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肾移植大鼠慢性排斥反应模型的建立 被引量:2
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作者 冯宁翰 钱立新 +9 位作者 华立新 夏国伟 吴军 贺伟峰 宋宁宏 乔迪 徐正铨 张炜 吴宏飞 眭元庚 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期796-798,共3页
目的:建立一种方便、实用的慢性器官移植排斥反应模型,为研究器官移植后慢性排斥反应的发病机制、预防和治疗提供平台。方法:以近交系F344大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体... 目的:建立一种方便、实用的慢性器官移植排斥反应模型,为研究器官移植后慢性排斥反应的发病机制、预防和治疗提供平台。方法:以近交系F344大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体肾静脉的端端吻合,肾动脉与腹主动脉行端侧吻合。施行原位异体肾移植。移植后即给与环孢素腹腔注射。并于术后4周后行病理检查。结果:所有手术均于60min内完成。所有的受体均存活超过60天,围手术期死亡数为零。受体无急性排斥反应发生。4周后可见典型的慢性排斥反应发生。结论:建立了大鼠慢性排斥反应肾移植模型。为研究慢性排斥反应的发生、进展和干预治疗提供了良好的平台。 展开更多
关键词 大鼠 肾移植 模型 排斥反应
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人肾微血管内皮细胞转分化在移植肾间质纤维化形成中的作用 被引量:2
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作者 汪俊 刘绪忠 +7 位作者 韩志坚 陶俊 鲁佩 吴边 王子杰 殷长军 谭若芸 顾民 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1149-1156,共8页
目的:探讨人肾微血管内皮细胞-间充质细胞转分化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)在移植肾间质纤维化形成中的意义及相关机制。方法:通过对南京医科大学第一附属医院25例慢性移植肾失功能(chronic allograft dysfunctio... 目的:探讨人肾微血管内皮细胞-间充质细胞转分化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)在移植肾间质纤维化形成中的意义及相关机制。方法:通过对南京医科大学第一附属医院25例慢性移植肾失功能(chronic allograft dysfunction,CAD)患者和25例正常人血生化指标进行分析,对移植肾组织标本和正常肾组织标本进行糖原(PAS)和马松三色(Masson)染色检查分析,观察两组肾功能、肾小管萎缩、肾小球塌陷及肾间质纤维化程度的差异。用免疫组织化学和间接免疫荧光双重染色方法检测两组肾组织标本中血管内皮细胞标志物CD34和肌成纤维细胞标志物α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)以及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达和分布特点。进一步以原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)为体外研究对象,以TGF-β1(5 ng/ml)作用0~72 h,采用免疫印迹方法观察细胞中CD34和α-SMA的表达变化。结果:与正常人相比,CAD患者血清肌酐水平明显升高,PAS和Masson三色染色结果显示CAD患者移植肾组织中出现明显肾小管萎缩、肾小球塌陷及肾间质纤维化改变;半定量统计分析结果表明两者间存在统计学差异(P〈0.01)。免疫组织化学及间接免疫荧光染色结果表明,与正常组相比,CAD组中CD34阳性表达率降低而α-SMA及TGF-β1阳性表达率显著升高,CAD组中部分肾小球和间质微血管内皮细胞呈CD34和α-SMA双重染色阳性。体外研究显示,TGF-β1作用于HUVECs细胞后,随着时间延长,CD34表达逐渐降低而α-SMA表达逐渐增多,与对照组相比,具有统计学差异(P〈0.01)。结论:人肾微血管内皮细胞可能在TGF-β1介导下通过发生EndMT现象进而在移植肾间质纤维化形成中起重要作用。 展开更多
关键词 肾移植 肾间质纤维化 微血管内皮细胞 TGF-β1
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大鼠双侧供肾移植模型的建立 被引量:2
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作者 冯宁翰 钱立新 +5 位作者 华立新 郑峻松 宋宁宏 眭元庚 张炜 吴宏飞 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期521-523,543,共4页
目的:首创了一种可以同时取供体的双肾作供肾的大鼠肾移植模型。方法:以近交系Brown鄄Norway大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体肾静脉的端端吻合,肾动脉与腹主动脉行端侧吻合... 目的:首创了一种可以同时取供体的双肾作供肾的大鼠肾移植模型。方法:以近交系Brown鄄Norway大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体肾静脉的端端吻合,肾动脉与腹主动脉行端侧吻合。结果:手术均于60min内完成。所有的受体均存活超过7天,围手术期死亡数为0。结论:首创双侧供肾大鼠肾移植模型是一种节省、可靠、实用的大鼠肾移植模型。 展开更多
关键词 大鼠 肾移植 模型
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骨桥蛋白在大鼠慢性移植肾肾病中的表达及意义 被引量:2
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作者 柏金明 徐东亮 +6 位作者 俞欣 刘敏 鲁佩 殷长军 张炜 徐正铨 顾民 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期932-935,共4页
目的:探讨慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)大鼠的组织学改变与骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的关系。方法:以F344大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,行原位异体肾移植,建立大鼠CAN模型,作为CAN组;以Lewis大鼠做供、受体,... 目的:探讨慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)大鼠的组织学改变与骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的关系。方法:以F344大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,行原位异体肾移植,建立大鼠CAN模型,作为CAN组;以Lewis大鼠做供、受体,行原位异体肾移植,作为对照组。12周后,观察两组大鼠肾功能、肾组织学改变;免疫组织化学法检测OPN及转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果:与对照组比较,CAN组大鼠24h尿蛋白定量、血肌酐及尿素氮明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);根据Banff97评分标准,CAN组和对照组肾小管萎缩评分分别为1.70±0.82、0.10±0.30,肾小管间质纤维化评分分别为2.20±0.79、0.30±0.48,差异均有统计学意义(P<0.01);CAN组移植肾肾小管上皮细胞中TGF-β1蛋白的阳性表达率为100%,而在对照组移植肾组织中未见阳性表达;CAN组移植肾组织中OPN的阳性表达率为90%,而在对照组移植肾组织中未见阳性表达,两者均存在明显差异。结论:OPN在CAN大鼠移植肾组织中高表达,可能作为TGF-β1的下游分子参与TGF-β1介导的慢性移植肾病变的发生发展。 展开更多
关键词 骨桥蛋白 间质纤维化 慢性移植肾肾病
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RNA干扰沉默骨桥蛋白对大鼠移植肾小管上皮细胞向间充质转分化的作用 被引量:2
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作者 张挺 徐东亮 +5 位作者 周强平 鲁佩 殷长军 张炜 徐正铨 顾民 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期818-823,共6页
目的:探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的shRNA干扰质粒在大鼠慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)模型中对大鼠移植肾上皮细胞向间充质转分化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的作用,初步探讨OPN在慢性移植物... 目的:探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的shRNA干扰质粒在大鼠慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)模型中对大鼠移植肾上皮细胞向间充质转分化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的作用,初步探讨OPN在慢性移植物肾病中的作用及机制。方法:以F344大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,行原位异体肾移植术,建立大鼠CAN模型(Allo组),以Lewis大鼠做供、受体作为同系移植对照(Syn组),以基于流体力学为基础的肾脏基因转染方法转染质粒到移植肾(RNAi组),采用空质粒作为对照(EV组),于术后12周处死各组动物,取移植肾标本进行HE和马松染色,观察组织形态学变化。采用免疫组织化学方法对移植肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达进行观察。同时行Western blot检测移植肾组织OPN的表达,并对其灰度比作统计分析。结果:RNAi组OPN表达显著低于Allo组。Allo组和EV组大鼠移植肾组织形态学符合慢性移植肾肾病改变。RNAi组移植肾形态学变化较Allo组减轻。免疫组化结果显示,与Syn组相比,Allo组主要在肾小管上皮及肾间质强表达α-SMA,而肾小管上皮E-Cadherin表达较Syn组明显下降。与之相比,RNAi组α-SMA表达下调,E-Cadherin表达上调。结论:OPN在大鼠CAN模型移植肾中表达上调,OPN体内RNA干扰能够减少OPN在移植肾的表达,并且OPN的RNA干扰能缓解移植肾的病理学改变,抑制移植肾小管上皮细胞EMT。提示OPN与CAN的发生有潜在相关性,其可能通过促进肾小管上皮发生EMT途径影响CAN发病。 展开更多
关键词 骨桥蛋白 上皮向间充质转分化 间质纤维化 慢性移植肾肾病
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大鼠慢性移植物肾病模型中GSK3β的表达及其病理意义
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作者 俞欣 刘敏 +5 位作者 柏金明 徐东亮 鲁佩 吕强 张炜 顾民 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期772-775,共4页
目的:观察糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase,GSK3β)在大鼠慢性移植物肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)模型移植肾中的表达。探讨GSK3β在CAN中的作用。方法:F344大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,行原位异体肾移植,建... 目的:观察糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase,GSK3β)在大鼠慢性移植物肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)模型移植肾中的表达。探讨GSK3β在CAN中的作用。方法:F344大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,行原位异体肾移植,建立大鼠CAN模型,术后12周处死各组动物,取移植肾标本观察组织形态学变化,并用SP免疫组织化学方法对移植肾组织GSK3β、NF-κBp65的表达进行观察。结果:与同系移植组、对照组相比,CAN组GSK3β、NF-κBp65在移植肾中的表达明显增强。结论:提示GSK3β可能在CAN的发病机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肾移植 慢性移植物肾病 GSK3Β NF-κB
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