雷帕霉素对雄性小鼠生殖能力的影响及相关机制探讨

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作者 谢婕 《当代医药论丛》 2017年第23期29-31,共3页

目的 :探讨免疫抑制剂雷帕霉素对雄性小鼠生殖能力的影响及相关机制。方法 :将29只不同日龄的SPF级B6雄性小鼠作为实验动物,将其中12只8 w的小鼠分为对照组小鼠(6只)与喂食组小鼠(6只)。将雷帕霉素加入小鼠的饲料中,为喂食组小鼠喂食4... 目的 :探讨免疫抑制剂雷帕霉素对雄性小鼠生殖能力的影响及相关机制。方法 :将29只不同日龄的SPF级B6雄性小鼠作为实验动物,将其中12只8 w的小鼠分为对照组小鼠(6只)与喂食组小鼠(6只)。将雷帕霉素加入小鼠的饲料中,为喂食组小鼠喂食4周。为对照组小鼠喂食正常的饲料。采用Western blot结合RT-PCR法检测m TOR信号通路重要组分蛋白在不同日龄的小鼠睾丸中表达的水平。采用睾丸和附睾HE染色法观察两组小鼠睾丸的大小、生精细胞的发育状况及附睾内精子的数目。采用CASA检测仪检测两组小鼠成熟精子的活力。采用western blot法检测对照组和喂食组小鼠睾丸组织中m TOR通路重要组分蛋白表达的水平。结果 :m TOR和Raptor在21 d的小鼠睾丸中呈高表达,Rictor在14 d的小鼠睾丸中呈高表达。与对照组小鼠相比,喂食组小鼠睾丸重量减小(t=7.907,P=0.001)。与对照组小鼠相比,喂食组小鼠的精子活力减弱,其精子中快速、中速及慢速运动精子的占比均降低,其精子中不运动精子的占比升高(P<0.05)。与对照组小鼠相比,喂食组小鼠睾丸中各级生精细胞的排布较混乱,其附睾中精子的细胞数量减少,其睾丸组织中m TOR信号通路重要组分蛋白Raptor/Rictor表达的水平下降,其下游直接作用蛋白p-S6、p-S473-AKT、p-T308-AKT表达的水平也下降。结论:免疫抑制剂雷帕霉素能够导致雄性小鼠睾丸和附睾的结构异常,影响其睾丸中成熟精子的生成。此药可通过影响m TOR信号通路的功能干扰雄性小鼠精子发生的过程。 展开更多

关键词 雷帕霉素 MTOR信号通路 小鼠 生殖能力 精子发生

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不同胚胎移植策略对体外受精临床结局的影响 被引量：4

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作者 董娟 蔡令波 +4 位作者 曾桥 马龙 夏梦 刘嘉茵 千日成 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2015年第5期368-371,共4页

目的:比较人类胚胎体外培养第3天4种胚胎移植策略的临床结局。方法:回顾性分析了本中心2010年1月—2012年12月收治的≤35岁患者的第3天胚胎移植周期,均为第一次促排卵周期,采用控制性促排卵长方案和短方案,排除供精周期和遗传性疾病患者... 目的:比较人类胚胎体外培养第3天4种胚胎移植策略的临床结局。方法:回顾性分析了本中心2010年1月—2012年12月收治的≤35岁患者的第3天胚胎移植周期,均为第一次促排卵周期,采用控制性促排卵长方案和短方案,排除供精周期和遗传性疾病患者,获卵数≥2个。根据移植胚胎数及评分(评为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级,Ⅰ、Ⅱ级为高评分胚胎,Ⅲ、Ⅳ级为低评分胚胎)分为4组:A组移植1枚高评分胚胎,B组移植2枚高评分胚胎,C组移植1枚高评分胚胎和1枚低评分胚胎,D组移植2枚低评分胚胎。比较4组的临床妊娠率、胚胎着床率、双胎率、流产率和活产率。结果:4组的流产率分别为8.67%、10.34%、13.54%、20.00%,差异无统计学意义(χ2=4.146,P=0.246);B组的每周期临床妊娠率和活产率分别为55.94%、49.38%,均高于A组(32.05%、28.63%)和C组(42.86%、37.72%),差异有统计学意义(P<0.000 1),C组的每周期临床妊娠率和活产率高于A组,差异有统计学意义(P<0.01);然而,B组的双胎率(36.31%)高于A组(0.67%)和C组(27.60%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:选择1枚高评分胚胎与1枚低评分胚胎协同移植,可获得可接受的每周期临床妊娠率和活产率,亦未提高双胎率。 展开更多

关键词 受精 体外 胚胎移植 生殖技术 辅助 胚胎评分

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一种新型线粒体DNA深度测序方法的准确性评估

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作者 朱琳 林颖 +5 位作者 朱玉青 黄明涛 梁栋 胡平 许争峰 张军 《临床检验杂志》 CAS 2023年第3期167-170,共4页

目的 与基于长片段PCR(lrPCR)的传统mtDNA测序方法比较,评估本课题组前期研究开发的一种新型非PCR依赖的mtDNA深度测序方法的可靠性。方法 同时采用新方法和传统方法对10例产前筛查孕妇外周血样本进行平行试验,对比两种方法所得结果,结... 目的 与基于长片段PCR(lrPCR)的传统mtDNA测序方法比较,评估本课题组前期研究开发的一种新型非PCR依赖的mtDNA深度测序方法的可靠性。方法 同时采用新方法和传统方法对10例产前筛查孕妇外周血样本进行平行试验,对比两种方法所得结果,结合人群数据库(MitoMAP和mtDB)信息,评估新方法的准确性。结果 10例样本中共检出380个变异,其中351个变异同时被两种方法检出,29个变异仅被单一方法检出。对29个不一致变异中出现于2个或2个以上样本的8个变异进一步分析发现,2个仅被新方法重复检出的变异在人群数据库中存在记录;而6个仅传统方法重复检出的变异在人群数据库中未见记录。结论 与传统基于lrPCR的mtDNA测序方法相比,新方法针对同质性变异及高异质度变异的检测能力相当,而针对低异质度变异检测时具有更高的准确性。 展开更多

关键词 线粒体分离纯化 长片段PCR 线粒体DNA 高通量测序 异质性 异质度 变异

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玻璃化冷冻的卵母细胞在卵母细胞捐赠中的应用 被引量：4

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作者 林玉婷 马翔 +5 位作者 蔡令波 曾桥 吴畏 刁飞扬 刘嘉茵 千日成 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2016年第5期362-364,共3页

目的:分析玻璃化冷冻的卵母细胞在供卵周期中的临床结局,以期为卵母细胞捐献的临床应用提供参考。方法:回顾性分析2006年2月—2014年10月南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心216个供卵周期的玻璃化冷冻的卵母细胞,比较解冻后的复... 目的:分析玻璃化冷冻的卵母细胞在供卵周期中的临床结局,以期为卵母细胞捐献的临床应用提供参考。方法:回顾性分析2006年2月—2014年10月南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心216个供卵周期的玻璃化冷冻的卵母细胞,比较解冻后的复苏率、行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)的正常受精率、累计临床妊娠率、种植率和累计活产率等临床结局。结果:解冻玻璃化冻存的卵母细胞的复苏率为82.0%(899/1 097),二原核(2PN)受精率76.9%(691/899)。在216个周期中,胚胎种植率为21.4%(84/393),累计临床妊娠率为33.3%(72/216),累计活产率达27.3%(59/216)。每解冻1枚卵母细胞获得活产儿的概率为6.5%(71/1 097)。结论:卵母细胞玻璃化冻融技术在卵母细胞捐赠的临床应用上可以获得较好的临床结局。 展开更多

关键词 卵母细胞 低温保存 受精 体外 胚胎移植 妊娠结局

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一种基于线粒体分离纯化技术的新型线粒体DNA深度测序方法 被引量：2

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作者 朱玉青 朱琳 +4 位作者 黄明涛 胡平 沈彬 梁栋 许争峰 《临床检验杂志》 CAS 2023年第3期161-166,共6页

目的 开发并评估一种基于线粒体分离纯化技术的线粒体DNA(mtDNA)深度测序方法。方法 探索从细胞中分离mtDNA的最适条件;基于该方法对外周血单个核细胞(PBMC)样本进行mtDNA深度测序,通过测序片段(reads)中mtDNA reads占比评估测序文库中m... 目的 开发并评估一种基于线粒体分离纯化技术的线粒体DNA(mtDNA)深度测序方法。方法 探索从细胞中分离mtDNA的最适条件;基于该方法对外周血单个核细胞(PBMC)样本进行mtDNA深度测序,通过测序片段(reads)中mtDNA reads占比评估测序文库中mtDNA的纯度,通过Sanger测序验证该方法所检出的mtDNA变异的准确性。结果 采用含低浓度NP40和不含Tween-20的裂解液裂解细胞获得的mtDNA纯度高,几乎不含细胞核基因组。在6例PBMC样本中应用该方法检测结果显示,mtDNA reads占比为87.8%~92.8%,且检测出多个mtDNA变异。对其中1个异质性变异和3个同质性变异进行Sanger测序验证,二者结果相一致。结论 本研究开发的基于线粒体分离纯化技术的mtDNA深度测序方法可应用于PBMC样本,能准确且灵敏地检出线粒体基因组的同质性和异质性变异。 展开更多

关键词 线粒体基因组 线粒体DNA 线粒体分离纯化 高通量测序 线粒体基因变异 非PCR

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复发性流产相关精子因素的研究进展 被引量：3

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作者 张馨月 王晖 钱云 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2019年第2期137-141,共5页

复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的病因主要包括遗传、解剖、内分泌因素、感染、免疫功能异常、血栓前状态、孕妇的全身性疾病以及环境因素等。临床研究显示,精子质量与胚胎发育潜能相关。从传统精液参数、精子功能参... 复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的病因主要包括遗传、解剖、内分泌因素、感染、免疫功能异常、血栓前状态、孕妇的全身性疾病以及环境因素等。临床研究显示,精子质量与胚胎发育潜能相关。从传统精液参数、精子功能参数、精子DNA/染色质完整性三个方面综述男性精子因素与RSA之间的关系,希望为RSA的临床诊治提供一定的借鉴意义。 展开更多

关键词 精子 流产 习惯性 精子能动性 DNA碎片裂

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排卵后卵母细胞老化的研究进展 被引量：3

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作者 杨继虹 王晖 钱云 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2018年第1期66-70,共5页

卵母细胞老化与许多不良因素有关,氧化应激和线粒体功能紊乱等均致其质量低下,影响进一步发育。作为卵母细胞老化的一种类型,排卵后卵母细胞老化(POA)在体外培养时较为常见,可造成卵母细胞质量下降、胚胎发育不良,导致妊娠率下降和出生... 卵母细胞老化与许多不良因素有关,氧化应激和线粒体功能紊乱等均致其质量低下,影响进一步发育。作为卵母细胞老化的一种类型,排卵后卵母细胞老化(POA)在体外培养时较为常见,可造成卵母细胞质量下降、胚胎发育不良,导致妊娠率下降和出生缺陷增加。氧化应激是POA过程中的重要触发因素,可激活细胞凋亡通路,影响卵母细胞质量和胚胎发育潜能。现就近年来有关POA的影响因素、与氧化应激的相互作用关系以及使用不同抗氧化剂延缓POA的发生等方面研究进行综述。 展开更多

关键词 卵母细胞 细胞衰老 氧化性应激 抗氧化剂 胚胎发育

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精子顶体发育相关蛋白的研究进展 被引量：2

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作者 常天晴 吴华 +1 位作者 冯睿芝 钱云 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2023年第1期44-49,共6页

受精是新生命诞生的第一步,在此过程中,精子将所携带的单倍体遗传物质与卵子的单倍体遗传物质融合成双倍体合子。哺乳动物的受精过程涉及到一系列复杂而精细的活动,如精子的超活化与获能、顶体反应以及精卵结合等。精子顶体是一种特殊... 受精是新生命诞生的第一步,在此过程中,精子将所携带的单倍体遗传物质与卵子的单倍体遗传物质融合成双倍体合子。哺乳动物的受精过程涉及到一系列复杂而精细的活动,如精子的超活化与获能、顶体反应以及精卵结合等。精子顶体是一种特殊的膜细胞器,具有帽状结构并覆盖在精子的细胞核前部,在受精过程中发挥着关键作用。顶体的形成主要包括囊泡形成、囊泡运输、囊泡融合和顶体与细胞核结合等过程,其独特的蛋白运输机制需要内质网、高尔基体等细胞器以及某些特殊结构之间的相互配合。顶体形成是精子细胞分化为精子的关键步骤之一,受多基因精细调控,其发育缺陷与包括圆头精子症在内的多种男性不育症有关。综述近年精子顶体发育过程中主要生物学事件的发生顺序中相关蛋白的研究,并介绍了自噬相关蛋白对顶体发育过程作用的新近研究,以期为男性不育症的诊疗提供新思路。 展开更多

关键词 精子 顶体 蛋白质类 不育 男(雄)性 精子发生 自噬

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环状RNA在多囊卵巢综合征发生发展中的作用 被引量：1

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作者 皇灵俐 冯睿芝 钱云(审校) 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2021年第6期509-513,共5页

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期女性最常见的生殖内分泌疾病,发病率逐年增高。PCOS的临床表现具有高度异质性,且导致患者生活质量不同程度地下降。越来越多的证据表明,PCOS可能是一种复杂的多基因疾病,受到表观遗传和环境等多种因素的影... 多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期女性最常见的生殖内分泌疾病,发病率逐年增高。PCOS的临床表现具有高度异质性,且导致患者生活质量不同程度地下降。越来越多的证据表明,PCOS可能是一种复杂的多基因疾病,受到表观遗传和环境等多种因素的影响。一些研究对PCOS患者的卵巢组织、胎盘组织进行高通量测序或基因芯片分析,发现多种环状RNA(circRNA)存在差异表达,如hsa_circ_0006877、hsa_circ_0118530。这些差异表达的circRNA可能通过参与卵巢颗粒细胞增殖和凋亡、雄激素的合成和释放等影响卵母细胞的发育以及生殖内分泌平衡。综述circRNA在PCOS发生发展中的作用,为PCOS的临床治疗提供新思路。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 雄激素类 细胞凋亡 粒层细胞 卵泡 环状RNA 卵泡发育

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40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植妊娠结局分析 被引量：18

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作者 夏梦 董娟 +3 位作者 马龙 吴春香 蔡令波 刘嘉茵 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2019年第4期269-275,共7页

目的:探讨40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的妊娠结局,旨在为高龄女性提供生育咨询以及为改善高龄女性个体化辅助生殖治疗结局提供临床依据。方法:选择我院生殖中心2015年1月-2017年12月女方年龄≥40岁且使用自身卵子行体外... 目的:探讨40岁以上高龄女性体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的妊娠结局,旨在为高龄女性提供生育咨询以及为改善高龄女性个体化辅助生殖治疗结局提供临床依据。方法:选择我院生殖中心2015年1月-2017年12月女方年龄≥40岁且使用自身卵子行体外受精的共2 467个治疗周期资料,对各项临床数据进行回顾性分析。结果:40岁及以上行辅助生殖治疗的患者,随着女性年龄增加获卵数明显减少(40~48岁女性平均获卵数分别为2.97、2.69、2.17、2.01、1.77、1.61、1.68、1.29和1.00,44~48岁与40~43岁依次组间比较均P<0.05),尤其是44岁以上女性胚胎发育潜能明显降低(40~48岁囊胚形成率分别为48.90%、43.72%、33.67%、34.29%、24.39%、21.14%、26.32%、16.67%和0%,44~48岁与40~43岁组间依次比较均P<0.05)。共有518个周期行新鲜胚胎移植,结果显示,随女性年龄增加,临床妊娠率(40~48岁临床妊娠率分别为26.92%、21.15%、20.79%、10.96%、18.87%、11.11%、5.88%、0%和0%,43~48岁与40~42岁组间依次比较均P<0.05)、种植率(40~48岁种植率分别为23.65%、19.51%、17.70%、8.54%、7.49%、10.81%、5.56%、0%和0%,43~48岁与40~42岁组间依次比较均P<0.05)和活产率均显著降低(40~46岁活产率分别为18.46%、10.58%、9.90%、5.48%、5.66%、2.78%和5.88%,43~46岁与40~42岁组间依次比较均P<0.05),43岁以上者结局更差。44岁以上女性自然流产率明显增高(40~45岁流产率分别为31.43%、50.00%、52.38%、50.00%、70.00%和75.00%,44~45岁与40~43岁组间依次比较均P<0.05)。46岁女性仅1例妊娠并分娩,47岁和48岁女性均无成功妊娠。与抗苗勒管激素(AMH)>1.0 ng/mL组相比,AMH≤1.0 ng/mL组妊娠率、种植率及活产率均显著下降(27.04%vs. 14.74%,22.99%vs. 13.50%,15.88%vs. 7.37%;均P<0.05),流产率明显升高(41.27%vs. 50.00%,P<0.05)。结论:≥40岁高龄女性随年龄增长生育力逐渐降低。40~43岁年龄段女性助孕仍有一定的价值,尤其是卵巢仍有一定储备者(AMH>1.0 ng/mL),但44岁以上女性原则上不再建议ART助孕,对于46岁以上卵巢功能衰竭的女性强烈建议卵子捐赠或收养。 展开更多

关键词 体外受精 胚胎移植 原发性卵巢功能不全 生育力 高龄

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低离心力对正常及不液化精液精子形态分析结果的影响分析

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作者 高文怡 邓云 +4 位作者 李采霞 张艳茹 金鑫 张东 陈道桢 《临床检验杂志》 CAS 2023年第10期723-726,共4页

目的探讨低离心力对正常精液与不液化精液精子形态分析结果的影响。方法收集2021年1月至12月在解放军联勤保障部队第904医院生殖中心进行精液常规检查与精子形态学检查的169例患者作为研究对象,其中126例为精液常规检查正常患者,43例为... 目的探讨低离心力对正常精液与不液化精液精子形态分析结果的影响。方法收集2021年1月至12月在解放军联勤保障部队第904医院生殖中心进行精液常规检查与精子形态学检查的169例患者作为研究对象,其中126例为精液常规检查正常患者,43例为精液不液化患者。比较126例正常精液采用直接涂片与两种不同低离心力下离心处理所得精子形态学分析结果差异;比较43例不液化精液采用促液化后直接涂片与离心处理所得精子形态学结果差异。结果正常精液标本340×g离心10 min所得的正常形态精子百分率[(9.39±0.50)%]较直接涂片法[(11.08±0.41)%]显著降低,所得精子中段异常率[(62.05±1.44)%]较直接涂片法[(57.17±0.82)%]显著增加;151×g离心10 min所得的正常形态精子百分率[(9.41±0.57)%]亦较直接涂片法显著降低,所得精子中段异常率[(60.95±1.17)%]亦较直接涂片法显著增加。对于不液化精液标本,340×g离心10 min所得的正常形态精子百分率[(9.61±0.60)%]与促液化后直接涂片法[(11.10±0.73)%]差异无统计学意义,所得精子中段异常率[(60.21±1.51)%]与促液化后直接涂片法[(57.36±1.34)%]差异无统计学意义。结论两种低离心力均对精子形态学造成影响。离心力对不液化精液无显著影响。检查精子形态学的临床应用中应参考男性精液性质决定是否离心以及离心力大小。 展开更多

关键词 离心力 精子形态学 正常形态精子百分率 精子中段异常率 不液化精液

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卵巢癌中蛋白翻译后修饰的研究进展

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作者 曹颖 张东 应小燕(审校) 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2023年第4期348-352,共5页

近年卵巢癌的诊治虽已取得较大进展,但其5年生存率不足47%,积极探索新的治疗方法或新靶点十分必要。蛋白翻译后修饰(post-translational modification,PTM)是蛋白质功能调节的重要方式,通过对前体蛋白进行翻译后加工,改变蛋白质的理化... 近年卵巢癌的诊治虽已取得较大进展,但其5年生存率不足47%,积极探索新的治疗方法或新靶点十分必要。蛋白翻译后修饰(post-translational modification,PTM)是蛋白质功能调节的重要方式,通过对前体蛋白进行翻译后加工,改变蛋白质的理化性质、构象和结合能力,从而影响蛋白质的活性、稳定性和功能等方面。目前针对卵巢癌的研究主要集中在磷酸化、乙酰化、O-GlcNAc糖基化、S-棕榈酰化和泛素化等PTM,通过调节多种蛋白质的功能,调控相关信号通路或影响其下游分子的表达,影响卵巢癌细胞的增殖、侵袭、凋亡、耐药及化疗敏感性等。综述PTM在卵巢癌中的研究进展,以期为卵巢癌的精准靶向治疗提供新的理论依据。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 蛋白质加工 转译后 磷酸化 乙酰化作用 糖基化 脂化作用 泛素化

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哺乳动物卵泡相关代谢组学研究进展

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作者 毛菲 冯睿芝 钱云(审校) 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2021年第6期471-475,共5页

卵母细胞质量是决定辅助生殖结局的一项重要因素,创建一种简单可靠的卵母细胞质量评价体系有助于提高辅助生殖的成功率。新兴的代谢组学有望成为评估卵母细胞质量的新方法。目前,代谢组学已广泛应用于女性生殖相关的科学研究,通过对卵... 卵母细胞质量是决定辅助生殖结局的一项重要因素,创建一种简单可靠的卵母细胞质量评价体系有助于提高辅助生殖的成功率。新兴的代谢组学有望成为评估卵母细胞质量的新方法。目前,代谢组学已广泛应用于女性生殖相关的科学研究,通过对卵母细胞、颗粒细胞和卵泡液等样品中的中小分子进行定性和定量分析,研究者们寻找到多种与女性不孕相关的标志性代谢物,涉及糖类、脂质和氨基酸等多种物质的代谢,对于临床不孕症的诊断和治疗具有潜在的应用价值。综述近年哺乳动物卵泡相关的代谢组学研究。 展开更多

关键词 代谢组学 卵母细胞 卵泡液 卵丘细胞 生物标记

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人类胚胎学高级胚胎师的规范化培训体系创建

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作者 蔡令波 严正杰 +1 位作者 崔毓桂 刘嘉茵 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2020年第3期181-184,共4页

胚胎实验室是临床生殖中心的核心部门,胚胎师技术水平直接影响辅助生殖技术(ART)的成功率和安全性。随着我国ART规模发展和人类胚胎学学科建设,迫切需要培养一批高级胚胎师。而一名合格的专业胚胎师,不仅有学历上的要求,更重要的是必须... 胚胎实验室是临床生殖中心的核心部门,胚胎师技术水平直接影响辅助生殖技术(ART)的成功率和安全性。随着我国ART规模发展和人类胚胎学学科建设,迫切需要培养一批高级胚胎师。而一名合格的专业胚胎师,不仅有学历上的要求,更重要的是必须通过严格的专业培训、取得资格证书才能上岗。目前,国内尚未建立完备的针对人类胚胎操作的专业胚胎师的培训、考核和认证体系。南京医科大学第一附属医院生殖医学中心参考国际国内专业规范和指南,通过10多年的实践与提高,在国内较早创建体外受精(IVF)模拟实验室,用于人类胚胎学高级胚胎师的规范化培训,并建立了一套完整的胚胎师考核系统,对临床胚胎师进行技术操作考核和绩效评估,从而监测和评估胚胎师的岗位胜任能力,保证ART治疗的稳定性和安全性。人类高级胚胎师规范化培训体系的建立,将为我国高级胚胎师的培养模式提供借鉴,更有利辅助生殖行业的健康快速发展。 展开更多

关键词 体外受精模拟实验室 胚胎师的培训 考核系统 信息管理 生殖技术 辅助

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