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血尿酸水平与老年代谢相关疾病的作用关系研究 被引量:9
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作者 刘梦兰 黄琼 +5 位作者 李璐 薛一 马建峰 张日华 闵捷 刘云 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期168-173,共6页
目的:探讨血尿酸与老年患者代谢相关疾病的关系。方法:对本院2009~2010年体检中心60岁以上7 304例人群进行调查分析,通过病史询问、身高、体重测量、血压、血糖、血脂、尿酸等指标测定,分别按人群中男性和女性的血尿酸水平,以四分位... 目的:探讨血尿酸与老年患者代谢相关疾病的关系。方法:对本院2009~2010年体检中心60岁以上7 304例人群进行调查分析,通过病史询问、身高、体重测量、血压、血糖、血脂、尿酸等指标测定,分别按人群中男性和女性的血尿酸水平,以四分位数法将男女各分为4组。探讨尿酸水平与老年代谢相关疾病的相关性。结果:高尿酸血症老年男性各年龄段的发病率均高于女性,且血尿酸水平随年龄增加;体质指数(BMI)、收缩压、舒张压、空腹血糖(FPG)、血脂特别是甘油三酯(TG)及TG/HDL-C均随血尿酸水平的升高显著升高,呈线性趋势(P〈0.05);老年高血压患者血尿酸水平与血压等级呈正相关;老年男性空腹血糖调节受损(IFG)患者血尿酸水平明显高于糖尿病患者,高尿酸血症组较非高尿酸组有较高的糖尿病发生率,在男性患者尿酸水平与空腹血糖呈正相关,但在女性患者这种相关性不明显;尿酸水平4组Logistic回归分析显示年龄、BMI、血压、血脂、空腹血糖与血尿酸水平升高呈显著正相关。结论:血尿酸水平与年龄、BMI、血脂异常、血压高、血糖高之间关系密切。因此,在老年群体中要重视对高尿酸血症的干预,减少心脑血管并发症。 展开更多
关键词 高尿酸血症 老年人群 代谢相关疾病
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11β/HSD1与糖脂代谢异常的相关关系研究 被引量:5
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作者 杨洁 童佩 +1 位作者 奚玲 刘云 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期464-469,共6页
目的:探讨11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-hydroxysteroid dehydrogenase,11β/HSD1)对机体糖脂代谢异常的影响及其在肥胖和胰岛素抵抗发生发展过程中的作用及机制。方法:首先构建脂肪组织特异性敲除11β/HSD1(Fabp-11β/HSD1-/-)小鼠。... 目的:探讨11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-hydroxysteroid dehydrogenase,11β/HSD1)对机体糖脂代谢异常的影响及其在肥胖和胰岛素抵抗发生发展过程中的作用及机制。方法:首先构建脂肪组织特异性敲除11β/HSD1(Fabp-11β/HSD1-/-)小鼠。然后选择5周龄Fabp-11β/HSD1-/-小鼠和正常C57BL/6小鼠各5只,建立高脂饮食诱导的肥胖(DIO)小鼠模型,分别在喂食5周和6周时进行腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT)和胰岛素耐量试验(ITT),喂食12周后处死并称量皮下及内脏脂肪重量,采用HE染色方法观察脂肪组织内脂肪空泡改变程度,取血检测血糖、甘油三酯、胆固醇、尿素、肌酐等血清生化指标,同时应用Western blot与QRT-PCR方法检测脂肪组织中11β/HSD1表达和糖脂代谢相关转录因子的蛋白表达情况。结果:脂肪组织特异性敲除11β/HSD1小鼠构建成功。高脂喂养12周后两组小鼠体重、内脏脂肪湿重没有明显差异。Fabp-11β/HSD1-/-组小鼠血清空腹血糖明显低于正常组,其他生化指标没有明显改变,但Fabp-11β/HSD1-/-组小鼠脂肪组织HE染色可见脂肪空泡比正常组小,且糖耐量和胰岛素敏感性明显高于对照组,Western blot与QRT-PCR结果显示Fabp-11β/HSD1-/-小鼠脂肪组织中11β/HSD1、PPAR-γ、C/EPB-α的蛋白表达量明显低于正常组。结论:在高脂饮食下脂肪组织内11β/HSD1表达的下调可减少脂肪细胞内脂滴的沉积,一定程度上改善机体对胰岛素敏感性的下降。 展开更多
关键词 转基因小鼠 11Β-羟基类固醇脱氢酶1 肥胖 胰岛素敏感性 转录因子
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S100A16基因shRNA真核表达质粒的构建及其干扰效果的初步鉴定 被引量:8
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作者 辛婧 张日华 +1 位作者 杜新丽 刘云 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期324-327,共4页
目的:构建S100A16基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒,转染3T3-L1小鼠前体脂肪细胞,初步鉴定其干扰效果。方法:以小鼠S100A16基因为靶基因,以PLKO.1-sP6-GFP质粒为载体,根据GenBank数据库提供的S100A16基因核苷酸序列,选择设计2条siRNA干... 目的:构建S100A16基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒,转染3T3-L1小鼠前体脂肪细胞,初步鉴定其干扰效果。方法:以小鼠S100A16基因为靶基因,以PLKO.1-sP6-GFP质粒为载体,根据GenBank数据库提供的S100A16基因核苷酸序列,选择设计2条siRNA干扰序列,构建针对S100A16基因的shRNA真核表达质粒PLKO.1-S100A16-GFP-shRNA1、2,经PCR鉴定和测序分析,确认质粒构建成功后,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质粒瞬时转染小鼠3T3-L1小鼠前体脂肪细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,计算转染效率,Real-time RT-PCR法检测质粒对S100A16基因的表达抑制效果。结果:构建的shRNA序列经PCR和DNA测序证实与设计完全一致;在荧光显微镜下观察到3T3-L1细胞表达绿色荧光蛋白(GFP),证实重组质粒已转入细胞,转染效率达到90%;Real-time RT-PCR结果显示转入PLKO.1-S100A16-GFP-shRNA2的3T3-L1细胞中S100A16基因被特异抑制,基因表达抑制率达70%以上,与空白对照组、阴性序列对照组的差异具有统计学意义(P均<0.05)。结论:成功构建了靶向S100A16基因的shRNA真核表达质粒PLKO.1-S100A16-GFP-shRNA1和2,并筛选出有效抑制S100A16基因表达的质粒,为进一步研究S100A16基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠前体脂肪细胞 RNA干扰 S100A16基因
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S100A16基因的原核表达和多克隆抗体制备 被引量:3
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作者 薛一 孙静 +4 位作者 刘梦兰 黄琼 杜新丽 张日华 刘云 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1376-1380,共5页
目的:构建S100A16原核表达载体,制备S100A16蛋白多克隆抗体并初步鉴定。方法:RT-PCR扩增得到小鼠肝脏组织的S100A16基因,将此片段克隆到带有His标签的原核表达载体pET-28a多克隆位点,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导融合蛋白表达,以... 目的:构建S100A16原核表达载体,制备S100A16蛋白多克隆抗体并初步鉴定。方法:RT-PCR扩增得到小鼠肝脏组织的S100A16基因,将此片段克隆到带有His标签的原核表达载体pET-28a多克隆位点,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导融合蛋白表达,以亲和层析的方法纯化His-S100A16融合蛋白。纯化蛋白经SDS-PAGE电泳鉴定后,免疫新西兰白兔制备抗血清。分别采用ELISA和Western blot方法检测抗体效价和特异性。结果:经双酶切和核酸序列分析证实成功构建pET-28a-S100A16原核表达质粒。考马斯亮兰染色结果证实IPTG可有效诱导融合蛋白表达。用纯化融合蛋白免疫新西兰白兔得到的S100A16抗体血清,经ELISA和Western blot检测结果显示该抗体效价高,特异性好。结论:构建带有His标签的S100A16原核表达载体,并获得高纯度His-S100A16融合蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究S100A16生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 S1000A16 原核表达 多克隆抗体
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S100A16转基因小鼠的构建与鉴定 被引量:2
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作者 杜新丽 薛一 +2 位作者 张媛媛 张日华 刘云 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期325-328,共4页
目的:构建系统表达S100A16基因型小鼠,为研究S100A16基因的生物学功能提供模型动物。方法 :将S100A16cDNA插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射方法建立转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,采用定量PCR(QPCR)方法筛... 目的:构建系统表达S100A16基因型小鼠,为研究S100A16基因的生物学功能提供模型动物。方法 :将S100A16cDNA插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射方法建立转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,采用定量PCR(QPCR)方法筛选高表达品系。结果:成功构建S100A16转基因载体,建立了S100A16转基因小鼠,通过PCR及QPCR方法筛选出两个高表达品系(line A,line B)。结论:建立了系统表达S100A16的转基因小鼠,转入的S100A16基因在脂肪、肝脏、肌肉、肺等组织高表达,为研究S100A16的生物学功能特别是在肥胖中的作用及机制提供了动物模型。 展开更多
关键词 S100A16基因 转基因小鼠 肥胖 胰岛素抵抗
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S100A16基因敲除小鼠模型的构建与鉴定 被引量:2
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作者 童佩 奚玲 +1 位作者 杨洁 刘云 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第5期549-553,共5页
目的:S100A16在肥胖以及多种恶性肿瘤发生发展中发挥了重要作用,本研究拟构建S100A16基因敲除小鼠模型。方法:利用基因表达调控系统(即Cre/lox P系统)构建全身敲除小鼠。采用聚合酶链式反应(PCR)鉴定小鼠的基因型,采用实时定量PCR(QRT-P... 目的:S100A16在肥胖以及多种恶性肿瘤发生发展中发挥了重要作用,本研究拟构建S100A16基因敲除小鼠模型。方法:利用基因表达调控系统(即Cre/lox P系统)构建全身敲除小鼠。采用聚合酶链式反应(PCR)鉴定小鼠的基因型,采用实时定量PCR(QRT-PCR)、Western blot方法验证其转录及翻译水平的表达。结果:成功建立了S100A16全身敲除小鼠模型,基因敲除杂合子小鼠成功饲养繁殖,目前为止未出现纯合子小鼠。S100A16敲除小鼠主要代谢器官,如脂肪、肌肉、肝脏中S100A16蛋白表达量显著下降。结论:S100A16基因敲除小鼠模型的构建为研究肥胖及胰岛素抵抗中的作用及机制提供了动物模型。 展开更多
关键词 S100A16 基因敲除 动物模型
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