在荧光方法染色的标本上,衣原体包涵体所发荧光的颜色明显不同于细胞结构发出的荧光颜色,在低倍荧光镜下就能识别.而且,该染色法对滴虫和癌细胞的识别亦具有一定的优越性。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 荧光染料 显微镜检查 荧光 子宫颈炎
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小干扰RNA沉默白血病抑制因子基因对整合素ανβ_3表达的影响 被引量:9
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作者 王珺 马学娟 +2 位作者 郑灵芝 赵琴 应小燕 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第2期151-156,共6页
目的白血病抑制因子(leukemia inhibitor factor,LIF)及整合素ανβ3被认为是子宫内膜容受性的标记分子。探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对LIF的抑制效应及该效应对整合素ανβ3表达的影响。方法化学合成3条LIF siRNA(L... 目的白血病抑制因子(leukemia inhibitor factor,LIF)及整合素ανβ3被认为是子宫内膜容受性的标记分子。探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对LIF的抑制效应及该效应对整合素ανβ3表达的影响。方法化学合成3条LIF siRNA(LIFsiRNA-1、LIFsiRNA-2和LIFsiRNA-3),用脂质体法转染到小鼠子宫内膜细胞中,实时荧光定量PCR筛选出最佳干扰片段和最优转染浓度,RT-PCR检测整合素ανβ3mRNA的表达水平,ELISA法检测细胞培养液中LIF蛋白,Western blot检测整合素ανβ3蛋白,从蛋白水平进行相关性分析。结果 siRNA转染后,LIFsiRNA-1 mRNA表达下调最明显(0.26±0.09),差异有统计学意义(P<0.01),且在一定范围内呈剂量依赖性,选择最优转染浓度70 nmol/mL,整合素ανβ3mRNA表达明显下降(0.53±0.23),差异有统计学意义(P<0.01);LIF蛋白[(2.47±0.03)ng/mL]及整合素ανβ3蛋白[(0.16±0.08)ng/mL]表达较对照组显著下调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 LIFsiRNA-1可很好地抑制LIF的表达,而LIF的沉默表达能有效抑制整合素ανβ3的表达,LIF和整合素ανβ3具有显著正相关性(P<0.01)。 展开更多
关键词 siRNA 白血病抑制因子 整合素ΑΝΒ3 子宫内膜细胞
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PARP1在K192位点的乳酸化抑制卵巢癌细胞的迁移和增殖
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作者 苏宁 曹颖 +7 位作者 张淑平 吴少君 孙鸿展 唐雪俊 袁冬兰 张东 杨莉莉 应小燕 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2025年第9期1219-1228,1241,共11页
目的:卵巢癌(ovarian cancer,OC)在全球女性癌症中排名前列。许多研究在多个遗传调控水平上探究了OC的发生和进展。但很少有研究探讨翻译后修饰(post-translation modification,PTM)对OC进展的影响,而这对发现新的治疗靶点至关重要。本... 目的:卵巢癌(ovarian cancer,OC)在全球女性癌症中排名前列。许多研究在多个遗传调控水平上探究了OC的发生和进展。但很少有研究探讨翻译后修饰(post-translation modification,PTM)对OC进展的影响,而这对发现新的治疗靶点至关重要。本研究拟通过系统鉴定OC进展的关键PTM类型,探讨并评估其在治疗靶点的转化潜力。方法:首先,利用多种泛PTM抗体来比较临床女性正常卵巢组织和OC组织之间的泛PTM水平。在鉴定出乳酸化为差异最显著的PTM后,选择代表性的样品进行无标记质谱分析,以识别特定的乳酸化位点。随后用野生型(wild type,WT)PARP1-EGFP-STREPⅡ或其K192A突变体转染A2780卵巢癌细胞,检测与增殖(克隆形成实验)、ROS水平和迁移(细胞划痕实验)相关的各种细胞指标。结果:临床OC样本中的泛乳酸化水平显著上调,其中PARP1在K192位点的乳酸化是变化最为显著的PTM之一。PARP1-WT的过表达能显著抑制OC细胞系A2780的生长和迁移活性,而K192A突变体则失去了这种抑制作用。此外,PARP1-WT过表达可显著下调ERK1/2信号通路的磷酸化水平。结论:本研究发现并证实了OC中存在PARP1的新型PTM形式——乳酸化修饰,K192位点的乳酸化通过ERK1/2途径调节OC细胞的生长和迁移。 展开更多
关键词 PARP1 乳酸化 迁移 增殖 卵巢癌细胞
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