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人卵泡液中重金属铅对女性生殖毒性的研究 被引量:3
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作者 冯婷 千日成 +2 位作者 马龙 刘嘉茵 郁建桥 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1550-1552,共3页
目的:研究重金属铅对女性生殖系统的影响,分析铅含量与获卵率、卵子成熟率、正常受精率、正常卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、妊娠率的相关性。方法:测定36例行体外受精(IVF)治疗的患者卵泡液中铅的浓度,并观察这些患者的卵泡数、... 目的:研究重金属铅对女性生殖系统的影响,分析铅含量与获卵率、卵子成熟率、正常受精率、正常卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、妊娠率的相关性。方法:测定36例行体外受精(IVF)治疗的患者卵泡液中铅的浓度,并观察这些患者的卵泡数、获卵率、卵子成熟率、正常受精率及发育情况。结果:获卵率、卵子成熟率、正常受精率、正常卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率和卵泡液中铅的检出均无显著差异,但随着铅含量浓度的逐渐增高,卵子成熟率、正常卵裂率、优质胚胎率均有下降趋势。结论:重金属铅对女性生殖系统是有毒性损害的,但由于本研究的样本量较少,两者之间无显著性关联,应再加大样本量继续研究。 展开更多
关键词 卵泡液 胚胎发育
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附睾精子冷冻保存对单精子胞浆内注射临床结局的影响
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作者 严正杰 杨晓玉 +6 位作者 蔡令波 冯婷 马龙 陈娟 王伟 冒韵东 刘嘉茵 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1000-1003,共4页
目的:回顾性分析54例采用冷冻附睾精子行卵细胞浆内单精子注射(ICSI)的胚胎发育以及妊娠结局。方法:54例冷冻保存的附睾精子解冻复苏,采用ICSI法受精,观察胚胎发育形态,经72h体外培养后移植,将282例采用新鲜附睾精子的ICSI结局为对照组... 目的:回顾性分析54例采用冷冻附睾精子行卵细胞浆内单精子注射(ICSI)的胚胎发育以及妊娠结局。方法:54例冷冻保存的附睾精子解冻复苏,采用ICSI法受精,观察胚胎发育形态,经72h体外培养后移植,将282例采用新鲜附睾精子的ICSI结局为对照组。结果:正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率冻精组与新鲜组之间无显著差异(72.4%vs74%,98.1%vs96.3%,51.7%vs46.8%,42.6%vs39.0%,P>0.05),两组均未出现新生儿畸形。冷冻附睾精子复苏率为65.9%。结论:冷冻附睾精子对胚胎发育以及妊娠结局无显著影响。 展开更多
关键词 经皮附睾穿刺取精术 冷冻 胚胎发育 单精子卵包浆内注射
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辅助生殖多胎妊娠的影响因素研究 被引量:13
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作者 刘丰 刁飞扬 +6 位作者 凌秀凤 管一春 谭季春 吕红 杜江波 沈洪兵 胡志斌 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期762-768,共7页
目的:探讨辅助生殖技术治疗后多胎妊娠的影响因素。方法:研究纳入2013年1月—2016年12月在南京医科大学第一附属医院、南京医科大学附属妇产医院、郑州大学第三附属医院和中国医科大学附属盛京医院生殖中心接受辅助生殖治疗并临床妊娠... 目的:探讨辅助生殖技术治疗后多胎妊娠的影响因素。方法:研究纳入2013年1月—2016年12月在南京医科大学第一附属医院、南京医科大学附属妇产医院、郑州大学第三附属医院和中国医科大学附属盛京医院生殖中心接受辅助生殖治疗并临床妊娠的患者为研究对象,共计19 434例,其中单胎妊娠14 765例,多胎妊娠4 669例,采用Logistic回归模型分析多胎妊娠的影响因素。结果:在多因素Logistic回归分析中,移植2个胚胎是多胎妊娠最主要的影响因素,与单胎妊娠相比,比值比(OR)36.54,95%置信区间(CI):27.89~47.86。年龄、周期类型、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)日孕酮水平、获卵数、移植胚胎阶段、累计胚胎评分与双胚胎移植后多胎妊娠相关,OR(95%CI)分别为0.62(0.55~0.70)、0.84(0.77~0.92)、0.86(0.80~0.92)、1.21(1.12~1.31)、1.28(1.13~1.46)、1.19(1.15~1.23)。单胚胎移植后,仅高累计胚胎评分与多胎妊娠风险降低有关(OR:0.68;95%CI:0.47~0.99)。结论:移植胚胎数、年龄、周期类型、hCG日孕酮水平、获卵数、移植胚胎阶段、累计胚胎评分是辅助生殖治疗后多胎妊娠的影响因素。 展开更多
关键词 辅助生殖技术 胚胎移植 多胎妊娠 相关因素
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卵泡液外泌体在卵泡细胞功能调节中的机制研究进展
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作者 李凯全 张婧宜 冒韵东 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期713-718,737,共7页
卵泡液是卵泡细胞生长发育的内环境,其成分的变化与卵泡细胞的功能状态息息相关。近年来,人们发现在许多生物体液中都存在一种直径为30~150 nm的双层膜囊泡结构——外泌体(exosome),并揭示了它在众多生理病理过程中的媒介作用。研究者... 卵泡液是卵泡细胞生长发育的内环境,其成分的变化与卵泡细胞的功能状态息息相关。近年来,人们发现在许多生物体液中都存在一种直径为30~150 nm的双层膜囊泡结构——外泌体(exosome),并揭示了它在众多生理病理过程中的媒介作用。研究者也在卵泡液中鉴定出了外泌体成分,并发现它与卵泡细胞的生长发育有着密切的联系,并间接影响了卵母细胞状态,这对评估卵母细胞质量有着重要意义。 展开更多
关键词 卵泡液 外泌体 胞外囊泡 MIRNA circRNA 卵母细胞
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基于床旁即时超声分析胚胎移植前患者饮水量对胚胎移植超声显像的影响 被引量:1
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作者 冒文盈 苏振玉 +2 位作者 孙秋菊 傅嘉希 鲁南 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第7期750-754,共5页
目的基于床旁即时超声(POCUS)技术,探讨在胚胎移植前为获得良好膀胱充盈效果的合适摄入水量;不同饮水量对移植时超声成像、困难移植率,胚胎移植成功率以及子宫内膜蠕动的影响。方法收集2023年9月至2024年2月在江苏省人民医院生殖医学中... 目的基于床旁即时超声(POCUS)技术,探讨在胚胎移植前为获得良好膀胱充盈效果的合适摄入水量;不同饮水量对移植时超声成像、困难移植率,胚胎移植成功率以及子宫内膜蠕动的影响。方法收集2023年9月至2024年2月在江苏省人民医院生殖医学中心进行冷冻胚胎移植周期324例患者。根据随机分组原则,将患者分为饮水量300 mL、500 mL和700mL 3组。移植当日患者晨起至移植饮水前量控制在300 mL以内(包括流质食品),在移植前2 h排空膀胱,记录3组患者移植前膀胱充盈的效果并基于POCUS技术和移植后的三维超声,观察患者饮水量、膀胱充盈效果、移植后子宫内膜蠕动、患者满意度以及妊娠结局之间的关联性。结果基于POCUS分析,饮水量为700 mL的患者有最佳的、且在最短时间内获得良好膀胱充盈成像效果(P<0.05)。患者晨起饮水量、满意度评分、移植困难率、子宫内膜蠕动频率差异无统计学意义(P>0.05)。多因素分析提示,饮水量和膀胱充盈效果与妊娠结局之间无直接关联,仅影响成像效果。结论饮水量与膀胱充盈程度及超声成像清晰度密切相关,对子宫收缩、移植困难率、妊娠结局并无显著影响。为获得更佳的成像效果,建议胚胎移植前2 h饮水700 mL。 展开更多
关键词 胚胎移植 饮水 膀胱充盈 超声 妊娠 子宫内膜蠕动
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体外受精-胚胎移植前检测宫颈分泌物支原体及衣原体意义的探讨 被引量:13
6
作者 孟艳 王媁 刘嘉茵 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期7-10,共4页
目的:分析体外授精/单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)前解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染与妊娠结局的关系。探讨IVF/ICSI-ET前常规检测宫颈分泌物UU和CT的临床意义。方法:回顾性分析2008年1-12月首次在该中心行IVF/ICS... 目的:分析体外授精/单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)前解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染与妊娠结局的关系。探讨IVF/ICSI-ET前常规检测宫颈分泌物UU和CT的临床意义。方法:回顾性分析2008年1-12月首次在该中心行IVF/ICSI-ET,术前进行宫颈分泌物UU和CT检测的患者共1 802例,根据UU和CT检测结果,将患者分为UU和CT均阴性、UU阳性、CT阳性3组,比较各组间受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、种植率、异位妊娠发生率和流产率有无差异以及CT或UU感染与不孕类型、是否存在盆腔因素病因、阴道清洁度、对移植操作的影响等关系。结果:不孕患者IVF/ICSI-ET治疗时UU感染患者的妊娠结局未受到影响.CT感染对妊娠结局有负面影响。结论:对于无症状的UU感染患者IVF术前不必要投入大量抗生素治疗,对于CT感染者建议治愈后进行胚胎移植。 展开更多
关键词 体外受精 胚胎移植 单精子卵胞浆内显微注射 解脲支原体 沙眼衣原体 妊娠 流产
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两种未成熟卵母细胞体外成熟培养液的运用效果比较 被引量:5
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作者 冯婷 王守林 +2 位作者 刘嘉茵 钱晓乔 蔡令波 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期121-127,共7页
目的:通过比较自行研配的培养液与商品化培养液在卵母细胞体外成熟中的运用效果,为进一步优化体外成熟培养体系提供依据。方法:分别选择使用自行配制培养液的(IVM-A组)110个周期和使用商品化(IVM-B组)培养液的99个周期,并以同期行ICSI... 目的:通过比较自行研配的培养液与商品化培养液在卵母细胞体外成熟中的运用效果,为进一步优化体外成熟培养体系提供依据。方法:分别选择使用自行配制培养液的(IVM-A组)110个周期和使用商品化(IVM-B组)培养液的99个周期,并以同期行ICSI的治疗周期为对照(ICSI-C1和ICSI-C2),比较两组在体外成熟、胚胎发育、胚胎种植、临床妊娠及结局等方面的差异。结果:在两对照ICSI-C1和ICSI-C2各项指标无差异的情况下,IVM-A组体外成熟和胚胎发育等方面均高于IVM-B组,且可移植胚胎率、优质胚胎率明显提高(P<0.05或P<0.01),可移植胚胎率已达到ICSI组水平。虽然表面上IVM-A组在胚胎种植率、妊娠率(临床妊娠率)、活产率等指标低于IVM-B组,但不同阶段的对照组其指标明显改变,ICSI-C2(2006年以后)明显好于ICSI-C1。这种差异可能与近年来的临床治疗方案的改善及宫腔镜的使用有关。值得注意的是,IVM-A的流产率只有10.53%,显著低于其他3组,而同期的对照(ICSI-C1)却明显高于ICSI-C2,提示使用自行配制培养液培养的胚胎可显著降低流产的发生。但由于样本量还不够大,结果尚待进一步验证。结论:自行配制的培养液具有较好的运用效果,可能与其中额外添加的mHFF及E2等有关。但系统尚需进一步优化,以保证其高效、安全、价廉。 展开更多
关键词 培养液 人成熟卵泡液 卵母细胞体外成熟(IVM) 胚胎发育 妊娠
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小鼠NR4A1基因小分子干扰RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定 被引量:3
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作者 薛凯 李梅 +3 位作者 刁飞扬 凌静 崔毓桂 刘嘉茵 《医学研究生学报》 CAS 2009年第2期115-119,I0001,共6页
目的:构建表达小鼠NR4A1基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体。方法:根据siRNA靶序列设计并合成2条互补的64bp寡核苷酸。pShuttle-H1穿梭质粒经BglⅡ、HindⅢ双酶切后,与退火的寡核苷酸进行连接,构建穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA。... 目的:构建表达小鼠NR4A1基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体。方法:根据siRNA靶序列设计并合成2条互补的64bp寡核苷酸。pShuttle-H1穿梭质粒经BglⅡ、HindⅢ双酶切后,与退火的寡核苷酸进行连接,构建穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA。PmeⅠ酶切pShuttle-H1-siRNA,然后分别将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1和穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA转化至BJ-5183感受态细菌中进行同源重组。PacⅠ酶切线性化重组质粒pAdEasy-H1-siRNA后转染AD-293细胞进行病毒包装和扩增。Westernblot检测NR4A1基因的表达。结果:穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA经双酶切和测序证实构建成功,进一步构建了表达小鼠NR4A1基因的siRNA重组腺病毒载体,重组腺病毒AdH1-siRNA/NR4A1感染小鼠睾丸间质细胞瘤细胞(MLTC-1)后显著抑制目的蛋白表达(抑制率为70%~90%)。结论:成功构建了表达小鼠NR4A1基因的siRNA重组腺病毒载体AdH1-siRNA/NR4A1,并在MLTC-1中验证其抑制NR4A1蛋白表达,为进一步研究NR4A1基因在多囊卵巢综合征(PCOS)中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 重组腺病毒载体 核受体NR4A1 多囊卵巢综合征
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供精人工授精患者的心理变化及调治 被引量:9
9
作者 陈小青 杨晓玉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期957-958,共2页
不育症的发生率近年来呈上升趋势,其现代生殖治疗最常见的是人工授精,包括供精人工授精(AID)、丈夫人工授精(AIH)和体外受精—胚胎移植(IVF-ET)[1]。南京医科大学第一附属医院临床生殖中心自2006年2月恢复开展AID工作一年来,共接... 不育症的发生率近年来呈上升趋势,其现代生殖治疗最常见的是人工授精,包括供精人工授精(AID)、丈夫人工授精(AIH)和体外受精—胚胎移植(IVF-ET)[1]。南京医科大学第一附属医院临床生殖中心自2006年2月恢复开展AID工作一年来,共接待要求AID的夫妇636对,签署知情同意书289对,AID治疗524个周期。 展开更多
关键词 供精人工授精 心理变化 护理
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核内不均一核糖核蛋白A2/B1在子宫内膜异位症组织中的表达 被引量:2
10
作者 康苏娅 顾丽萍 +8 位作者 谢满鑫 林敏 马翔 朱叶飞 沙家豪 刘嘉茵 周作民 韩素萍 冒韵东 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期449-451,共3页
目的:研究核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜、患者异位内膜间的表达差异。方法:用免疫组织化学法和Western blot分析,研究3例... 目的:研究核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜、患者异位内膜间的表达差异。方法:用免疫组织化学法和Western blot分析,研究3例增生中晚期正常子宫内膜、3例增生中晚期EMs患者的在位内膜和异位内膜中,hnRNP A2/B1蛋白的表达差异。结果:hnRNP A2/B1主要表达于间质和腺上皮细胞的细胞核内,且EMs患者在位内膜和异位内膜中的表达强度,均低于正常内膜中的表达(P<0.05);而患者在位内膜和异位内膜中的表达,无明显差异(P>0.05)。结论:hnRNP A2/B1可能参与EMs的发生和发展。 展开更多
关键词 核内不均一核糖核蛋白A2/B1 子宫内膜异位症 免疫组织化学 WESTERNBLOT
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人IL-1RⅡ基因腺病毒载体的构建及在子宫内膜异位症细胞中的表达 被引量:1
11
作者 侯振 周静 +2 位作者 高李英 胡艳秋 刘嘉茵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1102-1105,共4页
目的:利用AdEasy XL系统,构建并鉴定IL-1RII基因重组腺病毒载体,并在子宫内膜异位症(EM)细胞中表达。方法:PCR扩增含有IL-1RII全长cDNA的片段,亚克隆到pShuttle-CMV穿梭质粒,经酶切和测序验证无误后,再经电转化与pAdEasy-1质粒在大肠杆... 目的:利用AdEasy XL系统,构建并鉴定IL-1RII基因重组腺病毒载体,并在子宫内膜异位症(EM)细胞中表达。方法:PCR扩增含有IL-1RII全长cDNA的片段,亚克隆到pShuttle-CMV穿梭质粒,经酶切和测序验证无误后,再经电转化与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒。经过抗性筛选、酶切鉴定以及再次测序验证无误后得到阳性的重组质粒,经PacI酶切线性化再在293细胞中进行包装扩增,用ELISA检测IL-1RII蛋白的表达。利用Adeasy XL系统的对照载体pShuttle-CMV-LacZ同上操作作为对照。收集的重组腺病毒感染原代培养的EM基质细胞,并以免疫组化法鉴定IL-1RII表达。结果:测序证实连接后IL-1RII序列完全正确;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;pShuttle-CMV-LacZ转染293细胞3d后X-gal染色阳性,回收病毒可以重复感染293细胞,ELISA鉴定表达IL-1RII可溶性蛋白,证明病毒包装成功。重组的腺病毒感染EM基质细胞后,免疫组化法证实IL-1RII表达。结论:成功地构建了IL-1RII基因重组腺病毒载体,并且在EM基质细胞中表达,为进一步研究IL-1RII基因在EM中的作用乃至生物治疗都奠定了基础。 展开更多
关键词 IL-1RⅡ基因 adeasy XL系统 子宫内膜异位症
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核受体NR4A1蛋白在大鼠卵泡发育中的定位及其表达规律 被引量:2
12
作者 翟永宁 刁飞扬 刘嘉茵 《医学研究生学报》 CAS 2007年第1期32-35,I0011,共5页
目的:通过研究核受体NR4A1蛋白在正常雌性SD大鼠不同卵巢功能周期和不同发育阶段卵泡及黄体细胞中的表达,推测其在卵泡发育中的生物学作用。方法:利用阴道涂片的方法,按不同的卵巢功能周期将实验大鼠24只分为四组,采集不同时期卵巢标本... 目的:通过研究核受体NR4A1蛋白在正常雌性SD大鼠不同卵巢功能周期和不同发育阶段卵泡及黄体细胞中的表达,推测其在卵泡发育中的生物学作用。方法:利用阴道涂片的方法,按不同的卵巢功能周期将实验大鼠24只分为四组,采集不同时期卵巢标本,采用免疫组织化学方法观察卵巢中NR4A1蛋白的定位及其表达情况。结果:NR4A1蛋白主要表达于卵巢卵泡膜细胞和黄体细胞胞质中,且在成熟卵泡卵泡膜细胞的表达量显著高于生长卵泡(P<0.01);在新鲜黄体细胞中表达量最高,显著高于动情前期和动情期的生长卵泡和成熟卵泡以及陈旧黄体细胞中的表达水平(P<0.01)。结论:核受体NR4A1蛋白表达与卵泡的发育、成熟、闭锁、黄体萎缩有明显的相关性。 展开更多
关键词 核受体NR4A1 卵巢 卵泡膜细胞 黄体细胞
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微刺激和自然周期中IVF和ICSI的结局分析
13
作者 冯婷 钱晓乔 +2 位作者 高彦 王媁 刘嘉茵 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1236-1239,共4页
目的 :探讨高龄、因卵巢功能减退、有诱导排卵禁忌证等反复种植失败的患者,采用克罗米芬微刺激或自然周期体外受精(in vitro fertilization,IVF)/单精子卵胞浆内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗,分析关于卵母细... 目的 :探讨高龄、因卵巢功能减退、有诱导排卵禁忌证等反复种植失败的患者,采用克罗米芬微刺激或自然周期体外受精(in vitro fertilization,IVF)/单精子卵胞浆内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗,分析关于卵母细胞质量及胚胎发育潜能的数据。方法:分析微刺激周期和自然周期不同受精方式下的实验室数据,包括获卵率、卵子成熟率、正常受精率、正常卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、妊娠率。结果:2010年1月~2012年11月,共完成IVF/ICSI治疗周期2 565个,其中克罗米芬微刺激周期1 752个,自然周期813个。随着周期数的增加,正常受精率、卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、妊娠率及临床妊娠率呈上升趋势。结论:对于卵巢功能减退、高龄、有诱导排卵禁忌证等卵巢低反应的患者,优质胚胎率低下和(或)反复移植失败的低生育力患者,使用微刺激或自然周期方案是优先选择的方案。 展开更多
关键词 自然周期 微刺激 胚胎发育
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人原核期胚胎的核仁数量与胚胎质量的相关性研究
14
作者 钱云 冯婷 +4 位作者 陈娟 蔡令波 刘嘉茵 张燕 冒韵东 《医学研究生学报》 CAS 2005年第5期385-387,390,共4页
目的:探讨受精卵核仁的具体数量与受精卵卵裂、可移植胚胎和优质胚胎率间的相关性。方法:精卵结合后16~18h观察受精情况,分别计数雌、雄原核的核仁数目,相对应观察每个受精卵的发育情况。分析两个原核核仁数目之间的比值、和值以及差... 目的:探讨受精卵核仁的具体数量与受精卵卵裂、可移植胚胎和优质胚胎率间的相关性。方法:精卵结合后16~18h观察受精情况,分别计数雌、雄原核的核仁数目,相对应观察每个受精卵的发育情况。分析两个原核核仁数目之间的比值、和值以及差值与移植当日胚胎质量之间的相关性。结果:雌、雄原核核仁数目之间的比值与移植当日的优质胚胎率存在显著相关。当核仁数的比值>1.25时,受精卵的卵裂率、可移植胚胎和优质胚胎率均有降低趋势。虽然核仁数目之间的差值、和值与卵裂率、可移植胚胎和优质胚胎率均无显著相关,但随着核仁数目之间差值的逐渐增大,受精卵的卵裂率、可移植胚胎和优质胚胎率均有下降趋势;而随着核仁数目之间和值的逐渐增大,受精卵的优质胚胎率有逐渐升高的趋势。结论:受精卵核仁的具体数量与受精卵卵裂、可移植胚胎和优质胚胎率之间存在相关性。核仁的具体数量对预测种植日的胚胎质量有一定的价值。用于移植应选择两个原核间核仁数目比值相对较小的受精卵。 展开更多
关键词 受精 原核 核仁数 胚胎发育
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人毛乳头细胞在聚乙烯乙烯醇膜上的生长特征研究
15
作者 李中明 范卫新 +2 位作者 许文嵘 林永丽 崔毓桂 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期407-410,共4页
目的:观察人毛乳头细胞聚集性生长特征。方法:将人毛乳头细胞在聚乙烯乙烯醇(EVAL)膜上以不同的密度梯度进行体外培养,观察人毛乳头细胞聚集性生长特征,与普通细胞培养板培养作对照,并对膜上培养的人毛乳头细胞进行鉴定,电镜扫描观察。... 目的:观察人毛乳头细胞聚集性生长特征。方法:将人毛乳头细胞在聚乙烯乙烯醇(EVAL)膜上以不同的密度梯度进行体外培养,观察人毛乳头细胞聚集性生长特征,与普通细胞培养板培养作对照,并对膜上培养的人毛乳头细胞进行鉴定,电镜扫描观察。结果:将传代培养的人毛乳头细胞以(80~120)×10~3个/1.1 cm^2接种至铺有EVAL膜上培养时,平均3~5 d后出现人毛乳头细胞的球形聚集体,对照组中人毛乳头细胞呈现平铺至多层聚集生长的特征,通过α-平滑肌肌动蛋白(SMA)及碱性磷酸酶对毛乳头细胞形成的球形聚集体进行免疫组化检测、电镜扫描发现其与刚分离的人头皮毛囊毛乳头形态相似。将形成的毛乳头细胞微聚体在普通培养板中重新贴壁,仍具有多层平铺生长至多层聚集生长特征。结论:在EVAL膜上培养的人毛乳头细胞具有聚集成球形生长的能力,其比在普通培养基上培养更能体现毛乳头细胞聚集性生长的特征,且形态上与刚贴壁的人毛乳头相似,为研究毛乳头细胞聚集性生长特征及为毛乳头细胞诱导毛囊再生提供了新的思路。 展开更多
关键词 毛乳头细胞 聚乙烯乙烯醇膜 聚集性生长
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人胚胎干细胞向下丘脑神经祖细胞的诱导分化受高雄激素影响
16
作者 李真真 覃莲菊 +3 位作者 宁松 崔毓桂 马翔 刘嘉茵 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1252-1262,共11页
目的:研究体外诱导人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)向下丘脑神经祖细胞分化,并以此为细胞模型,观察不同浓度雄激素对下丘脑神经祖细胞分化的影响。方法:鉴定hESC细胞株CCRM22,体外诱导CCRM22向下丘脑神经祖细胞分化,对其... 目的:研究体外诱导人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)向下丘脑神经祖细胞分化,并以此为细胞模型,观察不同浓度雄激素对下丘脑神经祖细胞分化的影响。方法:鉴定hESC细胞株CCRM22,体外诱导CCRM22向下丘脑神经祖细胞分化,对其进行初步的细胞生物学鉴定;在分化培养基中添加1×10-8mol/L、1×10-7mol/L睾酮(以无水乙醇为助溶剂对照),收集不同分化时期细胞,比较分化效率;利用RT-qPCR、流式细胞术、免疫荧光检测等方法鉴定分化细胞,并检测生殖功能调控相关基因的表达。结果:CCRM22分化为下丘脑神经祖细胞的效率超过85%,但睾酮处理降低其分化效率;分化细胞表达神经细胞标志物NESTIN以及下丘脑神经祖细胞特异性标志物NKX2.1,同时表达KISS1和雄激素受体(androgen receptor,AR),且AR的表达水平与睾酮浓度呈正相关。结论:成功诱导hESC分化形成下丘脑神经祖细胞,高浓度睾酮处理抑制hESC向下丘脑神经祖细胞分化,该细胞模型可应用于后续体外研究多囊卵巢综合征女性孕早期高雄激素环境对后代下丘脑神经细胞分化和发育的影响。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 高雄激素 人胚胎干细胞 诱导分化 下丘脑神经祖细胞
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