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人血清中cTnI的化学发光酶免疫分析研究──实验条件的优化
被引量：
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作者
何农跃
郭会时
+2 位作者
顾春荣
杨笛
张寄南
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期242-245,共4页
采用高效化学发光试剂3-（2＇-螺旋金刚烷）-4-甲氧基-4-（3＇-羟基）苯-1，2-二氧杂环丁烷磷酸（AMPPD）作为检测底物，并将传统的ELISA两步双抗夹心法改为一步法，得到了高灵敏测定人血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）的化学发光酶免疫分...
采用高效化学发光试剂3-（2＇-螺旋金刚烷）-4-甲氧基-4-（3＇-羟基）苯-1，2-二氧杂环丁烷磷酸（AMPPD）作为检测底物，并将传统的ELISA两步双抗夹心法改为一步法，得到了高灵敏测定人血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）的化学发光酶免疫分析优化条件．采用单因素变化法和方阵滴定法得到的最佳实验条件为：捕获抗体包被浓度为10．00μg/ml，以pH=7．0的PBS作为免疫反应缓冲底液，以含质量分数为1．0％的BSApH=9．6的碳酸盐溶液缓冲液，于4℃封闭过夜，生物素-检测抗体（Biotin—IsG2）以及碱性磷酸酶．亲和素（AIJP—Avidin）结合物均采用1：2000稀释度，免疫反应条件为37℃，孵育时间60min，以去离子水作为洗涤剂，以1：100稀释的AMPPD作为发光反应底物，发光反应时间10min（37℃）．检出限为0．02ng／mL，比现行ELISA法灵敏度提高一个数量级；测定周期约75min，比两步法ELISA快得多；线性范围（0．04-36．20ng／mL）比ELISA法扩宽了两个数量级；加标回收率97．5％-102．8％，对标准样品的测定结果与用ELISA法的测定结果吻合；重复性好，3个样品批内变异系数均小于8．5％（n=12）．
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关键词
化学发光免疫分析
急性心肌梗死
AMPPD
心肌肌钙蛋白(cTnI)
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职称材料
题名
人血清中cTnI的化学发光酶免疫分析研究──实验条件的优化
被引量：
1
1
作者
何农跃
郭会时
顾春荣
杨笛
张寄南
机构
东南
大学
生物电子学国家重点实验室
南京医科大学第一临床医学院心血管病研究所
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期242-245,共4页
基金
国家自然科学基金(批准号:60571032
90606027和60121101)
+1 种基金
江苏省高新技术项目(批准号:BG2003033)
高等学校博士学科点专项科研基金(批准号:20050286014)资助
文摘
采用高效化学发光试剂3-（2＇-螺旋金刚烷）-4-甲氧基-4-（3＇-羟基）苯-1，2-二氧杂环丁烷磷酸（AMPPD）作为检测底物，并将传统的ELISA两步双抗夹心法改为一步法，得到了高灵敏测定人血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）的化学发光酶免疫分析优化条件．采用单因素变化法和方阵滴定法得到的最佳实验条件为：捕获抗体包被浓度为10．00μg/ml，以pH=7．0的PBS作为免疫反应缓冲底液，以含质量分数为1．0％的BSApH=9．6的碳酸盐溶液缓冲液，于4℃封闭过夜，生物素-检测抗体（Biotin—IsG2）以及碱性磷酸酶．亲和素（AIJP—Avidin）结合物均采用1：2000稀释度，免疫反应条件为37℃，孵育时间60min，以去离子水作为洗涤剂，以1：100稀释的AMPPD作为发光反应底物，发光反应时间10min（37℃）．检出限为0．02ng／mL，比现行ELISA法灵敏度提高一个数量级；测定周期约75min，比两步法ELISA快得多；线性范围（0．04-36．20ng／mL）比ELISA法扩宽了两个数量级；加标回收率97．5％-102．8％，对标准样品的测定结果与用ELISA法的测定结果吻合；重复性好，3个样品批内变异系数均小于8．5％（n=12）．
关键词
化学发光免疫分析
急性心肌梗死
AMPPD
心肌肌钙蛋白(cTnI)
Keywords
Chemiluminescent immunoassay
Acute myocardial infarction
AMPPD
Cardiac troponin I（cTnI）
分类号
O657.39 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
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1
人血清中cTnI的化学发光酶免疫分析研究──实验条件的优化
何农跃
郭会时
顾春荣
杨笛
张寄南
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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