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实时荧光定量检测人血浆中RASSF1A基因启动子甲基化
被引量：
4
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作者
高丽
潘世扬
+8 位作者
束永前
谢而付
陈进步
赵文君
穆原
张丽霞
陈丹
黄珮珺
张寄南
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期194-196,共3页
目的建立检测人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化的方法。方法以肺癌细胞株NCI-H460作为RASSF1A基因启动子区甲基化阳性样本,传统酚/氯仿法提取细胞DNA,经紫外分光光度计定量后以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200μl健康人血浆中,制备得到模...
目的建立检测人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化的方法。方法以肺癌细胞株NCI-H460作为RASSF1A基因启动子区甲基化阳性样本,传统酚/氯仿法提取细胞DNA,经紫外分光光度计定量后以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200μl健康人血浆中,制备得到模拟肺癌患者血浆。用磁珠法从模拟血浆样本和15例早期肺癌患者血浆中提取总DNA。对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以TaqMan技术的实时荧光定量甲基化特异性PCR(MSP)进行检测。以模拟血浆样品作为标准品,用外标准曲线法对肺癌患者血浆中的甲基化RASSF1A进行定量。结果实时荧光定量MSP对模拟肺癌患者血浆的检测最低限为150拷贝(甲基化的肿瘤DNA)/ml(血浆)。15例肺癌患者5例RASSF1A甲基化阳性(33.3%)。5例肺癌患者血浆中甲基化的RASSF1A基因的浓度分别为2.56×103,8.20×104,1.45×104,3.31×104和4.24×104拷贝/ml。结论实时荧光定量MSP法检测肺癌患者血浆DNA中RASSF1A基因甲基化,灵敏度高,特异性强。
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关键词
RASSF1A
甲基化
实时荧光定量
甲基化特异性聚合酶链反应
肺癌
血浆DNA
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职称材料
题名
实时荧光定量检测人血浆中RASSF1A基因启动子甲基化
被引量：
4
1
作者
高丽
潘世扬
束永前
谢而付
陈进步
赵文君
穆原
张丽霞
陈丹
黄珮珺
张寄南
机构
南京医科大学
第一
附属
医院
临床检验中心
南京医科大学
第一
附属
医院
肿瘤科
南京医科大学第一附属医院江苏省生物诊断与治疗重点实验室
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期194-196,共3页
基金
江苏省卫生厅重大项目科研基金(NoH200707)
江苏省科技厅社会发展基金(NoBS2007073
NoBM2006113)
文摘
目的建立检测人血浆DNA中RASSF1A基因甲基化的方法。方法以肺癌细胞株NCI-H460作为RASSF1A基因启动子区甲基化阳性样本,传统酚/氯仿法提取细胞DNA,经紫外分光光度计定量后以10倍稀释的浓度梯度依次投入到200μl健康人血浆中,制备得到模拟肺癌患者血浆。用磁珠法从模拟血浆样本和15例早期肺癌患者血浆中提取总DNA。对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以TaqMan技术的实时荧光定量甲基化特异性PCR(MSP)进行检测。以模拟血浆样品作为标准品,用外标准曲线法对肺癌患者血浆中的甲基化RASSF1A进行定量。结果实时荧光定量MSP对模拟肺癌患者血浆的检测最低限为150拷贝(甲基化的肿瘤DNA)/ml(血浆)。15例肺癌患者5例RASSF1A甲基化阳性(33.3%)。5例肺癌患者血浆中甲基化的RASSF1A基因的浓度分别为2.56×103,8.20×104,1.45×104,3.31×104和4.24×104拷贝/ml。结论实时荧光定量MSP法检测肺癌患者血浆DNA中RASSF1A基因甲基化,灵敏度高,特异性强。
关键词
RASSF1A
甲基化
实时荧光定量
甲基化特异性聚合酶链反应
肺癌
血浆DNA
Keywords
RASSF1A
methylation
real-time fluorescent quantitative methylation specific PCR （ RT-FQ MSP）
lung cancer
plasma DNA
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
实时荧光定量检测人血浆中RASSF1A基因启动子甲基化
高丽
潘世扬
束永前
谢而付
陈进步
赵文君
穆原
张丽霞
陈丹
黄珮珺
张寄南
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
4
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